Устранение вирусов: Удаление вредоносных программ с компьютера в Windows 10

Содержание

Удаление вирусов с компьютера | Сканирование, проверка и чистка компьютера от вирусов по низким ценам

Анастасия

Спасибо большое сервисному центру. Удобный график работы. Можно записаться через социальные сети. Дают гарантию,что самое главное при ремонте телефона. Сломался телефон мастер приехал в назначенное время и место. Оценил поломку и предпринял все меры по устранению причины поломки. Мастер вежливый и видно грамотный. Время его работы заняло не больше 20 минут.

Ирек

Обратился сегодня с банальной проблемой для спеца, коим я не являюсь) Реакция на обращение моментальная, так сказать «бросив все». Получил обратно свой смартфон исправным буквально через 5 минут.

Мастер одним словом! Спасибо. Рекомендую, зачёт!

Евгения

Добрый день! Рекомендую сервис на Маяковской. Профессиональные, отзывчивые и неравнодушные сотрудники, готовые прийти на помощь «блондинке со смартфоном». Настроили, актуализировали и подробно объяснили что к чему, за что заслуживают большого человеческого спасибо!

Александр

Приятный сервис, вежливые сотрудники работают качественно и оперативно. Нареканий нет, всё классно.

Артем

После падения телефон начал постоянно выключаться,пришел в данный сервис,специалист оперативно нашел проблему,быстро и качественно все сделал,за что ему огромная благодарность. причем даже денег не взял.пол года назад я менял корпус и аккумулятор в этом же сервисе, тогда тоже скидку большую сделали)))в общем сервис рекомендую,лучше специалистов в городе у нас не найти!!!

Алиса

Хочу выразить благодарность сотруднику Тимофею за качественную и быструю работу.Хороших вам клиентов!

Тимур

Добрый день! Спасибо большое за быструю и качественную работу по замене дисплея на iphone и защитное стекло в подарок, очень приятно, теперь мой телефон как новенький.

Игорь

Большое спасибо Ростиславу за быстро выполненную работу, за честность и качество. Не ожидали, что так быстро все сделают и даже денег не возьмут.

Лариса

Сервис действительно хорош, помощь своевременная, хорошее обслуживание, всё объяснил и рассказал, маленький минус что не укладываются в заявленные 90 минут, но всё равно сделали всё на высшем уровне. Естественно буду обращаться ещё раз и всем так же советую. Цены оправдывают себя и усилия сотрудников. Всё вполне народно и доступно.

Светлана

всего за несколько минут снова ожил в мой телефончик!!!! спасибо,молодой человек!Вы очень внимателен и толковый в своем деле!!! рекомендую в ТЦ Арена!!!!

Алексей

Доброго всем дня! Еще зимой обратилась в этот сервис с серьезной проблемой своего тогда еще нового Xiaomi Redmi-8 (полгода со дня покупки) В моем мобильном глючил экран, причем так, что некоторые операции совершались сами по себе и не поддавались контролю.

Были даже случаи, когда, зайдя в приложение Сбербанк Онлайн, автоматически мог осуществиться перевод. Набор любого текста в СМС стал не возможен: получалась какая-то АБРАКАДАБРА… Короче, телефон стал создавать мне проблемы во всем. И я вынуждена была обратиться к специалистам. Адрес нашла в интернете. Из детального разговора с мастером, я сразу поняла, что мне здесь не будут ничего навязывать, поэтому доверилась ему. Мне было предложено несколько вариантов решения проблемы с подробным описанием расходов (цены были те же, что и на сайте). Я выбрала замену экрана… И не пожалела! На следующий же день, когда все было сделано. мои проблемы сошли на НЕТ, как будто их не было… RESPECT и УВАЖЕНИЕ !!! Рекомендую!

Максим

К счастью редко пользуюсь услугами ремонта смартфонов, но. …все бывает в первый раз. И очень важен первый положительный опыт в этом деле. Первый раз пришел с тем что не заряжался телефон от зарядки. За 2 минуты !!! мастер почистил разъем на телефоне и не взял за это ни копейки. Шок . На радиорынке сказали бы наверное что ты парень попал — там полно работы с заменой полтелефона. Поэтому выбор центра во второй раз ( утопил айфон в бассейне ) был очевиден, хотя ехать на машине из Одинцово в центр Москвы ещё то удовольствие. И снова всё супер. И дело не только в стоимости старенького уже айфона, а в том что я очень не люблю процесс переноса данных на новый. В общем быстро, качественно и за разумные деньги. И огромная благодарность Коноваловой Лидии за то , что постоянно держала меня в курсе этапов ремонта. Так приятно когда такие симпатичные люди помогают решить твои временные жизненные неприятности. С телефоном пока всё нормально. Надеюсь что надолго. Спасибо, ребята.

Андрей

Добрый день! В который раз обратился в Ваш сервисный центр и остался в очередной раз доволен. Детали всегда в наличии, ремонт занимает минимум времени, не успеешь кофе до пить как уже все будет готово. Отличные мастера, благодарю! Всем советую!

Лали

Грамотный и вежливый персонал, качественный ремонт! Лучшая точка в городе, всем рекомендую!

Николай Юрьевич Полянский

Очень приятный коллектив, цены не кусаются) Мастера своего дела! Советую всем сервис

Екатерина Романова

Очень рада что попала именно к ним

Лилия

Очень вежливый персонал, все быстро и оперативно, оказанными услугами осталась довольна

Карим

Очень понравилось качество обслуживания в этом сервисном центре.

За пару минут устранили проблему с зарядкой телефона, бесплатно, вежливо и качественно. Рекомендую этот центр.

Денис

Обращались в сервис на Алексеевской неоднократно, всегда быстро, качественно, доброжелательно. Всем рекомендую

Anastasia

Пришла заменить вход для зарядки. Молодой человек посмотрел, и просто почистил его. Заняло меньше 5 минут. Денег не взяли. Очень рекомендую

Кира

Сильно разбила телефон, перед походом в салон проконсультировалась по телефону о ценах и времени работы, очень понравилось общение в чате, вежливость и быстрый ответ на любые вопросы. Сам ремонт занял меньше обещанного времени. На сайте и в салоне написано, что в подарок бесплатное защитное стекло, к сожалению, стекло мне не поставили, потому что его не было в наличии, но сделали бонусом чистку телефона. Больше всего меня удивили бумаги, которые я подписывала, в предыдущем салоне, в котором я ремонтировала уже другой телефон, не было никаких гарантий и договоров, мне очень понравилась ответственность работы салона! Цены средние, но качество работы замечательное! Я смело могу рекомендовать данный салон

Иван

Обратился с проблемой на iPhone 7, не заряжался телефон, на месте все объяснили и рассказали, очень компетентный сотрудник Александр, ответил на все вопросы, предложил альтернативные варианты, сделал свою работу качественно и быстро, обязательно обращусь ещё раз

Удаление вирусов с компьютера и ноутбука

Удаление вирусов с компьютера и ноутбука

На сегодняшний день для большинства пользователей работа на компьютере не мыслима без Интернета. Как раз этим и пользуются разработчики вирусов и других вредоносных программ! В основном вирусы создаются для того, чтобы незаконно получать доступ к данным, хранящимся на компьютере. Особый интерес для злоумышленников представляют Ваши пароли, ведь зная их, они без труда могут получить доступ ко всем сервисам, которыми Вы пользуетесь! В отдельную группу выделяются вирусы, которые созданы с одной единственной целью – сделать так, чтобы Ваш компьютер перестал стабильно работать. Также в последнее время стали популярными вирусы-вымогатели. Т.е. блокирующие компьютер и под угрозами обращения в ФСБ, МВД, КНБ, Папе Римскому… требующие у Вас деньги за разблокировку. ВЕРИТЬ ЧТО ВАС РАЗБЛОКИРУЮТ ЕСЛИ ВЫ ОПЛАТИТЕ НУЖНУЮ СУММУ КАТЕГОРИЧЕСКИ НЕ РЕКОМЕНДУЮ! Ибо это обычные мошенники, и они либо не “увидят” Ваших денег на своем счете, либо код не подойдет, либо что угодно еще ! И ДАЖЕ если блокировку все-таки снимет, то она через незначительное время появится опять. Вирус как был на Вашем компьютере, так и остался. Пока Вы его не удалите – будут очередные вымогательства ! Либо вирусы-шифровальщики. Обычно рассылаются через электронную почту от доверенного контакта, либо от имени Суда, Прокуратуры, Полиции и т.п. Так работает шифровальщик VAULT. До недавнего времени не было решения этой проблемы. Сейчас где-то в половине случаев уже есть результат, получается расшифровать и передать клиенту свою информацию. Также распространенное заблуждение – если Вы не пользуетесь интернетом то у Вас просто не могут быть вирусы по определению… Это конечно же ошибочное мнение, ибо вирусы в основной массе распространяются через флешки, диски, и любые другие источники переноса информации. С каждым днем вирусов становится все больше и только профессиональная настройка антивирусной защиты может избавить Вас от большинства проблем, возникающих при работе с Интернетом. Мы всегда готовы предложить полный комплекс программных средств, которые помогут Вам защититься от большинства видов вирусов и избежать негативных последствий их вредоносной деятельности!

Дезинфекция дома от вирусов и инфекций

Вирусы и бактерии сопровождают нас ежесекундно, при этом формируется иммунитет организма. Но в период сезонных заболеваний важно снизить риск их распространения на поверхностях. Узнайте, как обеспечить чистоту и гигиену вашего дома.

Текущая пандемия напомнила нам о том, как важно заботиться о чистоте и гигиене поверхностей, чтобы избежать распространения патогенной микробиологической среды. Дезинфекция помещений в медицинских, школьных и дошкольных учреждениях проводится регулярно. При этом мало кто задумывается о принятии подобных мер в домашних условиях, хотя дезинфекция дома от вирусов может быть проведена самостоятельно. За советами по обработке помещений от патогенных микроорганизмов обратимся к экспертам.

Правила проведения дезинфекции в домашних условиях

Регулярная уборка в жилых помещениях предупреждает распространение большого количества вирусов и бактерий, способных вызывать заболевания, а применение различных методов обработки позволяет пресечь все возможные пути распространения.

Дезинфекция помещений от вирусов дома может быть выполнена несколькими способами:

  • Физическим. Микроорганизмы на поверхности предметов поражаются путем воздействия различных физических факторов – обработки горячим паром, кипячением, а также облучением ультрафиолетом и ионизацией.

  • Механическим. Удаление вирусов в этом случае происходит при смывании их с любых поверхностей водой с чистящими средствами, а в случае тканевых материалов – стиркой.

  • Химическим. Борьба с микроорганизмами ведется с применением различных дезинфицирующих или чистящих средств и их растворов. Одним из наиболее эффективных дезинфицирующих компонентов в настоящее время является гипохлорит натрия.

Противовирусная обработка чаще всего проводится с использованием сразу нескольких из перечисленных методов: все поверхности промываются чистящим средством с дезинфицирующим эффектом или его раствором с последующим промыванием, изделия из ткани по возможности стираются при высокой температуре, а по окончании обработки комнаты проветриваются до устранения специфичного запаха.

Применение гипохлорита натрия в составе чистящих средств и их растворов позволяет уничтожать широкий спектр микроорганизмов, снижая риск их дальнейшего распространения через воду и контактным способом. В чистящих гелях Domestos содержится от 2 до 5% активного хлора (гипохлорита натрия), что позволяет использовать их для очищения с дезинфицирующим эффектом поверхностей дома в концентрированном и разбавленном виде. Доказано, что гипохлорит натрия справляется с вирусами, включая коронавирус нового типа SARS-COV-2*, бактериями и грибками.

Как правильно проводить дезинфекцию

Дезинфекция помещений от вирусов дома подручными средствами может быть выполнена самостоятельно без использования помощи специалистов. Процесс обработки помещений во многом напоминает генеральную уборку, но проводится с большей тщательностью. Перед обработкой из помещения убираются все изделия из текстиля – пледы, шторы и мебельные чехлы стираются, высушиваются и убираются в полиэтилен до окончания уборки.

В жилых комнатах, а затем на кухне, в санузле, ванной и прихожей все поверхности обрабатываются раствором гипохлорита натрия. Дезинфицирующий раствор можно приготовить, например, на основе геля Domestos Свежесть Атлантики, следуя инструкции на упаковке. Очищение поверхностей начинается с верхнего яруса комнат – промываются светильники, потолок, окна, мебель, двери, выключатели. Для обеззараживания мягкой мебели можно использовать пульверизатор. Для полной обработки помещения всю мебель необходимо отодвинуть от стен и промыть поверхности за ней.

Важно перед применением раствора гипохлорита натрия убедиться, что поверхность устойчива к его воздействию, так как он обладает отбеливающими свойствами. После обработки все поверхности нужно промыть чистой водой.

В комнату, где проводилась дезинфекция, рекомендуется не переносить вещи, не подвергнувшиеся обработке. В этом случае уборка может не иметь смысла, так как возможный источник попадает в помещение после нее.

Уборка с дезинфекцией заканчивается обязательным проветриванием всех помещений в течение нескольких часов – это позволяет не только устранить запах чистящего средства, но и полностью обновить в комнатах воздух, который мог содержать патогенные микроорганизмы.

Правила безопасности

Гипохлорит натрия считается одним из наиболее эффективных средств при борьбе с вирусами, бактериями и грибками. Вещество безопасно для здоровья человека при применении по назначению и соблюдении инструкции, указанной на упаковке средства. Дезинфекционные работы с использованием чистящих средств, содержащих гипохлорит натрия, и их растворов проводятся при строгом соблюдении мер личной безопасности.

К средствам индивидуальной защиты при работе с дезинфектантами относятся:

  • резиновые перчатки,

  • защитные очки,

  • респиратор.

Остатки средства следует смыть чистой водой

Помимо личной защиты меры предосторожности во время обеззараживания помещений включают в себя:

  • соблюдение инструкции на упаковке средства,

  • отсутствие в помещении пожилых людей, детей и домашних животных,

  • обязательное смывание остатков средства после обработки поверхностей,

  • проветривание помещения до устранения специфичного запаха.

Растворы гипохлорита натрия подходят исключительно для дезинфекции поверхностей и не могут использоваться в качестве обеззараживающих средств кожи.

Влияние дезинфицирующих средств на окружающую среду

Растворы гипохлорита натрия активно используются во всем мире для обеззараживания воды и дезинфекции в медицине, промышленности и в быту. Процент применения данного ингредиента в общем объеме дезинфектантов составляет более 90%, но для достижения баланса между результатом и безопасностью нужно строго следить за концентрацией используемого раствора.

Процесс воздействия гипохлорита натрия на микроорганизмы схож с тем, которые протекает в организме человека, — некоторые клетки синтезируют хлорноватистую кислоту для поражения чужеродных вирусов и бактерий.

Гипохлорит натрия – неустойчивое соединение, которое при попадании в окружающую среду разлагается на воду, поваренную соль и кислород. Рабочие концентрации вещества соответствуют требованиям качества и безопасности для окружающей среды. Средства Domestos при использовании согласно инструкции не представляет опасности!

Будьте здоровы и берегите себя и свою семью, это так важно в это непростое время.

*на основании микробиологических тестов США, 2020

Способы устранения вирусов — Компьютерные вирусы

Лечение и удаление вирусов.

Если вы все же столкнулись с необходимостью удаления компьютерных вирусов, первое и главное правило: не предпринимайте необдуманных действий. Конечно, можно произвести лечение и удаление вирусов некоторых видов вручную, если вы знаете, какого типа файлы относятся к вредоносным. Если знания не позволяют вам удалить вирусы вручную, необходимо воспользоваться специализированным  ПО – антивирусами. Основной способ удаления вирусов – это сканирование операционной системы антивирусной программой. Современный антивирус успешно справляется с удалением вирусов с флешки, HDD и других носителей.

Основные методы:

Почти все современные антивирусные программы имеют набор функций для удаления вирусов вручную: «Поместить в карантин», «Исправить» и «Удалить».

«Поместить в карантин»

После сканирования антивирусом выбранной области носителя первое, что предлагает вам антивирусная программа, это «поместить в карантин»  зараженный вирусом файл. При помещении в карантин антивирус блокирует пользователю доступ к этому файлу и, как следствие, распространение вируса по системе.

«Исправить»

Функция «Исправить» позволяет находить и лечить зараженные вирусами файлы. Антивирусная программа сама проверяет код файлов, находит в нем участок кода, содержащий вирус и удаляет его. Получается, что после «лечения» вируса файл возвращается в состояние, в котором  он был до заражения. Эту функцию рекомендуется выполнять в первую очередь при удалении вирусов с компьютера.

«Удалить»

Но не всегда антивирус предлагает нам «исправить» зараженный файл, в связи с тем, что антивирусная программа просто не может распознать часть постороннего (вирусного) кода. Остается только один путь –  удалить файл целиком. В этом случае, если все же выбрать кнопку «удаления», вы рискуете удалить важный для операционной системы файл, что повлечет за собой нестабильную работу операционной системы или попросту приведет к тому, что ваш Windows не загрузится. Будьте внимательны, прежде чем удалять зараженные вирусами файлы, обязательно посмотрите, что за файл вы удаляете, и за что он отвечает. Если не знаете, какой файл хотите удалить – НЕ УДАЛЯЙТЕ.

Все эти операции можно произвести лишь в том случае, если ваша операционная система загружается. Но как поступить, если Windows не грузится? Чтобы удалить вирусы с жесткого диска, в случае нерабочей операционной системы, необходимо использовать специальное ПО, например, LiveCD. ОС загружается с внешнего носителя, и запускается программа сканирования файлов на жестком диске. После лечения вирусов обязательно выполните резервное копирование данных на внешний носитель. Затем жесткий диск можно полностью отформатировать и установить новый Windows. Этот способ является самым трудоемким и продолжительным, но вместе с тем самым надежным.

Удаление вирусов | Белтерги

Фильтрация с целью удаления вирусов представляет собой высокоэффективный метод для снижения вирусного загрязнения сред для культур клеток, поскольку эти фильтры задерживают как вирусы без оболочек, такие вирус MVM и вирус PPV, так и крупные оболочечные вирусы, такие, как вирус MLV.

Области применения:
Снижение вирусной опасности сред определенного химического состава
Снижение вирусной опасности перфузионных подкормок
Для стерильных среди компонентов.

Надежная технология удаления вирусов компании «Sartorius» используется множеством промышленных предприятий, поскольку обеспечивает максимальную безопасность для вашей клеточной культуры и при этомне оказывающая влияния на ее производительность. Все фильтры компании «Sartorius», удерживающие вирусы, постоянно обеспечивают логарифм величины уменьшения концентрации (LRV) > 4 для мелких вирусов без оболочек на в течении всего срока службы.

Надежное функционирование в широком диапазоне скорости потока и условий процесса -> Максимально возможная безопасность.

Высокоэффективные мембраны из полиэфирсульфона -> Для поточной фильтрации в перфузионных культурах достигается пропускная способность до 10000 л/м2, отсутствие влияния на параметры клеточной культуры.

Испытание на целостность (диффузионным методом) -> Простота, безопасность, быстрота, рентабельност.

Имеем возможность предложить фильтры семейства Virosart®, обеспечивающие наивысшую вирусную безопасность на этапе завершения процесса очистки биофармацевтического продукта. Предназначены для надежного и эффективного удаления вирусов из раствора.

Virosart_HC
Virosart® НС обеспечивает самую высокуювирусную безопасность биофармацевтических продуктов. Фильтр задерживает болеечем 4 log10 небольших вирусов без липидной оболочки (парвовирус свиней илимелкий вирус мышей) и более чем 6 log10 больших вирусов с липиднойоболочкой (например, вирус лейкемии мышей).

Virosart HF
Данные модули применяются для вируснойфильтрации моноклональных антител (мАТ), фрагментов антител или небольшихрекомбинантных протеинов (

Virosart CPV
Фильтрующие элементы Virosart® НСспециально созданы для удаления вирусов из потоков, содержащих плазмучеловеческой крови и крови животных,а также гидрофобных антител ирекомбинантных белков (

Virosart Max
Virosart® Мах обеспечивает высочайшийуровень защиты последующего мембранного фильтра для удаления вирусов.  

Подборная информация предоставляется по запросу.

Услуга «Удаление вирусов с сайта»

Ваша заявка получена!

Мы свяжемся с вами в ближайшее время

Вернуться на сайт

Ваша заявка получена!

Мы свяжемся с вами в ближайшее время

Вернуться на сайт Главная / Услуги / Поддержка сайтов / Удаление вирусов с сайта

Если Вы получили уведомление, что Ваш сайт атакует компьютеры пользователей, очевидно, у Вас завелся вирус. В 2011 году мы писали о том, как самостоятельно найти и вылечить простые вирусы. Однако, вирусы совершенствуются и стандартные антивирусы уже не всегда находят их
В связи с этим мы предлагаем услугу – Удаление вирусов с сайта

Услуга «Удаление вирусов с сайта» включает в себя

Схема работы

01

Вы

Присылаете запрос
в свободной форме

02

Мы

Оцениваем сроки, стоимость,
и согласовываем с Вами

03

Вы

Оплачиваете 50%
оценочной стоимости

04

Мы

Создаем тестовую версию,
git-repository, выполняем работы

05

Вы

Принимаете работу
и оплачиваете остаток

06

Мы

Устронияем недочеты, если они
выявлены после сдачи работ

Все работы учитываются через систему Project Manager, и вы в реальном времени
сможете смотреть, какие задачи выполняются, сколько потрачено времени,
какие сложности возникли при выполнении работ

Отправить запрос

Стоимость лечения сайта зависит от:

Восстановим ваш сайт

от 2 часов до 5 дней
для сайтов с системами управления

Гарантия на все
работы от 30 дней

Качественный
и оперативный сервис

Мониторинг работы
сайта 24/7

Поддержка любых
CMS

Единая стоимость
часа

Персональный
менеджер

Стоимость удаления вирусов с сайта

Стоимость работы зависит от количества часов, чем больше часов, тем дешевле итоговая сумма

  • До 50 часов Небольшие правки на вашем сайте выполняет 1 разработчик

    2300 ₽/час

  • 51-150 часов Выделяем от 1-го до 2-х разработчиков для выполнения
    значительных изменений на сайте или решения любых проблем

    2100 ₽/час

  • 151-300 часов Комплексное решение для вашего сайта.
    Выделяем от 2-х до 4-х разработчиков на выполнение любых задач

    2000 ₽/час

  • 300+ часов Для крупных проектов — от 4-х разработчиков

    1900 ₽/час

  • Отправить бесплатный запрос на расчет стоимости работ Для этого заполните форму, и Для получения стоимости работ с учетом Ваших требований, отправьте нам запрос
    в свободной форме, мы свяжемся с Вами — уточним детали и сообщим стоимость работ

    Бесплатно

    Узнать стоимость
Узнать стоимость Обратный звонок

Интеграция Битрикс с Яндекс.Маркетом,
ускорение работы сайта и сервера, поддержка и развитие с 2014 года

Смотреть проект

Администрирование серверов, доработка функционала, рефакторинг, доработка и поддержка с 2018 года

Смотреть проект

Разработка CRM-системы для станции тех. обслуживания авто, поддержка и развитие сайта с 2018 года

Смотреть проект

Разработка, интеграция с 1С, создание интерактивной карты с отметками всех действующий аптек

Смотреть проект

Интеграция с Яндекс.Маркет.
интернет-эквайринг,
ускорение загрузки сайта

Смотреть проект

Создание английской версии сайта,
переход на HTTPS, настройка IPv6, редизайн, поддеержка сайта с 2017

Смотреть проект

Реализован прием платежей online, выполнен ряд работ по политике безопасности, доработка и поддержка с 2016 года

Смотреть проект

Контроль нагрузок на сервер, устранение проблем в случае возникновения, работа с контентом, поддержка сайта с 2015

Смотреть проект

Разработка сайта, обеспечение взаиморасчетов между заказчиками и курьерами и многое другое

Смотреть проект

Интернет-система для управления автовозами, сбора статистики, ведения учета и планирования

Смотреть проект

Comodo Internet Security Pro | Удаление вирусов

Лучшая на рынке технология по предотвращению вирусных угроз.
Гарантировано.

Comodo Internet Security Complete 10 гарантирует защиту против вирусов и малвэра, фокусируясь на предотвращении, а не просто выявлении. Наша запатентованная технология по устранению создает непроницаемый щит, который определяет безопасные, опасные и сомнительные файлы. Internet Security Complete 10 предлагает защиту от вирусов, Троянов, спама, шпионских программ и других вредоносных программ в режиме реального времени. Другие антивирусные продукты зависят от обновления информации о вирусах, но технология Auto Sandbox означает что вы защищены даже от неизвестных угроз.

$500 Гарантия «без вируса»*

Comodo верит что компании по производству програмного обеспечения должны отвечать за свою продукцию, поэтому мы поддерживаем Сomodo Internet Security Pro 10 уникальной гарантией. Если ваш ПК когда либо будет инфицирован, наши эксперты в сети исправят проблему без лишних затрат. В поддержку, гарантия Comodo покрывает затраты на ремонт вашего ПК эквивалентом до $500, в случае если ваш компьютер инфицирован вирусом или вредоносными программами и не может быть приведен в рабочее состояние. С программой Internet Security Pro 10 вы получаете безопасность, программное обеспечение, техническую поддержку и личное спокойствие.

Больше, чем просто комплект защиты.

Internet Security Pro 10 это больше, чем просто комплект защиты. вам так же предлагается круглосуточный доступ к нашим высококвалифицированным экспертам, готовым оказать помощь в любое время. Просто нажмите на иконку на вашем рабочем столе и вас соединят с экспертом Comodo, который поможет вам через чат и удаленное соединение с вашим компьютером.

Брандмауэр

Брандмауэр от Comodo постепенно занимает одну из самых высоких позиций по результатам статистики

Технология Defense+

Активная защита с целью автоматической изоляции угроз от подозрительных файлов, для того чтобы они не могли причинить вред, собственно предотвращая инфекцию, а не только определяя ее. Облачная база белых списков проверенного издателя легко определяет безопасный файл и вендора.

Технология Auto Sandbox

С целью снижения сбоев работы пользователя, незнакомые файлы запускаются только в виртуальной среде, где они не не могут навредить Windows, его регистру или важной базе данных.

Минимальные сбои в работе

Internet Security Pro 10 сама решает, блокировать ли незнакомые программы или пропустить. Игровой режим приостанавливает те операции, которые могут мешать пользователю получать удовольствие от игры. К ним относятся предупреждения, обновления вирусных баз данных или плановые сканирования.

Сканирование на наличие шпионских программ

Сканер шпионских программ определяет и чистит инфекции мэлвэра в регистре компьютера и на его дисках.

Облачный Антивирус

Сканирование облачным антивирусом определяет вредоносный файл, даже если пользователь не имеет последних данных о вирусе.

Безлимитное удаление вирусов нашими экспертами онлайн

Наши эксперты очистят ваш ПК, удалят старую антивирусную программу, и позаботятся о том чтобы ваш компьютер оставался «чистым»

Гарантия «Без вирусов»

Если компьютер на котором установлен Internet Security Pro 10 инфицирован вирусом или вредоносной программой и не может быть восстановлен нашими экспертами, мы покроем стоимость ремонта в сертифицированном сервисе Comodo суммой до $500

Совместимость

Windows 10, Windows 8, Windows 7, Windows Vista and Windows XP (32-бит and 64-бит).

Чем Comodo Internet Security Pro 10 лучше чем мой нынешний Антивирус и Брандмауэр?

Internet Security Pro 10 добавляет дополнительный уровень предупреждения-«Defense +». Он известен как HIPS или Система Предотвращения Взлома Компьютера. Антивирусная программа-это чистящий инструмент, который сканирует неизвестные вирусы и удаляет их даже после того, как они «пустили корни». Comodo является как предотвращающим так и чистящим инструментом, который останавливает потенциальные вирусы «у дверей». Работает это путем исследования каждого файла, пытающегося запуститься в вашем компьютере и мгновенно сравнивая его с файлами из белых списков надежных файлов и черных списков опасных файлов. Если файл не находится ни в одном из списков, он запрещается программой Auto Sandbox. Таким образом, вы защищены и все еще можете работать , пока файл не будет добавлен к одному из списков или не будет разрешен или удален.

Чем Comodo Internet Security Pro 10 отличается от других комплектов Интернет-защиты?

Даже самое лучшее предупреждение эффективно только тогда, когда у пользователя есть необходимая поддержка. Поэтому Comodo заботится о том, чтобы специалисты работали 24 часа в сутки 7 дней в неделю и помогали клиентам в очистке ПК, удалении старого Антивируса и о том, что бы компьютер оставался чистым. Большинство проблем у ПК возникают из за вредоносных программ и, в следствии этого, Comodo не только заботится о том, чтобы вы были защищены, но и том, чтобы вас всегда ждал специалист, что бы устранить проблему, уничтожить вирус или просто убедиться в том, чтобы не оказалось дальнейших проблем.

Что такое Sandbox и как он меня защищает?

Sandbox это виртуальная оперативная среда, созданная внутри вашего компьютера для неизвестных и подозрительных программ. Internet Security Pro 10 автоматически запускает подозрительные программы в сэндбоксе, где они не могут навредить Windows, его регистру и важной базе данных. Эта защита стоит на порядок выше традиционного антивирусного программного обеспечения, так как она полностью изолирует новые вирусы, которые могут причинить вред.

Как работает Отдаленная Настройка Защиты и Онлайн Помощь ?

После активации подписки, включенную в Internet Security Pro 10, нажмите на иконку на рабочем столе для начала разговора с экспертом. Эта услуга стоит дороже, чем обычная техподдержка, поскольку дает возможность разрешить проблему удаленно, безлимитно и круглосуточно. Лицензия покрывает 3 компьютера.

Каким образом Comodo защитит мой компьютер от вирусов?

Comodo Internet Security Pro 10 позаботится о том, что бы ваш ПК оставался без вирусов с помощью расширенных функций. Технология Defense+ не позволит подозрительным файлам запуститься на вашем ПК. Благодаря технологии Auto Sandbox все файлы будут тестированы и запущены в надежной виртуальной среде, прежде чем они попадут в компьютер.

Что делать, если я пользуюсь Comodo Internet Security Pro 10 и в мой компьютер попал вирус?

При вероятном заражении вирусом, вам следует обратиться к нам немедленно. Для этого нажмите кнопку «Помощь» в консоли программы. Если вы не можете подключиться к интернету, то свяжитесь с нами по телефону, который вы можете найти в письме -подтверждении или в инструкции . Если по какой-либо причине ПК не может быть восстановлен нашими специалистами, мы предоставим вам компенсацию в размере до $500 на восстановление вашего компьютера в сервисном центре.

Что нужно, чтобы победить болезнь?

Искоренение болезней — это святой Грааль для чиновников здравоохранения, поскольку искоренение болезней и улучшение здоровья в конечном итоге приносит пользу экосистемам на глобальном уровне. Такие инициативы, как One Health, поддерживаемые Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), направлены на интеграцию здоровья человека, здоровья животных и факторов окружающей среды при решении вопросов профилактики, лечения и искоренения болезней. One Health рассматривает влияние изменения климата, увеличения присутствия людей в ранее незаселенных местах, увеличения взаимодействия человека и животных и глобальной миграции людей и животных на распространение болезней.

На сегодняшний день Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила об официальной ликвидации только двух болезней: оспы, вызываемой вирусом натуральной оспы (VARV), и чумы крупного рогатого скота, вызываемой вирусом чумы крупного рогатого скота (RPV). Оспа была древней болезнью, которая вызывала эпидемии на протяжении всей истории человечества, что привело к 300-500 миллионам смертей (примерно 10% всех смертей) в 20 веке. Чума крупного рогатого скота была смертельной болезнью крупного рогатого скота, вызывавшей гибель стад крупного рогатого скота по всей Европе и Африке с 18 по 20 века, пока специальная глобальная кампания не привела к ее искоренению.

Волдыри оспы на руке (NCP 10520), Национальный музей здоровья и медицины. Источник: https://www.flickr.com/photos/9[email protected]/3508802522
Коровы, убитые чумой крупного рогатого скота в Южной Африке, 1896 г. Источник: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/3/36/Rinderpest_1896-CN.jpg

Искоренение: определения определяют успех

Искоренение может быть трудно осмыслить. Антрополог-инфекционист Томас Эйден Кокберн определил искоренение болезни как «исчезновение патогена, вызывающего заболевание.По этому определению оспа и чума крупного рогатого скота не искоренены. Образцы обоих вирусов все еще существуют в мире: в США и России надежно хранятся запасы VARV, в то время как образцы RPV остаются во многих учреждениях по всему миру. Вымирание потребует уничтожения этих запасов, сложной темы, затрагивающей геополитические и культурные нормы, а также микробиологию.

Другим определением ликвидации, широко принятым многими организациями, включая ВОЗ, является «постоянное снижение до нуля случаев инфицирования во всем мире, вызванных конкретным агентом, в результате преднамеренных усилий».” Последний зарегистрированный случай оспы произошел в Сомали в 1977 г., а последний зарегистрированный случай чумы крупного рогатого скота – в Кении в 2001 г. С тех пор медицинские работники свернули эти кампании по ликвидации, и новых инфекций не было выявлено, что привело к объявлениям о ликвидации оспа в 1980 г. и чума крупного рогатого скота в 2011 г. Однако попытки искоренить другие болезни имели ограниченный успех. Такие организации, как ВОЗ и Биохаб Чана Цукерберга, перешли к использованию термина «ликвидация болезни» с определением, которое является менее строгим и более достижимым, чем искоренение, в попытке повысить доверие к глобальным инициативам в области здравоохранения.Ликвидация болезней требует не постоянного сокращения заболеваемости во всем мире до нуля, а, скорее, снижения заболеваемости до нуля в определенной географической области. Одним из примеров этого различия может быть ликвидация холеры в таких странах, как Перу, несмотря на то, что Vibrio cholera не ликвидирован во всем мире.

Контрольный список микробиолога для искоренения болезней

Чтобы определить, можно ли искоренить болезнь, примите во внимание науку, политический климат и экономику.Сосредоточившись на научных критериях, ученые и работники здравоохранения могут изучить кампании по ликвидации оспы и чумы крупного рогатого скота. Оба этих заболевания имели особенности, которые способствовали их искоренению.

№1: Легко ли диагностировать или распознать болезнь?

Больной полиомиелитом проходит реабилитацию. Источник: https://flic.kr/p/KxE3q6

Симптомы болезни — это один из способов быстрой диагностики наличия болезни на индивидуальном или общественном уровне.Кампания по ликвидации оспы выиграла от характерных язв и сыпи, вызванных инфекцией VARV. Эти отчетливые симптомы позволили работникам здравоохранения во всем мире легко и эффективно диагностировать пациентов и отслеживать эпидемиологию заболевания в их сообществах. В качестве другого примера, полиомиелит, вызванный полиовирусом (ПВ), вызывает характерный быстроразвивающийся паралич у подгруппы пациентов, который используется в качестве маркера активной передачи инфекции в сообществе.

Чем сложнее методы диагностики болезней, тем меньше шансов, что болезнь будет искоренена.Малярия, болезнь, которая должна была быть ликвидирована, исторически требовала квалифицированных медицинских работников, способных интерпретировать мазки крови пациентов для выявления инфицированных людей. Отсутствие подготовленных паразитологов в эндемичных районах оказалось одной из причин провала кампании 1950-х годов по искоренению малярии.

№ 2: Существует ли нечеловеческий резервуар или переносчик (или и то, и другое)?

Болезнетворные патогены иногда могут инфицировать несколько видов, пересекая филогенетические границы.В этих случаях возбудитель существует в виде, который служит «резервуаром» для будущих инфекций других видов. Рассмотрим SARS, вызванный коронавирусом SARS (SARS-CoV). Хотя вирус мог заражать людей и вызывать тяжелые заболевания, люди не были первоначальным хозяином этого вируса. Предполагается, что нечеловеческим резервуаром SARS-CoV являются летучие мыши, поскольку вирусы, которые имеют поразительное сходство с SARS-CoV, были обнаружены у летучих мышей. Хотя успешные стратегии сдерживания устранили передачу атипичной пневмонии среди людей, продолжающееся присутствие животных-резервуаров означает, что атипичная пневмония еще не ликвидирована.

Другие патогены не только обладают способностью инфицировать несколько видов, но и приспособились использовать один вид-хозяин в качестве «переносчика» для передачи другому виду-хозяину. Многие членистоногие являются переносчиками болезней человека и практически не проявляют симптомов патогенов, вызывающих патологию у людей. Например, лихорадка денге, вызываемая флавивирусом денге (DENV), передается людям через переносчиков комаров. Даже если болезни исчезнут в человеческом населении, их присутствие в нечеловеческих резервуарах или переносчиках делает возможным повторное заражение и дальнейшее распространение.

Поскольку вирус оспы натуральной оспы поражает только людей, он был хорошей мишенью для ликвидации. Передачу вируса от человека к человеку можно остановить с помощью целевых кампаний вакцинации. Точно так же полиовирус, который также поражает только людей, был ликвидирован в 193 странах. Поскольку передача полиомиелита дикого типа ограничивается Афганистаном, Нигерией и Пакистаном, официальное объявление о ликвидации не за горами. Напротив, вновь появляется желтая лихорадка, вызываемая вирусом желтой лихорадки (YFV).В Нигерии усилия по вакцинации против YFV остановили передачу инфекции и привели к падению заболеваемости до нуля в 1996 г. К сожалению, снижение уровня вакцинации, наряду с существованием членистоногих переносчиков и резервуаров приматов, вызвало вспышку желтой лихорадки в сентябре 2017 г. Нигерия пережила сезонные вспышки желтой лихорадки с тех пор.

№3: Заболевание ограничено географически?

Нет никаких сомнений в том, что оспа затронула мировое сообщество. Многие из болезней, которые были ликвидированы (оспа и чума крупного рогатого скота) или подлежат ликвидации ВОЗ, такие как полиомиелит, малярия, корь и краснуха, присутствуют во многих странах.Однако по мере того, как болезнь приближается к искоренению, заболеваемость становится более географически ограниченной. Это явление имеет множественные последствия.

По мере того, как болезнь становится более географически ограниченной, в регионах с нулевой заболеваемостью наблюдается стабилизация выгод от кампаний по ликвидации без каких-либо изменений в социальных, политических и экономических издержках. Это может привести к тому, что страны, которые больше не затронуты этой болезнью, сократят свою поддержку. Эта проблема мешала искоренению оспы, и полиомиелит сталкивается с аналогичным препятствием.

Одним из положительных преимуществ более ограниченной географии является возможность сузить фокус кампании на этих регионах. Некоторые болезни, такие как дракункулез (дракункулез) или фрамбезия, никогда не были широко распространены географически. Таким образом, ВОЗ и другие организации создали целевые кампании, которые поставили эти болезни на грань искоренения.

№4: есть ли вакцина? Существуют ли другие альтернативы, нарушающие передачу?

Вакцины спасли бесчисленное количество жизней и предотвратили невыразимое количество страданий.Стратегии ликвидации оспы и чумы крупного рогатого скота опирались на вакцины, и большинство текущих кампаний по ликвидации болезней включают стратегии вакцинации. Эти кампании, кажется, подчеркивают необходимость вакцины и могут даже предположить, что вакцины имеют решающее значение для искоренения. Но действительно ли вакцина необходима, чтобы свести передачу болезни к нулю?

Дракункулез, скорее всего, будет ликвидирован в ближайшем будущем. Это вызвано проглатыванием личинок Dracunculus medinensis из загрязненных источников воды.Через год после заражения у пациентов появляются мучительно болезненные волдыри на стопах и голенях. Пациенты ищут облегчения, замачивая волдыри в источниках воды, таких как реки и пруды, что вызывает появление взрослых червей, которые выделяют в воду инфекционных личинок. От дракункулеза нет доступных терапевтических средств или вакцин.

Жизненный цикл Dracunculus medinensis. Источник: https://www.cdc.gov/parasites/images/guineaworm/Dracunculiasis_LifeCycle_3.jpg

Каким образом дракункулез близок к искоренению без вакцины? Именно здесь вступают в игру творческие стратегии сдерживания инфекционных заболеваний. Центр Картера в сотрудничестве с ЮНИСЕФ распространил системы фильтрации воды и активизировал усилия по обеспечению питьевой водой пострадавших сообществ. Медицинские работники также не позволяют пациентам заходить в источники воды, вместо этого наматывая взрослую нематоду на палку и медленно и методично вытаскивая ее. Просвещение населения и выявление инфицированных лиц привели к снижению заболеваемости с 3.от 5 миллионов в 1986 году до 53 случаев в 2019 году. Если дракункулез будет искоренен, кампания станет первой, в которой это будет сделано без вакцины, что предполагает наличие нескольких способов искоренения болезни, которые не зависят от наличия вакцины.

Искоренение болезней: путь вперед

Мы не можем забывать, что искоренение болезни зависит не только от научного контекста. Ликвидация оспы и чумы крупного рогатого скота потребовала политических, экономических и социальных просветительских усилий, которые привели к их успеху.Глобальная координация и отслеживание вспышек заболеваний требует сотрудничества на международном уровне. Без политической поддержки глобальные кампании в области здравоохранения не могут рассчитывать на успех. Без экономической поддержки важнейшие ресурсы не могут быть эффективно мобилизованы.

Одним из наиболее тревожных событий последнего времени является возросшее недоверие к науке, о чем свидетельствует рост настроений против вакцинации. Завоевание и поддержание общественного доверия к науке и глобальным инициативам в области здравоохранения станет стержнем кампаний по искоренению.Ликвидация оспы стала прототипом будущих кампаний по ликвидации оспы и позволила извлечь ценные уроки, такие как необходимость политических и бюрократических структур для поддержки усилий по вакцинации и необходимость иметь четкие, измеримые, универсальные цели для отслеживания прогресса в любом конкретном регионе. Станет ли искоренение болезней нормой или оспа и чума крупного рогатого скота останутся исключением? Время покажет.

 

Уничтожение вирусов с помощью термотерапии и культивирования меристем яблони сорта ‘Oregon Spur-II’

Abstract

В настоящем исследовании была предпринята попытка элиминировать вирус хлоротической пятнистости листьев яблони, вирус мозаики яблони, вирус Вирус стеблевой ямчатости яблони сорта ‘Oregon Spur-II’.Термотерапию проводили при 37–40 °С в течение 4 недель с последующим культивированием меристем разного размера. При закладке эксплантов самый высокий процент выживаемости (62,35%) и пролиферации (30,68%) был зарегистрирован в летний период. Однако размер меристем и положение почек, из которых были вырезаны меристемы, также влияли на их выживаемость. Было обнаружено, что меристемы размером 0,6–0,7 мм наиболее подходят для максимального приживания. Лучшие результаты показали меристемы, вырезанные из почек, расположенных на дистиллированных участках активно растущих побегов.Среда MS с добавлением БК (1,0 мг/л), ИМК (0,05 мг/л) и GA 3 (0,1 мг/л) привела к приживанию 56,62% эксплантов, в то время как максимальное количество меристем пролиферировало при низком уровне БК (0,5 мг/л). /л), IBA (0,08 мг/л) и такой же концентрации GA 3 . Наблюдалось двух-четырехкратное умножение. Была проведена вирусная индексация побегов, выращенных из меристем разного размера, и было обнаружено, что размер 0,3–0,6 мм способен устранить ACLSV, ApMV, ASGV и ASPV. Однако некоторые побеги размером 0,5–0,6 мм были обнаружены зараженными вирусом ACLSV. Более крупные меристемы не могли полностью элиминировать изучаемые вирусы.

Электронный дополнительный материал

Электронная версия этой статьи (10.1007/s13337-018-0437-5) содержит дополнительные материалы, доступные авторизованным пользователям.

Ключевые слова: Меристемная культура, ИФА, Яблоко, Термотерапия, Вирусы

Введение

Яблоко заражено более чем 20 вирусами [35]. На выращиваемых в коммерческих целях яблонях вирусы хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), вирус бороздчатости стеблей яблони (ASGV) и вирус ямчатости стеблей яблони (ASPV) являются наиболее распространенными вирусами и обычно появляются при смешанной инфекции, которая значительно снижает рост и продуктивность. зараженных деревьев [7].Для предотвращения потерь урожайности и качества плодовых деревьев из-за вирусных заболеваний большое значение имеет отбор и разработка здорового посадочного материала. Популярный сорт яблок «Орегон Спур-II» рекомендуется для высокогорных районов штата Химачал-Прадеш. Он сильно образует шпоры. Плоды от средних до крупных, конической формы, темно-красного цвета, твердые, сочные и сладкие на вкус. Однако этот сорт заражен многими вирусами, такими как мозаика яблони, хлоротическая пятнистость листьев яблони, ямчатость стебля яблони, бороздчатость стебля яблони и вирус некротической кольцевой пятнистости сливы.

Культура тканей, метод выращивания изолированных тканей и органов, позволяет элиминировать растительные вирусы и размножать свободные от вирусов материалы [23, 24, 33, 36]. Культура меристем является широко используемым методом эрадикации вирусов в садовых растениях [9]. Из-за неравномерного распределения вирусов в растениях ожидается, что меристема будет свободна от вирусов [32]. Поэтому было бы полезно определить размер кончика меристемы, связанный с более высокой эффективностью элиминации вируса.В основном апикальные меристемы часто не содержат вирусов, но известно, что некоторые вирусы действительно вторгаются в меристематические области кончиков растущих растений, и в этом случае также можно было получить свободные от вирусов растения путем сочетания культивирования меристем с термотерапией.

Были предприняты весьма скудные усилия по выращиванию меристемы побегов критического минимального размера для элиминации вирусов в яблоне. Бхардвадж и др. [1] сообщили, что вирус мозаики яблони может быть обнаружен в меристемах длиной более 0,2 мм при взятии меристем размером от 0.от 1 до 1,0 мм. Ху и др. [15] пришли к выводу, что четырнадцать выживших привитых растений яблони из пяти сортов были обнаружены свободными от вируса после термотерапии десяти сортов яблони в сочетании с культурой меристемы in vitro и прививкой кончиков побегов in vivo. Основным преимуществом работы с таким небольшим эксплантатом является возможность исключения патогенных организмов, которые могли присутствовать в растениях-донорах, из культуры in vitro. Вторым преимуществом является генетическая стабильность, присущая этому методу, поскольку получение проростков происходит из уже дифференцированной апикальной меристемы, а размножение из адвентивных меристем исключается.

Кроме того, фенолы препятствуют действию вируса и делают его необнаружимым с помощью биологических средств или традиционных серологических методов. Таким образом, ИФА предлагает простой метод их обнаружения в качестве предварительного условия для любой программы сертификации древесины почек. На сегодняшний день ИФА является одним из наиболее широко используемых серологических тестов для обнаружения вирусов растений. Тест отличается от классической серологической процедуры, в которой используются реакции иммунопреципитации. Иммуноспецифичность распознается посредством действия ассоциированной ферментной метки на подходящий комплекс антиген-антитело-субстрат.Основной принцип ИФА заключается в иммобилизации антигена на твердой поверхности и зондировании специфическими иммуноглобулинами, несущими ферментную метку.

Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы разработать эффективную процедуру эрадикации вируса in vitro на важном сорте яблони ‘Oregon Spur-II’ с учетом оценки различных размеров меристем, их выживаемости и пролиферации на различных комбинациях сред и дальнейшей индексации. вируса, чтобы определить, будет ли их размножение культурой ткани давать побеги, свободные от вируса.

Материалы и методы

Обследование растительного материала

Обследования проводились в яблоневых садах Региональной научно-исследовательской станции садоводства, Машобра и на полях кафедры плодоводства Университета садоводства и лесоводства доктора Ю.С. Пармара Науни, Солан (Х.П.) установить и идентифицировать растения сорта яблони ‘Oregon Spur-II’, инфицированные вирусом мозаики яблони (ApMV), вирусом хлоротической пятнистости листьев яблони (ACLSV), вирусом бороздчатости стебля яблони (ASGV), вирусом ямчатости стебля яблони (ASPV) и кольцевой некротической пятнистостью сливы вирус (PNRSV).В качестве исходного растительного материала использовали инфицированные растения с ярко выраженными симптомами вируса мозаики яблони и вируса хлоротической пятнистости листьев яблони.

Серологическое индексирование вирусов маточных растений

Образцы листьев ‘Oregon Spur-II’, произрастающих на вышеуказанных полях, отмеченных на основании визуальных признаков вируса мозаики яблони и вируса хлоротической пятнистости листьев яблони, были собраны в весенний сезон и исследованы на наличие APMV, ACLSV, ASGV (ACD, Inc) и ASPV, PNRSV (BIOREBA, Швейцария) с помощью сэндвич-ферментного иммуноферментного анализа с двойным антителом (DAS-ELISA), как описано Кларксом и Адамсом [5] с модификациями. Результаты оценивали визуально и колориметрически при 405 нм в устройстве для считывания микротитрационных планшетов (Micro Scan MS 5605 A, Electronics Corporation of India Limited).

Источник меристем в качестве эксплантатов

Источником выделения меристемы считались образцы деревьев, давшие положительный результат на различные вирусы. Зараженные побеги собирали с этих деревьев весной/летом и в периоды покоя и подвергали воздействию температуры 37–40 °C в течение 4 недель при обработке горячим воздухом. Верхушечные и боковые почки, расположенные на дистальной и базальной частях побегов, собирали из термообработанных побегов, промывали 70% этанолом в течение 40 с, а затем обрабатывали 2% гипохлоритом натрия в течение 15 мин.Их четырежды промывали стерилизованной дистиллированной водой и оставляли в ней до удаления меристем.

Иссечение меристем

Меристемы вырезали из почек, из которых без помощи микроскопа удаляли как можно больше листьев почечных чешуек. Оставшиеся чешуйки почек удаляли в асептических условиях, а затем удаляли зачатки листьев, чтобы обнажить точку роста с помощью стереомикроскопа (Olympus). Каждый зачаток листа отделяли от верхушки побега с помощью отдельных стерильных тонких остроконечных щипцов и игл.Меристематический купол с 1–4 листовыми зачатками осторожно вырезали после измерения размера.

Для удаления меристем из покоящихся черенков пазушную почку обрезали сначала с обеих сторон, затем удаляли верхушечную часть и, наконец, разрезали вдоль по верхней стороне, стараясь не повредить листовые зачатки. Затем под стереомикроскопом удаляли листовые зачатки последовательно отдельными стерильными иглами, как это делалось выше.

Образование и пролиферация меристем

Сразу после вскрытия меристемы (0.2–0,7 мм) помещали в стеклянные культуральные пробирки размером 15 × 20 см, содержащие 12 мл среды Мурасиге и Скуга [28] с добавлением 30 г/л сахарозы и различных регуляторов роста растений, т.е. бензиладенина (БА, 0,5–1,0 мг/л) , гибберелловую кислоту (GA 3 , 0,1 мг/л) и индолмасляную кислоту (IBA) или нафталинуксусную кислоту (NAA, 0,01–0,1 мг/л) или индолуксусную кислоту (IAA, 0,12–0,15 мг/л). ), в который дополнительно добавляли адсорбент поливинилпирролидон (ПВП, 0,5 г/л) или антиоксидант аскорбиновую кислоту (100 мг/л).Все среды затвердевали агаром с концентрацией 7 г/л. Всякий раз, когда из среды исключали агар, эксплантаты меристем помещали на подложки из фильтровальной бумаги, содержащиеся в культуральных пробирках.

Через 6 недель жизнеспособные культуры, показавшие первые листья, были перенесены на свежеприготовленную среду MS того же состава в колбах на 250 мл с 30 мл среды для дальнейшего роста стеблей и пазушных побегов. Перед переносом подсчитывали количество побегов, образовавшихся на меристемах разного размера. Длину и количество побегов, полученных из меристемы, дополнительно увеличивали путем их пересева на среду MS с добавлением различных регуляторов роста, т.е.е. БК (0,5–1,0 мг/л), ИМК (0,01–0,1 мг/л) и ГА 3 (0,1–0,5). Каждая выжившая культура была помечена, чтобы ее можно было проследить до размера исходного эксплантата верхушки побега/меристемы. Инокулировали не менее 20 эксплантов на обработку в зависимости от размера меристемы, положения почек, времени года и различных комбинаций регуляторов роста. Каждый эксперимент проводился дважды. Данные о контаминации эксплантов, их приживании на среде с различными комбинациями регуляторов роста, а также о влиянии размера эксплантов на их приживаемость и пролиферацию регистрировали после 6 недель культивирования.Также изучалось влияние сезона года и положения почек на побегах, и данные записывались.

Для индексации вирусов укоренившихся побегов образцы листьев брали из меченых множественных кластеров побегов, выросших из меристем разного размера, и подвергали DAS ELISA. Остальные побеги в этих кластерах содержались на той же среде.

Размножение побегов проверенных на вирусы побегов

После индексации побеги, которые были признаны свободными от тестируемых вирусов, культивировали для дальнейшего размножения на среде MS с добавлением различных комбинаций BA, GA 3 и IBA.Побеги, показавшие положительный результат, отбраковывали. Скорость размножения побегов и длину побегов регистрировали через 5 недель при каждой обработке. Скорость определяли путем подсчета количества новых побегов, образующихся на один побег. Все культуры содержались в помещении с регулируемой температурой при 25 ± 2 °C. Свет состоял из белых люминесцентных ламп и лампы накаливания. Интенсивность света на уровне культур составляла 4000 лк. Фотопериод составлял 16 часов света и 8 часов темноты.

Статистический анализ

Данные, зарегистрированные для различных параметров, были подвергнуты полностью рандомизированному дизайну, CRD [13].Процентные данные были подвергнуты арксинусному преобразованию перед статистическим анализом. Статистический анализ, основанный на средних значениях для лечения, был выполнен с использованием метода дисперсионного анализа (ANOVA) для CRD.

Результаты и обсуждение

Предварительное обследование маточных растений

После проведения обследования плантаций яблони было установлено, что у больных деревьев проявляются типичные вирусные симптомы, такие как хлоротическая пятнистость листьев, мозаика и сморщивание листьев. Хлоротические пятна на листьях были зарегистрированы как преобладающие симптомы в обследованном месте.Специфические для болезни симптомы на листьях указывали на присутствие ApMV и ACLSV. В целом, два дерева (обозначенные S4 и S21) показали положительную реакцию на ACLSV, ASGV и ASPV и ApMV, ASGV и ASPV соответственно. Тепловая обработка побегов Oregon Spur-II проводилась для уничтожения вирусов с зараженных растений, поскольку многие вирусы чувствительны к повышенным температурам. Kassanis [18] и Kassanis and Posnette [19] сообщили, что около половины вирусов, поражающих садовые растения, могут быть уничтожены с помощью термической обработки.В настоящих исследованиях различные факторы, такие как сезон удаления почек, положение источника эксплантатов, термическая обработка и размер удаленных верхушек побегов, по-видимому, оказывают большое влияние на эффективность уничтожения вируса, что согласуется с Tan et al. [34].

Влияние размера меристем на их укоренение

Было замечено, что максимальное количество меристем (37–49%) в диапазоне размеров 0,2–0,4 мм не могло выжить из-за высыхания, в то время как небольшое количество эксплантов высыхало в размерный ряд 0.5–0,7 мм (таблица). Незначительное количество фенолов выделялось из меристем размером от 0,2 до 0,5 мм, в то время как интенсивность потемнения увеличивалась с более крупными эксплантами. Было замечено, что фенольные экссудаты накапливаются вокруг более крупных меристем, культивируемых на твердой среде, в то время как фенолы промываются в жидкой среде и менее токсичны, что оказалось эффективным для создания первичных культур меристем. Jones и Hatfield [17] также использовали жидкую среду с эксплантатами, поддерживаемыми мостиками из фильтровальной бумаги.

Таблица 1

Влияние размера меристем на их формирование

Ср.нет. Размер меристемы (мм) Степень экссудации фенола на среде Меристемы погибли из-за высыхания (%) Меристемы погибли из-за контаминации (%) Процент приживаемости Число эксплантов 901, превратившихся в каллус Количество разрабатываемых NO из побегов Разработаны на
1. 0,4-0.3 48.91
(44.38)
31,52
(34.14)
20,65
(27.00)
14
2. 0.3-0.4 37.14
(37.55)
37.14
(39.49)
25.71
(30.44)
11 3 3 1-2 1-2
3. 0.4-05 25.64
(30.41)
42.30
(40.57)
32.05
(34.48)
14 6 1
4. 0.5-0.6 + + + 17.07
(24.38)
47.56
(43.60)
32.92
(35.01)
16 6 1
5. 0.6-0,7 ++ 12.50
(20.70)
48.86
(44.35) 98.86
(44.35)
36.36
(37.08)
17 9 1-2
S.E. 1,48 2,76 1,61
С.D Степень загрязнения увеличивалась с увеличением размера меристем, поскольку максимальное загрязнение (47–48,86%) наблюдалось на кончиках побегов размером 0,5–0,7 мм, а минимальное (31,52%) — в случае 0,2–0,3 мм. Степень загрязнения с размерами 0.3–0,4 и 0,4–0,5 мм соответствовали друг другу (таблица). Было высказано предположение, что выживаемость эксплантатов меристемы зависит от скорости их микробного загрязнения и побурения эксплантов, которые относятся не только к эксплантам, используемым для инициации культивирования, но также к физиологическому состоянию материнских растений и к сезону сбора эксплантов. [8, 27].

Чтобы воспользоваться преимуществами свободных от вирусов клеток, необходимо взять меристему наименьшего возможного размера, но маленькие экспланты не регенерируют в целые растения, в отличие от крупных меристем.Эти два фактора должны быть сбалансированы для определения оптимального размера эксплантов. В нашем исследовании было замечено, что после 5 недель культивирования меристемы размером 0,2–0,3 мм оказались относительно менее склонными к загрязнению, но их было сравнительно трудно установить. Первоначально они привели к приживанию 20,65%, но через некоторое время развился каллюс. Веландер и Хантристер [40] также наблюдали очень меньшую микробную контаминацию в эксплантатах размером 0,2–0,4 мм, что подтверждает наши результаты. Только экспланты, превышающие 0.Образуются побеги длиной 3 мм. Самый высокий процент приживаемости (36,36%) был достигнут при культивировании меристем размером 0,6–0,7 мм, что также привело к тому, что половина эксплантов пролиферировала в побеги, тогда как другие образовали мозоли, что позволяет предположить, что размер меристемы является одним из наиболее важных факторов, определяющих ее способность к регенерации. Наши результаты подтверждаются Mangal et al. [25], которые обнаружили, что выживаемость увеличивается с увеличением размера, достигающим 100% за пределами 0,7 мм кончика меристемы в случае гвоздики.Частота закладки (32–33%) меристем размером 0,4–0,5 и 0,5–0,6 мм была на одном уровне. После приживания более половины эксплантов превратились в каллус, а остальные сформировали побеги.

Было видно, что максимальный процент выживаемости 24,32 и 35,29 наблюдался в почках, собранных как с базальных, так и с дистальных частей соответственно активно растущих побегов (таблица). Полученные здесь результаты перекликаются с наблюдениями различных авторов [16, 30, 40], которые предположили, что меристемы растущих верхушек побегов развивались значительно лучше, чем меристемы, полученные из спящих почек, так как эндогенные цитокинины регулируют рост меристем из пазушные почки [2].С другой стороны, в период покоя в меристемах, вырезанных из дистальной части побегов, выживаемость составила 27,08 %, и они показали лучшую выживаемость и рост, а в случае базальных почек — 7,40 %, что согласуется с отчетом Голосина и Радоевича. [12].

Таблица 2

Таблица 2

Эффект позиции бутонов на побегах на выживании Meristem

Тип побегов BUD Положение на побега Процент выживания Meristemes
Dormant Shoots Basal 7 .40
(15.73)
Дистал Distal 27.08
(31.34)
Активно растущие побеги Базал 24.32
(29.54)
Дистал 35.29
(36.44)
С.Э. 1,78
К.Д. (0,05) 4,10

Влияние регуляторов роста на укоренение меристемных культур

Из Таблицы 3 дополнительного материала видно, что композиция регуляторов роста, добавленная в среду MS, значительно повлияла на формирование меристем.Из двенадцати испробованных комбинаций максимальный процент приживаемости, т. е. 56,62%, был обнаружен в комбинации 7, которая содержала 1,0 мг/л БК, 0,05 мг/л ИМК и 0,1 мг/л ГА 3 , затем 37,50% в комбинации 4, содержащей 0,5 мг /л БАП, 0,08 мг/л ИБА и 0,1 мг/л ГА 3 . Однако после первого пересева максимальное количество меристем пролиферировало в комбинации 4 со сниженной БА и небольшим увеличением ИМК и считалось лучшей. Подобные регуляторы роста использовались предыдущими исследователями [1, 42] при установлении меристем яблони, однако концентрации IBA и GA 3 были разными, что может зависеть от разных генотипов.Меристемы, культивированные на среде MS с добавлением БАП и ИУК, показали очень низкую частоту укоренения, тогда как три комбинации БК и НУК не способствовали росту меристем, а наименьшая выживаемость (9,5%) наблюдалась при 0,5 мг/л БАП, 0,05 мг/л. NAA и 0,1 мг/л GA 3 . Здесь было видно, что большая часть меристем превратилась в каллус и не могла расти дальше. Образование мозолей может быть связано с добавлением NAA, хотя и в низкой концентрации.

Далее было замечено, что при пересевах побегов с розетками листьев на свежую среду для их удлинения и дальнейшего роста большинство из них становилось коричневым и некротизировалось.Некоторые долгое время оставались зелеными и росли очень медленно. В результате очень немногие меристемы достигли роста на начальных стадиях и уменьшилось количество пролиферирующих побегов, доведенных до стадии размножения. Примерно через восемь недель культивирования побеги, регенерированные из меристем, достигли размера 0,4–0,7 см.

Размножение побегов in vitro

Пролиферированные экспланты привели к множественным побегам во всех протестированных комбинациях (таблица 4 дополнительного материала; и рис.а). На среде MS с добавлением 0,5 мг/л BAP, 0,05 мг/л IBA и 0,1 мг/л GA 3 наблюдалось двух-четырехкратное размножение с побегами длиной 1,0–2,5 см (рис. b). Однако несколько похожая скорость размножения была обнаружена для комбинации 1, которая содержала 1,0 мг/л БАП, 0,01 мг/л ИМК и 0,5 мг/л GA 3 (рис. в), но длина побегов была короче. Коэффициенты умножения в комбинациях 2, 3, 5 были равны друг другу, то есть в два-три раза и прибл. Побеги длиной 0,5–2 см.Эти результаты контрастируют с теми, о которых сообщили Ochatt и Caso [29] для меристем яблони M4, потому что в «Орегонской шпоре-II» количество побегов на эксплант увеличивалось, когда концентрации как BA, так и GA3 в среде размножения уменьшались. Кроме того, наибольший размер и расширение междоузлий позволяли отделить побеги. Скорость пролиферации 2,2 наблюдалась у различных подвоев яблони Габовой [10]. Расположение эксплантов, например, терминальные или боковые побеги, также может влиять на рост меристем и способность побегов к размножению [26].

a Меристема разного размера, полученная из нескольких побегов после индексации, b Побеги на среде для размножения MS с мг/л: BAP 0,5 + IBA 0,05 + GA 3 0,1 и, c BAP и GA 1,0 + 1 IBA 1,0 + 1 IBA 1,0 + 1 3 0,5

Вирусная индексация побегов, укоренившихся in vitro

В наших исследованиях вирусная индексация показала, что сочетание термотерапии с культурой меристем эффективно уничтожает вирусы в ‘Oregon Spur-II’.Эти результаты подтверждают выводы различных исследователей [10, 14, 20], которым удалось уничтожить вирусы с помощью культуры меристем в сочетании с термотерапией. Было замечено, что побеги, развившиеся с меристемами от 0,3 до 0,5 мм, были способны извлекать ACLSV, поскольку значения немного больше, чем в отрицательном контроле. Однако один побег размером от 0,5 до 0,6 мм оказался положительным, а другой — отрицательным. Все побеги, полученные из меристем размером от 0,6 до 0,7 мм, все еще были инфицированы ACLSV, о чем свидетельствуют цветовые реакции и значения ОП (таблица).Было обнаружено, что ApMV отсутствует в побегах, выращенных из меристем размером 0,3–0,6 мм, в то время как присутствует в некоторых побегах, выращенных из меристем размером от 0,6 до 0,7 мм, о чем свидетельствуют их цветовая реакция и О.Д. значения.

Таблица 3

Таблица 3

Вирус Индексация Meristem Производные побеги, показывающие значения OD

0.248 (+ ve)
Название вируса Размер Meristems (мм)
0.3-0.4 0.4-0.5 0.5-0.6 0.5-0.6 0,6–0,7
1.ACLSV 0.099 (-VE) 0.113 (-VE) 0.168 (-VE) 0.201 (+ ve)
0.195 (+ ve) 0.231 (+ ve)
2. APMV 0.076 (-VE) 0.124 (-VE) 0.159 (-VE) 0.193 (-VE)
0.139 0.139 0.139 (−ve) 0,213 (+ve)
3. ASGV 0.087 (-VE) 0.098 (-VE) 0.139 (-VE) 0.174 (-VE)
0.092 (-VE) 0.116 (-VE) 0.148 (-ве) 0.181 (-VE)
0.125 (-VE) 0.153 (-VE) 0.210 (+ ve)
0.219 (+ VE)
0.224 (+ve)
4. ASPV 0,081 (-ve) 0,102 (-ve) 0.132 (-ve) 0.166 (-ve)
0.063 (-VE) 0.113 (-VE) 0.135 (-VE) 0,170 (-VE)
0.117 (- VE) 0.141 (-VE) 0.178 (-VE)
0.193 (+ ve)
0.207 (+ ve)
* + VE Control **+ве контроль ***+ве контроль ****+ве контроль
0.312 0.302 0.302 0.293 0.311
* — Вентилятор ** — VE Control *** — VE Control **** — VE Control
0.097 0,103 0,103 0,103 0,104 0,093

В случае АГГС все побеги, полученные из меристемы в диапазоне размеров 0,3–0,6 мм, показали отрицательные значения, которые либо меньше, чем отрицательный контроль, либо немного больше, чем отрицательный контроль, поэтому были рассмотрены не быть переносчиком инфекции ASGV.Однако меристемы некоторых побегов размером от 0,6 до 0,7 мм были признаны отрицательными, а другие — положительными для АГГС. Ямага и Мунаката [41] обнаружили, что невозможно искоренить вирус ASGV размером от 0,2 до 0,25 мм на кончиках побегов в инфицированных тканях яблони только за счет культивирования кончиков побегов, но путем комбинирования тепловой терапии с рекомендованными кончиками побегов большего размера размером 1 мм. Наши выводы о том, что ASGV и ApMV могут быть устранены из кончиков побегов длиной 0,6 мм благодаря дополнительной термической обработке, подтверждают приведенный выше отчет. В предыдущем отчете все культуры, регенерированные из наконечников длиной 1 мм, хранившиеся при 37 °C и обработанные в течение 35 дней, не содержали этих вирусов [34].ASGV более устойчив к высоким температурам, чем ACLSV, и для элиминации вируса может потребоваться более длительный период тепловой обработки, чем для эрадикации ACLSV [3, 21]. Напротив, при использовании той же термической обработки можно было удалить ASGV длиной от 0,6 до 0,7 мм кончиков побегов в ‘Oregon Spur-II’, в то время как ACLSV присутствовал в этом размере даже меньшего размера. Его можно устранить, используя более длительную термическую обработку, как показано в исследованиях, проведенных ранее [14], во время устранения PNRSV и ACLSV, в то время как Welander и Huntrieser [40] рекомендовали комбинацию термической обработки в течение 2 недель при 37 °C с верхушкой побега. культура яблони и полученные верхушки побегов, свободные от термоустойчивых вирусов.Аналогично для ASPV, из таблицы видно, что меристемы размером 0,3–0,6 мм наблюдались для элиминации этого вируса. Было замечено, что меристемы размером 0,3–0,4 мм показали значения меньше, чем в отрицательном контроле, но по мере увеличения размера значения также увеличивались, но менее чем в два раза по сравнению с отрицательным контролем. Только несколько меристем размером 0,6–0,7 мм были обнаружены зараженными вирусом ASPV, а другие — нет. Когда мы проследили поддерживаемые культуры, было обнаружено, что побеги, развившиеся из верхушек побегов, вырезанных из пазушных почек дистальных частей ветвей, были свободны от ApMV, ASGV и ASPV, за исключением ACLSV.Расчет эффективности термической обработки в сочетании с культурой меристем показал, что все побеги, развившиеся с кончиками длиной от 0,3 до 0,5 мм, были способны уничтожить четыре вируса. Аналогичные результаты были получены с наконечниками длиной 0,5–0,6 мм, за исключением ACLSV. Однако диапазон размеров 0,6–0,7 оказался менее эффективным (таблица). Термотерапия в течение 35 дней значительно снижала титр вирусов в культурах, выращенных из верхушек главных и пазушных побегов яблони [37]. Эти различия могут быть связаны с физиологией растений и условиями роста культуры, которые оказывают дополнительное влияние на накопление вируса, как показано Knapp et al.[22]. Они также сообщили, что распространение вируса было менее локализовано в активно растущих растениях, тогда как растения в стационарной фазе накапливали более высокие уровни вируса, что согласуется с настоящими выводами. Как ASGV, так и ACLSV показали высокие концентрации на кончиках побегов груши и более низкие концентрации в средней части стебля. Однако термообработка оказалась менее эффективной для снижения титров вируса в нижних побегах [39]; тогда как разные модели распространения этих вирусов на растениях яблони наблюдались Knapp et al.[22], которые показали, что ASGV и ACLSV распределяются по всему эпидермису, коре и сосудистым пучкам тканей стебля яблони, на более высоких уровнях в базальном стебле и на более низких уровнях по направлению к верхушке меристемы побега яблони. Различия в распределении обоих вирусов в побегах груши и яблони могут быть связаны с взаимодействием вирус-хозяин [11, 20, 21, 37]. Таблица 4

ACLSV ApMV ASGV ASPV
37–40 °C в течение 4 недель. 0.3-0,4 1/1 1/1 1/1 2/2 2/2 2/2
0,4-01 1/1 2/2 3/3 3 / 3
0.5-0,6 1/2 1/1 3/1 3/3 3/3
0,6-0149 0,6-017 0/3 2 / 5 3/5

Мало что известно о механизме, с помощью которого термотерапия усиливает эрадикацию вируса с кончиков побегов.Некоторые ранние исследования показали, что высокая температура может увеличивать площади, свободные от вируса, подавляя репликацию или движение вируса и повышая скорость роста обработанных растений [6, 18], что приводит к последующей эрадикации вируса с кончиков меристемы. Недавно было обнаружено, что сайленсинг вирусной РНК может значительно усиливаться при высоких температурах [4, 31]. Точно так же сайленсинг РНК усиливался, а вирусная РНК разрушалась в верхушках побегов малины во время термотерапии [38].

В заключение, настоящие результаты показали, что DAS ELISA является полезным методом для индексации вирусов, который облегчает производство свободных от вирусов материалов для размножения.Высокая эффективность элиминации вирусов у сорта яблони ‘Oregon Spur-II’ была достигнута за счет сочетания термотерапии и культивирования in vitro кончиков меристем размером до 0,6 мм, что привело к полной элиминации четырех вирусов (ACLSV, ApMV, ASGV, ASPV). В настоящее время проводятся дальнейшие исследования для достижения эффективного укоренения in vitro и акклиматизации протестированных на вирусы побегов, из которых можно получить здоровые растения.

Удаление вирусов | NCPN

Уничтожение вирусов с помощью наконечника Microshoot

Вирусные, вироидные и вирусоподобные заболевания являются одними из наиболее важных факторов, ограничивающих производство вегетативно размножаемых культур, таких как ягоды, цитрусовые, фруктовые деревья, виноград, хмель, розы и сладкий картофель.Растения могут заразиться этими патогенами при неправильном размножении или в полевых условиях. Как только растение заражено вирусами, вироидами или вирусоподобными заболеваниями, большинство черенков, взятых с растения, также несут их. Для устранения вирусов и вироидов из растения используются несколько видов терапии. К ним относятся: культура верхушек микропобегов, культура меристем, эмбриогенная культура и микропрививка. Эти методы лечения также могут сочетаться с теплом, криогенной или химиотерапией. Терапия кончиками микропобегов — один из самых надежных методов, который десятилетиями использовался для широкого круга декоративных и сельскохозяйственных растений.

 

Что такое наконечник для микросъемки?

Верхушка микропобега состоит из апикальной меристемы, куполообразного участка на растущей верхушке побега, содержащего несколько сотен недифференцированных клеток, и 2–3 пар листовых зачатков. Наконечник микроростка имеет размер от 0,2 до 0,5 мм.

Что такое терапия кончиками микрострел?

Терапия кончиков микропобегов — это процесс культивирования кончиков микропобегов инфицированного растения для создания популяции новых растений с использованием методов культивирования тканей.Новые растения высаживают в теплице и тщательно проверяют на наличие вирусов/вироидов. Если на растении не обнаружено патогенов, оно используется как источник чистого материала для размножения. Как проводится терапия кончиками микрострел? Верхушки побегов энергично растущего растения длиной около 2–3 см собирают во влажный ящик и отправляют в лабораторию. Кончик микропобега иссекают в стерильных условиях с использованием микроскопа в ламинарном боксе с воздушным потоком. Для этого внешние листья осторожно удаляют до тех пор, пока не обнажится купол меристемы.Купол и несколько листовых зачатков вырезают и помещают на питательную среду или, в случае цитрусовых, на стебель растения-питомника, уже растущего в трубке.

Как работает терапия кончиками микрострел?

 Точно неизвестно, как работает терапия кончиками микрострел, но есть несколько правдоподобных теорий. Одна из теорий состоит в том, что вирус еще не заразил клетки в растущей верхушке, потому что растительные клетки делятся быстрее, чем вирус может размножаться и инфицировать.Другими словами, растение растет быстрее, чем вирус. Другая теория состоит в том, что вирус случайно не заразил верхушку микропобега. Часто вирусы распределены по растению неравномерно, и некоторые почки остаются незараженными. Если выбрана неинфицированная почка, полученное растение будет чистым. Возможно, это работает, потому что между самой молодой частью кончика и остальной частью растения нет сосудистой связи, поэтому вирус не может достичь клеток на кончике. Вероятно, это относится к вирусам, ограниченным флоэмой (см. рисунок ниже).Имеются также доказательства того, что механизмы молчания генов могут быть задействованы в исключении вирусов из меристематической области.

Насколько успешна терапия кончиками микрострел?

Общий успех лечения методом микропобегов часто превышает 85%, но зависит от вида культуры, сорта и вируса. Некоторые виды и сорта сельскохозяйственных культур устойчивы к культуре тканей; и после того, как в культуре ткани, некоторые вирусы трудно устранить. Вирусы, которые легко перемещаются из клетки в клетку, могут быть очень сложными для уничтожения.Например, для элиминации вируса кустистой карликовости малины у Rubus spp. необходима комбинация терапий и/или много повторений. Винограду требуется в среднем 7 месяцев, чтобы вырасти от кончика микропобега менее 0,5 мм до ростка размером 6,0 см. Если полученное растение заражено, процесс повторяется. У ягод каждый цикл может занимать от 1 до 3 лет. Повторное тестирование после лечения всегда необходимо, чтобы убедиться, что лечение успешно устранило вирус.

 

Приводит ли терапия кончиками микрострелок к непредвиденным последствиям?

Терапия наконечниками Microshoot для уничтожения вирусов успешно используется с 1960-х годов на многих культурах без развития нетипичных или других непредвиденных эффектов.Это связано с тем, что условия, которые могут привести к негативным последствиям, такие как гормоны в питательной среде и время в культуре, сведены к минимуму. Кроме того, поскольку верхушечная почка иссекается вместе с зачаточной тканью листа, дифференцировка клеток уже началась и развития каллусных клеток не происходит. Терапию кончиками микрострелок часто путают с размножением тканевых культур. Размножение тканевых культур включает использование более крупных кусочков ткани, массовое производство, множество субкультур и часто многолетнее культивирование, что может привести к нежелательным признакам в потомстве растений.Наконец, размножение тканевой культуры не уничтожает вирусы. Короткие видеоролики, показывающие процесс обрезки для нескольких культур, доступны на YouTube-канале Foundation Plant Services, UC Davis.

Методы уничтожения вирусов in vitro – технология клеток растений

Основы вируса

Культура тканей растений — чувствительный и технический процесс. Более того, поддержание асептических условий является основным требованием на всех этапах процедуры.Как правило, мы говорим о различных загрязнителях, таких как бактерии, грибки и микоплазма. А как же вирусы?! Вирус — это субмикроскопический организм, который очень быстро размножается внутри живых организмов. Разные вирусы заражают разные хосты и используют их механизмы для процесса репликации.

В предыдущей статье под названием «Методы обнаружения вирусов в эксплантатах» мы говорили обо всех различных процессах, необходимых для выявления вирусных инфекций в материнских растениях, эксплантаты которых вы собираетесь использовать для последовательных процессов культивирования тканей.Эти процессы включают биологические методы (такие как индексация Вуди), серологические методы (такие как иммуноферментный анализ [ИФА]) и молекулярные методы (такие как полимеразная цепная реакция [ПЦР]).

Что произойдет после того, как вы идентифицируете специфический вирусный организм в ткани вашей матери? Что ты можешь сделать? После идентификации следующим шагом является устранение вирусов.

Как уничтожить вирус

Вы можете устранить их с помощью различных методов, таких как термотерапия, культура меристемной ткани, микротрансплантация in vitro, химиотерапия in vitro и криотерапия кончиков побегов с последующей культурой ткани кончиков побегов или витро микрографтинг.Эти методы не только уничтожают вирусы, но также эффективно уничтожают вироиды и фитоплазмы.

Теперь возникает следующий вопрос: что это за методы и как их можно использовать для удаления вирусов из эксплантатов?

Постой, постой! Эта статья ответит на все ваши вопросы. В нем будут кратко рассмотрены некоторые из методов, упомянутых выше. Давайте начнем!

1. Термотерапия

Ее также называют термотерапией и является старейшим из всех методов, о которых мы говорили.Он используется с конца девятнадцатого века. Термотерапия использует тепло для уничтожения вирусов на наших растениях. Часто целевому материнскому растению дают тепло 35-42 ℃ в течение 4-6 недель. Продолжительность лечения и установленная температура зависят от типа вируса, инфицированного хозяина и того и другого вместе. Этот метод использовался для устранения вирусов из таких растений, как картофель, виноградная лоза, косточковые фрукты, цитрусовые, семечковые плоды и клубника.

Ключевые факторы, влияющие на термотерапию, включают температуру и продолжительность, размер кончиков побегов, источник эксплантов и положение кончиков побегов, тип вируса и инфекционный статус, а также генотип-специфические реакции

2.Низкотемпературная терапия

Было замечено, что обработка зараженных растений более высокими температурами может уничтожить только вирусы, но не вироиды. При этой терапии растения выращивают при температуре 8 ℃ (по сравнению с термотерапией, при которой растения обрабатывают при 37 ℃). Эта обработка эффективна против вироида веретенообразных клубней картофеля (PSTVd), вироида рубцовой кожицы яблони (ASSVd) и латентного вироида хмеля (HSVd). Для инфицированных растений хризантем {с такими заболеваниями, как хризантема низкорослая (ChSVd), хлоротическая крапчатость хризантемы (ChCMVd) и вироиды бледности плодов огурца (CPFVd)} 5 ℃ является подходящей температурой для уничтожения вироидов.

3. Культура меристемы

Апикальная меристема побегов растений, как правило, свободна от патогенов и служит идеальным эксплантом для тканевой культуры выбранного растения. Верхушечная меристема побега состоит из листовых зачатков и верхушечного купола (места удлинения стебля). Культура меристемы требовала удаления подходящего объяснения от инфицированного родительского растения и культивирования в подходящих условиях культивирования. Это один из наиболее широко используемых методов для устранения вирусов из растений.

Этот метод был успешно использован для устранения вирусных заболеваний, таких как желтая карликовость лука (OYDV), латентные вирусы лука-шалота (SLV) и вирус желтого листа сахарного тростника (SYLV), с зараженных растений. Подробнее о меристемной культуре можно прочитать здесь.

4. Микропрививка in vitro

В этом методе кончики меристем прививаются на безвирусный подвой. Техника прививки заключается в соединении двух растений в одно целое. На одном растении делается рана, и в нее вставляется другая часть растения.Этот метод использовался для удаления вирусов с различных растений и деревьев, включая персик, миндаль, цитрусовые, косточковые фрукты, яблоки, груши, кешью и авокадо.

5. Химиотерапия

Химиотерапия, как следует из названия, включает использование определенных химических веществ в средах для культивирования тканей, которые предотвращают репликацию вируса или его перемещение из зараженных частей растений в здоровые. Некоторыми примерами химических веществ являются ациклогуанозин, азидотимидин, ацикловир, рибавирин или 2-тиоурацил.

Этот метод обычно сочетается с другими методами для достижения наиболее эффективных результатов. Например, картофельный вирус S (PVS) был удален из картофеля с помощью химиотерапии кончиков пазушных почек.

6. Криотерапия

Этот метод включает криоконсервацию (сохранение и хранение материала в жидком азоте) верхушек побегов и их последующую регенерацию для размножения. Меристематические ткани свободны от вирусов и содержат меньше воды, чем другие дифференцированные ткани.Таким образом, кристаллы льда, образующиеся при криоконсервации, не повреждают клетки меристемы. Этот метод был успешно использован для уничтожения таких вирусов, как вирус полосатости бананов (BSV), вирус скручивания листьев картофеля (PLRV) и вирус виноградной лозы A (GVA).

Вышеуказанные методики комбинируются с одной или несколькими методиками для более эффективной элиминации вирусов из эксплантатов.

Ссылки

  1. Hu, G., Dong, Y., Zhang, Z. et al. Элиминация вируса из яблока in vitro с помощью термотерапии в сочетании с химиотерапией.Культ органов растительных клеток 121, 435–443 (2015). https://doi.org/10.1007/s11240-015-0714-6
  2. Варвери, К., Малиогка, В.И., и Капари-Исая, Т. (2015). Принципы предоставления материалов для тестирования на вирусы. Борьба с вирусными заболеваниями растений — вегетативно размножаемые культуры, 1–32. doi:10.1016/bs.aivir.2014.10.004
  3. https://www.plantcelltechnology.com/blog/methods-t…
  4. https://plantmethods.biomedcentral.com/articles/10…

Хотите поделиться историей о РСТ?
Будем рады услышать ваши отзывы и предложения!
Отдельные истории о продуктах РСТ также будут размещены на нашем веб-сайте.Не забывайте, что некоторые вкусности могут найти путь к вашему дому вместе с ним.
Поделитесь своими предложениями и историями со мной по адресу [email protected]

Избранные статьи

Размножение культуры тканей банана

Банан — это тропический фрукт, который люди употребляют в пищу в сыром и вареном виде.Считается, что он возник в Юго-Восточной Азии, в таких странах, как Индия, Филиппины, Малайзия и т. д. Эди …

подробнее

Как PPM™ может спасти ваш эксперимент с тканевой культурой

Смесь консервантов для растений (PPM™) представляет собой надежный состав, используемый в качестве биоцида широкого спектра действия в экспериментах с культурами тканей растений.Путем борьбы с бактериями, грибками и другими загрязнениями…

подробнее

PPM против антибиотиков — сравнение

Независимо от того, занимаетесь ли вы выращиванием семян и плодов или гуру по клонированию растений, вы знаете, насколько важно защищать ваши растения от загрязнений.От воздушно-капельных микробных инфекций, воздушно-капельных микробных…

подробнее

Загрязнение тканевой культуры и 7 простых шагов профилактики

Опять заражение! Культивирование тканей — долгий и трудоемкий процесс, и неприятно, когда грибки или бактерии атакуют наши прекрасные культуры.Культивирование клеток в лабораториях требует много…

подробнее

Удаление и тестирование вирусов | СпрингерЛинк

‘) переменная голова = документ.getElementsByTagName(«голова»)[0] var script = document.createElement(«сценарий») script.type = «текст/javascript» script.src = «https://buy.springer.com/assets/js/buybox-bundle-52d08dec1e.js» script.id = «ecommerce-scripts-» ​​+ метка времени head.appendChild (скрипт) var buybox = document.querySelector(«[data-id=id_»+ метка времени +»]»).parentNode ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.вариант-покупки»)).forEach(initCollapsibles) функция initCollapsibles(подписка, индекс) { var toggle = подписка.querySelector(«.цена-варианта-покупки») подписка.classList.remove(«расширенный») var form = подписка.querySelector(«.форма-варианта-покупки») если (форма) { вар formAction = form.getAttribute(«действие») документ.querySelector(«#ecommerce-scripts-» ​​+ timestamp).addEventListener(«load», bindModal(form, formAction, timestamp, index), false) } var priceInfo = подписка.querySelector(«.Информация о цене») var PurchaseOption = toggle.parentElement если (переключить && форма && priceInfo) { toggle.setAttribute(«роль», «кнопка») toggle.setAttribute(«tabindex», «0») переключать.addEventListener(«щелчок», функция (событие) { var expand = toggle.getAttribute(«aria-expanded») === «true» || ложный toggle.setAttribute(«aria-expanded», !expanded) form.hidden = расширенный если (! расширено) { покупкаOption.classList.add(«расширенный») } еще { покупкаOption.classList.удалить («расширить») } priceInfo.hidden = расширенный }, ЛОЖЬ) } } функция bindModal (форма, formAction, метка времени, индекс) { var weHasBrowserSupport = window.fetch && Array.from функция возврата () { var Buybox = EcommScripts ? EcommScripts.Buybox : ноль var Modal = EcommScripts ? EcommScripts.Модальный: ноль if (weHasBrowserSupport && Buybox && Modal) { var modalID = «ecomm-modal_» + метка времени + «_» + индекс var modal = новый модальный (modalID) modal.domEl.addEventListener («закрыть», закрыть) функция закрыть () { form.querySelector(«кнопка[тип=отправить]»).фокус() } вар корзинаURL = «/корзина» var cartModalURL = «/cart?messageOnly=1» форма.установить атрибут ( «действие», formAction.replace(cartURL, cartModalURL) ) var formSubmit = Buybox.interceptFormSubmit( Buybox.fetchFormAction(окно.fetch), Buybox.triggerModalAfterAddToCartSuccess(модальный), функция () { форма.removeEventListener («отправить», formSubmit, false) форма.setAttribute( «действие», formAction.replace(cartModalURL, cartURL) ) форма.отправить() } ) form.addEventListener («отправить», formSubmit, ложь) документ.body.appendChild(modal.domEl) } } } функция initKeyControls() { document.addEventListener («нажатие клавиши», функция (событие) { if (document.activeElement.classList.contains(«цена-варианта-покупки») && (event.code === «Пробел» || event.code === «Enter»)) { если (document.activeElement) { мероприятие.предотвратить по умолчанию () документ.activeElement.click() } } }, ЛОЖЬ) } функция InitialStateOpen() { вар buyboxWidth = buybox.offsetWidth ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.опция покупки»)).forEach(функция (опция, индекс) { var toggle = option.querySelector(«.цена-варианта-покупки») вар форма = вариант.querySelector(«.форма-варианта-покупки») var priceInfo = option.querySelector(«.Информация о цене») если (buyboxWidth > 480) { переключить.щелчок() } еще { если (индекс === 0) { переключить.щелчок() } еще { toggle.setAttribute («ария-расширенная», «ложь») форма.скрытый = «скрытый» priceInfo.hidden = «скрытый» } } }) } начальное состояниеОткрыть() если (window.buyboxInitialized) вернуть window.buyboxInitialized = истина initKeyControls() })()

(PDF) Обзор. Уничтожение вирусов в растениях: Двадцать лет прогресса

Скиада Ф.Г., Малигка В.И., Элефтериу Э.П., Катис Н.И., 2009b.

Успехи в уничтожении стеблевого вируса виноградной лозы rupestris

Ассоциированный с питтингом вирус (GRSPaV) из эксплантатов Vitis vinifera

Протокол XVI заседания Международного совета по изучению

вирусов и вирусоподобных заболеваний виноградной лозы. Дижон

(Франция), 31 августа — 3 сентября. стр: 262–263.

Spiegel S, Frison EA, Converse RH, 1993. Последние разработки в области терапии и процедур обнаружения вирусов для межнациональных перемещений клональной зародышевой плазмы растений.Завод Дис

77: 176-1180.

Spiegel S, Stein A, Tam Y, 1995. Термотерапия in vitro

розоцветных плодовых деревьев. Acta Hort 386: 419-420.

Stein A, Spiegel S, Faingersh G, Levy S, 1991. Реакция

микроразмноженных сортов персика на термотерапию для уничтожения вируса некротической кольцевой пятнистости Prunus. Ann

Appl Biol 119: 265-271.

Stein DS, Creticos CM, Jackson GG, 1987. Пероральный рибавирин

лечение гриппа A и B.Противомикробные агенты Ch

31: 285-1287.

Streeter DG, Witkowski JT, Khare GP, Sidwell RW, Bauer

RJ, Robins RK, Simon LN, 1973. Механизм действия

1-β-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3 -карбоксамид

(рибавирин) новое противовирусное средство широкого спектра действия. Proc

Natl Acad Sci 70: 1174-1178.

Szittya G, Silhavy D, Moinar A, Havelda Z, Lovas A, Lakatos

L, Banfalvi Z, Burgyan J, 2003. Низкая температура подавляет

РНК-опосредованную защиту путем контроля генерации siRNA

.EMBO J 22: 633-640.

Talacko L, Sedlak J, Paprestein F, 2007. Тестирование яблони и

груши экспресс-методами диагностики (ПЦР, ОТ-ПЦР, DAS-

ELISA) в процессе санации: первые результаты.

Vedecke Prace Ovocnarske 20: 91-97.

Tan RR, Wang LP, Hong N, Wang GP, 2010. Повышенная эффективность элиминации вируса после термотерапии

культур верхушек побегов груши. Plant Cell Tiss Org 101: 229-235.

Томассоли Л., Ди Лерния Г., Тиберини А., Чиота Г., Катенаро

Э., Барба М., 2008 г.Термотерапия in vitro и культивирование верхушек побегов

для элиминации латентного вируса Caper в Capparis spinosa.

Phytopathol Mediterr 47: 115-121.

Toussaint A, Kummert J, Maroquin C, Lebrun A, Roggemans

J, 1993. Использование виразола для уничтожения кольцевой пятнистости Odontoglossum

из культур in vitro Cymbidium Sw. Plant Cell

Tiss Org 32: 303-309.

Трускинов Е.В., Рогозина Е.В., 1997. Элиминация вирусов

из коллекции клонов картофеля культурой ткани.Russ J

Plant Phys 44: 374-380.

Учанский М., Скирвин Р.М., Нортон М.А., 2002. Применение термотерапии в лабораторных условиях

для получения безвирусной мозаичной репы

растений хрена. Acta Hort 631: 175-179.

Valero M, Ibanez A, Morte A, 2003. Влияние высоких температур на виноградниках

на вирус, связанный с скручиванием листьев виноградной лозы

элиминация Vitis vinifera L. cv. Ткань Наполеона

культур. Sci Hortic 97: 289-296.

Вэнс В., Вошере Х., 2001 г.Сайленсинг РНК в растениях-защита

и контрзащита. Наука 292: 2277-2280.

Verma N, Ram R, Zaidi AA, 2005. Производство in vitro бегонии без вирусов

Prunus некротическая кольцевая пятнистость через

химио- и термотерапию. Sci Hort 103: 239-247.

Victoria JI, Guzman ML, Garces F, Jaramillo AD, 1999.

Свободное от патогенов выращивание семенного тростника и его влияние на коммерческие масштабы

в Колумбии. Протокол 23-й ISSCT. Новый

Дели (Индия), 22-26 февраля.стр: 390-397.

Voinnet O, 2001. Сайленсинг РНК как иммунная система растений

против вирусов. Тенденции Жене 17: 449-459.

Wang LP, Wang GP, Hong N, Tang RR, Deng XY, Zhang H,

2006. Влияние термотерапии на элиминацию вируса бороздчатости стеблей яблони

и вируса хлоротической пятнистости листьев яблони для

груши, культивируемой in vitro советы по стрельбе. Hortscience 41: 729-732.

Wang LP, Hong N, Wang GP, Xu WX, Michelutti R, Wang

AM, 2010 г.Распространение вируса хлоротической пятнистости листьев яблони

в зараженных in vitro побегах. Урожай

Prot 29: 1447-1451.

Ван К., Ху Ю., Лю Ю., Ми Н., Фань З., Лю Ю., Ван Ц., Дизайн,

2010a. Синтез и противовирусная оценка производных фенан-

тилофора на основе трена в качестве потенциальных противовирусных

агентов. J Agric Food Chem 58(23): 12337-12342.

Ван К., Су Б., Ван З., Ву М., Ли З., Ху И., Фан З., Ми Н.,

Ван Ц., 2010b.Синтез и противовирусная активность алкалоидов фен-

нантроиндолизидина и их производных. J Agric

Food Chem 58 (5): 2703-2709.

Wang Q, Cuellar WJ, Rajamaki ML, Hirata Y, Valkonen JPT,

2008. Комбинированная термотерапия и криотерапия для эффективной элиминации вируса: связь распространения вируса, суб-

клеточных изменений, выживаемости клеток и вируса. Деградация РНК

в кончиках побегов. Мол Плант Патол 9: 237-250.

Ван Кью, Валконен JPT, 2009 г.Улучшенное восстановление кончиков побегов, подвергнутых криотерапии

, после термотерапии выращенных в лабораторных условиях

побегов малины (Rubus idaeus L.).

Криописьма 30: 171-182.

Wang Q, Panis B, Engelmann F, Lambardi M, Valkonen JPT,

2009. Криотерапия кончиков побегов: метод устранения патогенов

для получения здорового посадочного материала и

подготовки здоровых генетических ресурсов растений для криоконсервации-

.Энн Аппл Биол 154: 351-363.

Wangai AW, Bock KR, 1996. Уничтожение вируса мозаики Ornithogalum

из чинчеринчи (Ornithogalum thyrsoi-

des) с помощью культуры верхушки меристемы и полевые испытания повторного заражения.

Завод Патол 45:767-768.

Wasswa P, Alicai T, Mukasa SB, 2010. Оптимизация методов in vitro для элиминации вируса коричневой полосы

маниоки из инфицированных клонов маниоки. Afr Crop Sci J 18:

235-241.

Weiland CM, Cantos M, Troncoso A, Perez-Camacho F,

2004. Регенерация свободных от вирусов растений с помощью химиотерапии in vitro

терапии GFLV (вируса веерообразных листьев винограда) инфицированных бывших

растений Vitis vinifera Л. сорта «Залема». Acta Hortic 652:

463-466.

Xi Z, Zhang R, Yu Z, Ouyang D, 2006. Взаимодействие

между тилофорином B и РНК следующего термина ВТМ. Bioorg

Med Chem Lett 16(16): 4300-4304.

Xia Y, Fan Z, Yao J, Liao Q, Li W, Qua F, Peng L, 2006.

Открытие битриазолильных соединений в качестве новых противовирусных средств для борьбы с вирусом табачной мозаики. Bioorg

Med Chem Lett 16: 2693-2698.

Xu PS, Niimi Y, 1999. Оценка производства безвирусных луковиц путем противовирусной и/или тепловой обработки в лабораторных условиях

Обзор. Уничтожение вирусов в растениях: двадцатилетний прогресс 187

Уничтожение вирусов в растениях | Энциклопедия MDPI

Инжир,
Ficus carica L.,
«Бурса Сияхи»,
«Алкуден», FMV
Меристемы (0,5–0,8 мм) находились в D в течение 1 недели, перенос еженедельно на МС с различными комбинациями PGR (мг/л): A: 0,1 GA 3 + 0,2 BA + 0,1 IBA; B: 0,1 GA 3 + 0,5 BA + 0,1 IBA, C: 0,2 GA 3 + 0,2 BA + 0,1 IBA, D: 0,2 GA 3 + 0,2 BA + 0,1 IBA, на 8 недель, перевод в МС с различные PGR для развития побегов: A: 0,1 GA 3 + 1,0 BA + 0,1 IBA; B: 0,1 GA 3 + 2,0 BA + 0,1 IBA, C: 0.2 GA 3 + 1,0 BA + 0,1 IBA, D: 0,2 GA 3 + 2,0 BA + 0,1 IBA. Рутинг на MS: 1: 0,1 GA 3 + 0,0 IBA; 2: 0,1 GA 3 + 1,0 IBA, 3: 0,1 GA 3 + 2,0 IBA, 4: 0,0 GA 3 + 0,0 IBA. Показатели выживаемости на A/B/C/D: «Бурса Сияхи»: 73,3%/73,3%/80%/86,7%, «Алкуден»: 73,3%/40%/46,7%/46,7%. Развитие побегов на A/B/C/D: ‘Bursa Siyahi’: 44,4%/63,9%/58,9%/70%, ‘Alkuden’: 63,9%/70%/44,4%/50%. Укореняемость/число корней на A/B/C/D: ‘Bursa Siyahi’: 66.6%/6,3; 44,4%/5,3; 44,4%/4,3; 22,2%/1,6. «Алкуден»: 44%/30; 83,3%/40; 33,4%/0,7; 16,7%/1,3.
[60]
Малина,
Rubus idaeus L.,
‘Z13’, RBDV
Меристемы 0,1 мм (1ЛП), 0,2 мм (2ЛП), 0,3 мм (2ЛП), культивированные в течение 3 сут на твердом МС с мио-инозитом 100 мг/л, сахарозой 30 г/л, БК 0,5 мг/л, 0,05 мг /л IBA, 3,5 г/л бакто-агара, 1,2 г/л Gelrite и 2,5 г/л AC в течение 3 дней, затем перенос на ту же среду без AC. Культура при 22 ± 2 °C, 16 ч л., 45 мкЭ с −1 м −2 Скорость выживания/регенерации: 0,1 мм: 25%/40%; 0,2 мм: 40%/65%; 0,3 мм: 95%/100%.
[26]
Виноградная лоза,
Vitis vinifera L., ‘Flame Seedless’, GLRaV-1, GFLV
Меристемы (0,5 мм, 1,0 мм с 2 ЛП), на ВП без РГР или с 0,5, 1,0 или 1,5 мг/л БК, 0,04 мг/л ИМК. Культивирование в течение 2 недель при 25 ± 2 ° C, 16 ч L. Затем пересев: 4 недели. Количество побегов на эксплантат: 0.эксплантат 5/1,0 мм на разных БА (мг/л): БА 0: 0,8/1,0; БА 0,5: 3,7/6,8; БА 1,0: 5,8/12,2; BA 1,5: 5,3/13,1 в растениях, инфицированных GFLV. БА 0: 0,9/1,0; БА 0,5: 3,9/6,2; БА 1,0: 5,8/10,1; BA 1,5: 7,3/12,8 в растениях, инфицированных GLRaV-1. Длина побегов (см): эксплантат 0,5/1,0 мм на разных БА (мг/л): БА 0: 6,4/8,5; БА 0,5: 8,9/11,6; БА 1,0: 9,3/10,4; BA 1,5: 9,8/10,9 в растениях, инфицированных GFLV. БА 0: 5,3/8,9; БА 0,5: 7,7/11,5; БА 1,0: 8,2/9,6; BA 1,5: 7,1/8,5 в растениях, инфицированных GLRaV-1.
[58]
Сахарный тростник,
Saccharum spp.Л., «NCo376», SCMV, ScYLV
меристем АП размером от 0,5 до 10 мм на жидкой МС с 20 г/л сахарозы, 10 г/л агара, 3,5 г/л АЦ, 1 мг/л метиленового синего. Обработка РГР: А: 2 мг/л БК, 1 мг/л КИН, 0,5 мг/л НУК; Б: 0,5 мг/л БК; C: 2 мг/л БК; Д: 0,1 мг/л БК, 0,015 мг/л КИН. Культивирование в D в течение 1 недели, затем 16 часов L., 28 ° C, через 1 неделю пересев на среду без AC. Пролиферация побегов на жидкой среде МС с 0,1 мг/л БК. Субкультуры: две недели. Побеги (4 см) укореняют в ½ МС с 5 г/л сахарозы, 8 г/л агара, 0.25 г/л гидролизата казеина в течение 2–3 недель. Скорость регенерации меристем различного размера, эксплантатов из полевого/узлового побега. ≤1 мм: 46,4%/53,9%; >1 ≤2 мм: 79,2%/100%; >2 ≤10 мм: 69,2%/100%. Скорость регенерации/количество побегов на разных PGR: A: 50%/5,9; Б: 55%/4,1; С: 100%/3,8; Д: 100%/11,1.
[53]
Тыква тыква, Cucurbita pepo L., ‘Bulum’, ‘Rumbo’, ZYMV, CMV, AMV, BYMV Меристема 0,3 мм, возраст 25–30 ds, побеги на мостик из фильтровальной бумаги на жидком МС с различным содержанием РГР: КИН или БА (0.5/1,0/1,5/2,5 мг/л), или 0,5 мг/л NAA с КИН (1,0/1,5/2,5 мг/л), или 0,5 мг/л GA 3 с КИН (1,5/2,0/2,5 мг/л) л), или GA 3 (0,5–2,0 мг/л). Культивирование при 25 ± 2 °С, 16 ч, 2000–3000 лк, в течение 28 сут. Затем на МС с агаром 8,0 г/л и комбинациями БА, КИН, ИМК, ИУК. Скорость регенерации: «Bulum»/«Rumbo»: Контроль: 14,4%/11,3%, наилучшие результаты: 2,0 мг/л KIN + 0,5 мг/л GA 3 : 75,6%/69,3%. Длина побегов (см): ‘Булум’/’Рамбо’: Контроль: 3,1/2,97, лучший результат: 2.0 мг/л КИН: 4,7/4,24. Количество корней: «Булум»/«Румбо»: Контроль: 2,9/2,8, лучшие результаты: 1,0 мг/л БК: 3,4/3,3. Количество побегов (42 ds): ‘Bulum’/’Rumbo’: контроль: 2,6/2,5, лучшие результаты: БК 2,0 мг/л: 4,8/4,1.
[48]
Бамия,
Abelmoschus esculentus L. (Moench.), ‘Parbhani Kranti’, ‘SL-444’, OMV, YVMV
Меристемы 0,3–0,5 мм на фильтровальном бумажном мостике на жидком МС с комбинациями БК: (0,1; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 мг/л) и ГА 3 (0.1; 0,5 мг/л) или NAA (0,1; 0,5 мг/л). Культура в течение 3–4 недель. Затем пересевают на МС с различными PGR (+8 г/л агара). Микроразмножение узловыми сегментами. Укоренение на МС с НУК или ИМК (в 0,5, 1,0, 2,0 или 3,0 мг/л). Условия культивирования: 24 ± 1 °C, 16 ч л, 28–34 мкмоль м -2 с -1 . Результаты выживаемости на PGR (мг/л): «Parbhani Kranti»/«SL-444»: BA 0,1: 32,7/28,8%; БА 0,5: 7,9/45,8%; БА 1.0: 72,3/67,4%; БА 1,5: 58,2/52,5%; БА 2.0: 40,74/35,9%. БА 0,5 + ГА 3 0.1: 49,4/42,6%; БА 1,0 + ГА 3 0,1: 53,5/47,3%; БА 1,0 + ГА 3 0,5: 60,3/58,8%; БА 1,5 + ГА 3 0,5: 55,6/50,5%; БА 0,5 + НУК 0,1: 40,2/38,1%; БА 1,0 + НУК 0,5: 56,5/51,6%; БА 1,5 + НУК 0,5: 50,7/45,9%. Наилучшие коэффициенты размножения: при 1,0 мг/л БК + 0,5 мг/л GA 3 : ‘Parbhani Kranti’ 8,9 побегов/эксплантат, ‘SL-444’: 6,8 побегов/эксплантат.
[46]
Батат,
Ipomoea batatas (L.) Lam), ‘Awassa local’, ‘Awassa-833’, ‘Guntute’, SPFMV, SPCSV
Меристемы на МС с 30 г/л сахарозы, 7 г/л агара и 13 комбинаций PGR (GA 3 , NAA и BA).Культура при 24 ± 2 °C, 12 ч л, 40 мкмоль м -2 с -1 . Субкультура: 4 недели. Наилучшие показатели регенерации составили: (1): 66,7% на среде с 1 мг/л БК, 0,01 мг/л NAA и 1 мг/л GA 3 в ‘Awassa-833’ и ‘Guntute’. (2): 63,33% на среде с 1 мг/л BA, 0,01 мг/л NAA и 2 мг/л GA 3 в «Awassa local». Наибольшее количество побегов на эксплант: ‘Awassa-833’: 5,26, ‘Awassa local’: 5,12, обе на среде с 2 мг/л БК. «Guntute»: 2,5 на среде с 3 мг/л БК.
[57]
Гвоздика,
Dianthus caryophyllus L., CLV, CarVMV
Меристемы размером 0,1; 0,2; 0,3; и 0,4 мм с 1–2 LP, культивирование на МС с 0,1 мг/л NAA, 2,0 мг/л KIN, выращивание при 25℃, 16 ч л. Пролиферация побегов на МС с 30 г/л сахарозы, 8 г/л агар, 0,2 мг/л БК. Размножение на МС с 1,0 мг/л БК, 0,5 мг/л КИН, пересев: на 3 нед. Укоренение: МС с 1,5 мг/л NAA. Выживаемость меристем размером 0.1/0,2/0,3/0,4 мм с 1-2 LP: 20%/35%/65%/80%.
[51]
Картофель,
Solanum tuberosum L., ‘Burren’, ‘Binella’, PVY
AP-меристемы (100, 200, 300 мкм), культивированные на МС, с 2 мг/л глицина, 5 мг/л никотиновой кислоты, 5 мг/л пиридоксина, 5 мг/л тиамина, 5 мг/л аскорбиновой кислоты, 200 мг /л мио-инозитола, 2,0 мг/л GA 3 , 0,2 мг/л КИН, 3% сахарозы, 0,6% агара. Культура: 25 ± 2 °C, 16 ч, 2,5 мкмоль м -2 с -1 . Выживаемость меристем размером 100/200/300 мкм: «Буррен»: 88%/100%/100; «Бинелла»: 86%/94%/100%.Длина побегов (см) через 60 д.: «Буррен»: 5,4/7,7/9,9; «Бинелла»: 4,9/6,6/9,6.
[54]
Сладкий картофель,
Ipomoea batatas (L.) Lam., ‘Bellela’, ‘Temesgen’, ‘LO-3233’, ‘Zapallo’, SPCSV, SPFMV, SPMMV, SPCFV, SPCaLV, SPMSV, SwPLV, SPVG, ЦМВ
Меристемы 0,5–0,7 мм на МС с 30 г/л сахарозы, БК (0,1; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 мг/л) в сочетании с 0 или 0,01 мг/л NAA и 0 или 1,0 мг/л GA 3 . Культура при 25 ± 2 °C, 16 ч л., 51 мкмоль м –2 с –1 .Пересев на ту же среду 4 недели. Размножение: MS с комбинациями PGR: KIN, BA, IAA. Укоренение: ½ MS с 0, 1, 2, 3, 4 или 5 мг/л IBA. Скорость регенерации ‘Bellela’/’Temesgen’/’LO-3233’/’Zapallo’ на среде без PGR: 5,4/17,1/13,0/21,6%, на среде с 0,01 мг/л NAA + 1,0 мг/л GA 3 + 0,1 мг/л БК: 6,7/30/20/30%; или +0,5 мг/л БК: 63,3/53,3/40/16,7%, или +1,0 мг/л БК: 63,3/70/60/70%; или +2,0 мг/л БК: 73,3/93,3/90/80%; или +5,0 мг/л БК: 100/100/76,6/70%. Лучше всего снимать пролиферацию на MS+0.5 мг/л БК + 0,5 мг/л КИН. Лучшее укоренение было на среде без PGR.
[44]
Батат,
Ipomoea batatas (L.) Lam., ‘БАРИ-11’, ‘БАРИ-22’, ‘БАРИ-33’, ‘БАРИ-44’, ‘БАРИ-55’, ‘БАРИ-66’ , ‘БАРИ-77’, СПММВ, СПММВ
Меристемы AP (0,3–0,5 мм, 1–2 LP) на мостике из фильтровальной бумаги, на жидком МС с комбинациями КИН и ГА 3 . Культивирование при 25 °C, 16 ч л., 50–60 мкмоль м -2 с -1 в течение 4 недель. Пересев на полутвердую среду в течение 4–6 недель. Regeneration rates in a range of 7 genotypes: KIN 1.0 mg/L: 37.5–50%; KIN 2.0 mg/L: 45.8–66.7%, KIN 2.5 mg/L: 54.7–70.8%; KIN 3.0 mg/L: 41.7–58.3%; GA 3 1.0 mg/L: 33.3–45.8%; GA 3 1.5 mg/L: 41.7–54.2%; GA 3 2.0 mg/L: 45.8–62.5%; GA 3 3.0 mg/L: 37.5–50%; KIN 2.0 + GA 3 0.1 mg/L: 54.2–66.7%; KIN 2.0 + GA 3 0.5 mg/L: 62.5–79.2%; KIN 2.5 + GA 3 0.1 mg/L: 50–62.5%; KIN 2.5 + GA 3 0.5 мг/л: 54,2–75%.
[47]
Инжир,
Ficus carica L., ‘Zidi’, ‘Soltani’, ‘Bither Abiadh’, ‘Assafri’, FMD
ST (0,5, 1,0 и 1,5 мм) на МС с 30 г/л сахарозы, 7 г/л агара, 90 мг/л PG. PGRs: (M1): 0,2 мг/л BA, 0,1 мг/л NAA, 0,1 мг/л KIN; (М2): 0,2 мг/л БК, 0,1 мг/л НУК, 0,1 мг/л ИПС; (M3): 0,2 мг/л БК, 0,1 мг/л NAA, 0,1 мг/л GA 3 , (M4): 0,2 мг/л БК 0,1 мг/л 2,4-D. Культура при 25 ± 1 °C, 16 ч л, 40 мкмоль м -2 с -1 Скорость регенерации меристем разного размера: 0.5/1,0/1,5 мм: «Зиди»: 61,1%/79%/70,5%; «Битер Абиад»: 67,8%/73,3%/56,7%; «Солтани»: 90%/55,7%/95,2%; «Ассафри»: 96%/92,6%/87,96%.
[55]
Кардамон крупный, Amomum subulatum Roxb., ‘Golsahi’, ‘Ramsahi’, CBDV, LCCV Меристемы 0,2–0,7 мм на МС с 30 г/л сахарозы и различными РГР: БА, 0,5–1,0 мг/л, ГА 3 , 0,1 мг/л, ИБА или НУК 0,01–0,1 мг/л, или ИУК, 0,12–0,15 мг/л, ПВП, 0,5 г/л или АК 100 мг/л, 7 г/л агара, в течение 6 недель. Затем перенесите на тот же MS.Субкультура: МС с ГРР: БА (0,5–1,0 мг/л), ИМК (0,01–0,1 мг/л) и GA 3 (0,1–0,5). Выживаемость меристем: 0,2–0,3 мм: 20,7%; 0,3–0,4 мм: 25,7%; 0,4–0,5 мм: 32,1%; 0,5–0,6 мм: 32,9%; 0,6–0,7 мм: 36,4%. Выживаемость на средах с разным содержанием РГР: (1): 1,0 мг/л БК + 0,05 мг/л ИМК + 0,1 мг/л ГК 3 : 56,6%; (2): 0,5 мг/л БК + 0,08 мг/л ИМК + 0,1 мг/л GA 3 : 37,5%; (3): 0,5 мг/л БК + 0,58 мг/л НУК + 0,1 мг/л ГА 3 : 9.5%.
[50]
Картофель,
Solanum tuberosum L., 8 сортов PVY, PVM, PVS, PVX
Меристемы на жидком MS с 20 г/л сахарозы, 1 г/л казеина, 0,1 мг/л IBA, 1 мг/л GA 3 и 40 мг/л гемисульфата аденина.

Leave a comment