Чем sp1 отличается от sp2: В чем разница между Windows 7 SP1, SP2, SP3? — Спрашивалка

Содержание

Интеграция Windows XP Service Pack 3 (SP3) в имеющийся у Вас дистрибутив Windows. Пошаговое руководство.

Спустя три с половиной года после предыдущего выхода руководства по интеграции Windows XP Service Pack 2 (SP 2), я вновь возвращаюсь к этой теме, предположительно, в последний раз для XP. На этот раз мы рассмотрим интеграцию Windows Service Pack 3 (SP3) в уже имеющийся дистрибутив Windows. Впервые подобное руководство было написано еще семь лет назад, для Windows 2000, первой версии Windows, которая поддерживала такую функциональную возможность. Не удивительно, что с тех пор процесс интеграции не сильно уж и изменился, а результат — обновленная версия дистрибутива ОС Microsoft Windows XP на компакт-диске с уже интегрированными последними обновлениями и дополнениями. (Microsoft обещает представить нам более изящный метод подобной интеграции в Windows Vista, но пока запланировано это лишь с выходом Vista SP2, таким образом, в обозримом будущем нам придется использовать старый, но проверенный метод, описанный ниже. )

Напомню, что такой процесс интеграции первоначально был разработан, чтобы помочь корпоративным клиентам Microsoft включать любые обновления ОС в образ и распространять этот образ внутри корпоративной сети, что поможет сократить потери времени на то, чтобы после установки исходной версии ОС на многочисленные ПК дождаться установки множества . Если есть возможность предварительной интеграции, то Вы можете держать установочный образ ОС всегда обновленным, что обеспечит минимум потерь времени на постустановочные действия. Microsoft также использует этот механизм, что стоит отметить, чтобы постоянно обновлять свои дистрибутивы вновь вышедшими обновлениями.

Конечно же, все то, что здесь задокументировано, будет представлять интерес прежде всего для обычных пользователей и, возможно, малого бизнеса, которые не имеют доступа к программе volume-лицензирования Microsoft, посредством которой можно своевременно получать самый «свежий» выпуск дистрибутива. Любой, кто устанавливал Windows XP Service Pack 2 (SP2) в прошлом году, может сказать Вам, что нет ничего хуже монотонности установки самой ОС и затем необходимости установить более ста ее обновлений с многочисленными перезагрузками.

Ведь такой метод — это не правильно.

Но выполнив интеграцию имеющегося у Вас дистрибутива Windows XP Service Pack 2 (SP2) с новым SP3, Вы, по крайней мере, избавитесь от необходимости обновлять систему в следующий раз, когда Вы собиретесь ее переустанавливать. И вместо установки ста с лишним обновлений, Вам понадобится установить лишь малое их количество. (Конечно же, число обновлений с течением времени продолжит увеличиваться.)

ПРОЧТИТЕ, ЭТО ВАЖНО: В то время, как я буду излагать читателям материал по интеграции, Вы должны понимать, что Вы берете на себя всю ответственность и риск! Убедитесь, что Вы полностью сделали копию всей информации на вашей системе перед осуществлением операций по стиранию/установке ОС или ее обновления/интеграции. Помните, что впоследствии Вы должны будете выполнить активацию Вашей копии ОС Microsoft Windows, что может потребовать от Вас совершения междугородних звонков и выхода в интернет. Будьте готовы вернуться к Вашей предыдущей системе, установленной с имеющегося дистрибутива Windows XP SP2 на компакт-диске или ином носителе информации, если что-либо не удастся.

Если Вы считаете себя оптимистом, то худшее, что может произойти — это необходимость повторной установки XP SP2 с последующей установкой SP3. Это не так уж и ужасно.

Необходимые требования для проведения работы:

На этот раз я привожу Вам набор инструкций по интеграции, используя только свободно доступные утилиты и программы (то есть абсолютно бесплатные), которые Вы можете абсолютно точно найти в сети. Вот — то, что Вам понадобится в ходе дальнейшей работы:
Установочный диск Windows XP Home или Professional с SP2. Возможно, что оригинальный установочный компакт-диск с XP SP1 тоже будет нормально работать, но я проводил свои работы на XP SP2, имея под рукой обычный retail-диск и диск, полученный по программе volume-лицензирования. (Вы вполне можете попробовать поработать и с OEM-диском от изготовителя Вашего ПК, но 100% гарантии дать не могу, все зависит от того, как была изменена разметка диска и образа.) Нормальный диск или Upgrade CD от Microsoft работают вполне прекрасно.

Мною проводилась процедура интеграции на дистрибутивах с обычных одинарных дисков, пользователей Windows Media Center и TabletPC ничем порадовать, но и огорчить не могу.
Автономный установщик Windows XP Service Pack 3. Этот файл размером в 316Mб теперь доступен с Вебсайта Microsoft.
ISO Buster. Этот полезный инструмент восстановления данных может быть загружен абсолютно бесплатно.
Nero 8 Trial. Это ознакомительная версия, доступная бесплатно, включающая только лишь сам Nero Burning ROM. (Если Вы захотите заплатить за программу, то сможете использовать все прилагающиеся дополнения к ээтому продукту.) Замечу, что возможно использование утилиты ImgBurn вместо Nero 8.
Другие файлы. Вам могут понадобиться дополнительные файлы после проведения интеграции, они могут прилагаться на компакт-диске или USB с комплектацией Вашего компьютера. Этими файлами могут быть драйвера для Вашего оборудования (особенно обратите внимание на наличие драйверов для сетевых устройств), а также уже скаченные обновления для Вашего ПО, но это еще упомянется в Пункте 6 ниже.

Убедитесь, что Вы загрузили автономный установщик XP SP3, ISOBuster и Nero 8 Trial перед продолжением! Устанавливая Nero, Вам будет предложено установить множество дополнительных модулей, длинный список которых будет представлен в открывшемся диалоговом окне. Помните, только Nero Burning ROM, третий в списке, нам требуется (см.рисунок).


Начиная с этого момента, я предполагаю, что Вы загрузили и установили все, что требуется, сделали копию важных данных и готовы продолжить.

Важное примечание для пользователей Windows Vista: Вы можете выполнить дальнейшие указания, работая как в Windows XP, так и в Windows Vista, на ваш выбор. Я пробовал и так, и так, но скриншоты, представленные в данной публикации, сделаны на Windows XP. У меня есть лишь одна оговорка для пользователей Vista: по некоторым причинам, попытки интеграции SP3 в Windows XP Professional, полученный по программе volume-лицензирования, окончились неудачей, которая проявила себя при попытке дальнейшей активации продукта — Windows перестала признавать действительный ключ продукта. Чтобы избежать подобной проблемы, убедитесь, что вы обладаете Администраторскими привелегиями при выполнении действий, описанных в Пункте 3.

Чтож, давайте начнем!

Пункт 1: Скопируйте содержимое установочного компакт-диска Windows XP на жесткий диск

Откройте Мой компьютер (в Vista — Компьютер) и выберите наверху меню «Сервис», а затем «Свойства папки». В диалоговом окне Свойства папки найдите и отметьте пункт «Отображать скрытые файлы и папки». Далее, снимите метку с пункта «Скрывать защищенные системные файлы (Рекомендовано)». Подтвердите Ваши действия в открывшемся предупреждении, нажмите «OK», чтобы закрыть диалоговое окно.
Вставьте установочный диск с Windows XP в привод вашего ПК и закройте все появившиеся окна автозапуска. В Моем компьютере (или просто Компьютере), кликните правой кнопкой по значку привода и из контекстного меню выберите пункт «Откурыть». Оставьте окно открытым, чтобы видеть содержимое компакт-диска.

Вновь откройте Мой компьютер. На сей раз, перейдите в корневой каталог вашего жесткого диска (C:\), Вы можете выбрать по своему усмотрению и любое другое местоположение, куда бы хотели временно поместить файлы с компакт диска, которые Вы в конечном счете объедините с SP3. Создайте папку, например xp (C:\xp). Затем создайте вторую папку, например sp3 (C:\sp3).
Теперь, переместите ВСЁ содержимое установочного компакт-диска Windows XP в папку C:\xp.

Пункт 2: Распакуйте содержимое установочного файла XP SP3 на Ваш жесткий диск

Теперь Вам потребуется извлечь файлы из установщика SP3. Пока копируются файлы с компакт-диска на жесткий диск, копируем автономный установщик Windows XP SP3 (стандартное название windowsxp-kb936929-sp3-x86-enu.exe для англ. языка) в директорию C:\sp3. Нам потребуется командная строка (для Windows XP нажимаем Пуск-Выполнить, в появившемся диалоговом окне набираем «cmd», ав Windows Vista достаточно открыть меню Пуск и набрать cmd в строке Поиска).

После этого, используя нижеприведенные команды, переходим в директорию C:\sp3 и извлекаем установочные файлы туда (Отметьте, что надпись [ENTER], означает нажатие клавиши ENTER):

cd \ [ENTER]
cd sp3 [ENTER]
windowsxp-kb936929-sp3-x86-enu. exe -x:c:\sp3 [ENTER]

Появится диалоговое окно процесса извлечения файлов из архива, которое покажет ход извлечения.


Когда процесс распаковки завершится, вы увидите соответствующее окно. Нажмите ОК для продолжения.

Внутри директории C:\sp3 Вы увидите новую папку i386, которая содержит только что извлеченные файлы.


Оцените статью: Голосов

Достаточно ли установить SP3 из SQL Server 2005 в одиночку?



Я установил SQL Server 2005, и я хочу установить пакеты обновления, у меня есть пакеты обновления 1, 2, 3, но я хочу знать, отличается ли установка только пакета обновления 3? или я должен установить сначала SP1, SP2 и, наконец, SP3?

sql-server-2005 servicepacks
Поделиться Источник Unknown     12 февраля 2010 в 15:46

2 ответа


  • Установочный заказ для SQL Server 2005 разработчика и VS 2008 на Windows 7

    Я всегда, кажется, борюсь с этим, так что на моей новой сборке Windows 7 dev PC я подумал, что попробую сделать это правильно! Устанавливаете ли вы сначала VS 2008, а затем SQL Server 2005 developer или наоборот? И в любом случае, есть ли какие-то специальные параметры/настройки, которые должны.

    ..

  • SQL Server 2005 SP2 или SP3 не обновляют Management Studio?

    Я применил SQL Server 2005 SP2 и отметил Все компоненты, подлежащие обновлению, включая клиентские инструменты, но версия в поле Help -> About по-прежнему имеет версию 1399, в то время как сервер действительно имел 3042. Затем я повторно применил SP2 только к клиентским инструментам, и все прошло…



2

Пакеты обновления являются накопительными, читайте здесь . Хотя я думаю, что это относится к SF.

Пакет обновления Microsoft SQL Server 2005 3 (SP3) содержит исправления, которые были включены в пакеты накопительных обновлений для SQL Server 2005 Пакет обновления 2 из пакета накопительных обновлений 1 в пакет накопительных обновлений 9, а также исправления на проблемы, о которых сообщалось через наши платформы обратной связи с клиентами. Он также включает в себя улучшения поддержки и проблемы , о которых сообщалось через Windows Сообщение Об Ошибке.

Поделиться Kyle Rosendo     12 февраля 2010 в 15:48



0

Установите пакет обновления 3. Если он хочет, чтобы вы установили rest, он сообщит вам об этом.

Я думаю, что команда Sql Server понимает, что такая ситуация может произойти, и приняла меры для ее устранения.

Или, еще лучше, перейдите в Windows Update. Ура.

Поделиться Unknown     12 февраля 2010 в 15:50


Похожие вопросы:


Влияние обновления SQL Server 2005 SP3 Native Client на подключенные клиенты?

Я нахожусь в процессе обновления некоторых из моих экземпляров SQL Server 2005 SP3 (build 9.00.4060.0) до SQL Server 2005 SP4 RTM (build 9.00.5000.0), прежде чем перейти к обновлению экземпляров на…


Сделал sql server 2005 с пакетом обновления 3 остановки службы SQL

Мне нужно установить SQL server 2005 sp3. Мне нужно знать заранее, нужна ли перезагрузка установки и остановит ли установка мою службу SQL. У меня на сервере более 300 баз данных. спасибо.


Достаточно ли хорош SQL Server 2005 Express для разработки

В компании, которую я разрабатываю, разработчики обычно запускают базы данных на своих ноутбуках. У нас также есть экземпляр серверов SQL Server 2005 и SQL Server 2000, работающих как виртуальные…


Установочный заказ для SQL Server 2005 разработчика и VS 2008 на Windows 7

Я всегда, кажется, борюсь с этим, так что на моей новой сборке Windows 7 dev PC я подумал, что попробую сделать это правильно! Устанавливаете ли вы сначала VS 2008, а затем SQL Server 2005 developer…


SQL Server 2005 SP2 или SP3 не обновляют Management Studio?

Я применил SQL Server 2005 SP2 и отметил Все компоненты, подлежащие обновлению, включая клиентские инструменты, но версия в поле Help -> About по-прежнему имеет версию 1399, в то время как сервер. ..


Обновление SQL Server 2005 Express до SP3

Я пытаюсь установить SQL Server 2005 Express SP3 на две мои машины. Когда я пытаюсь это сделать, я получаю следующее сообщение об ошибке: ни одна из выбранных функций не может быть установлена или…


Могу ли я разрабатывать на SQL Server 2005 и развертывать на SQL Server 2000?

Моя разработка под VS2008 Team Suite SP1 с SQL Sever 2005 Express SP3. У одного из моих клиентов есть только лицензия SQL Server 2000. Я еще не начинаю свой проект. Поэтому я хочу найти способ,…


Могу ли я создать связанный сервер в sql server 2005, целью которого является sql server 2000 (sp3)?

Можно ли создать связанный сервер в SQL Server 2005, который ссылается на SQL Server 2000 SP3?


Как установить SQL Server 2005 Express в Windows 8

Я попытался установить SQL Server 2005 Express SP3 x64 на Windows 8, но установщик выдает мне ошибку: Установочный пакет для продукта Microsoft SQL server native Клиент не может быть найден.


Я попытался установить SQL Server 2005 Express SP3 x64 на Windows 8, но установщик выдает мне ошибку

Во время установки я получил эту ошибку: Не удалось запустить службу SQL Server. Для получения дополнительной информации см. разделы SQL Server Books Online, How to: View SQL Server 2005 Setup Log…

Все, что вам нужно знать об установке Service Pack 1 для Windows 7 – Вадим Стеркин

Вы установили Service Pack 1 на Windows 7? Он уже доступен всем! Есть вопросы? Где скачать, как подготовиться, как интегрировать в дистрибутив… Ответы на них вы найдете в этой статье, которая будет дополняться по мере появления новых вопросов и ответов.

По традиции, в SP1 входят все последние версии обновлений со времени выхода Windows 7 и Windows 2008 R2 RTM. Что же касается функциональных улучшений, то извлечь из них пользу смогут только организации. Наиболее значимыми являются RemoteFX и динамическая память в Hyper-V R2.

На этой странице:

Где скачать SP1 и какой язык пакета нужен для установки

Страница SP1 находится в центре загрузки Microsoft.

Пакеты содержат 36 языков, включая английский, русский и украинский.

Определить истинный язык своей системы можно одной командой. Откройте Пуск – Поиск – PowerShell и введите

(Get-WmiObject Win32_OperatingSystem).oslanguage

Если результат 1033, у вас английская система.


Увеличить рисунок

Любой другое значение – это явный признак локализованной системы. Например, 1049русский язык, а остальные значения вы можете сверить со списком.

Список установленных языковых пакетов можно увидеть командой:

(Get-WmiObject Win32_OperatingSystem).MUILanguages

Нужно ли устанавливать полный пакет или достаточно установки через Windows Update

Это не имеет принципиального значения. Намного важнее то, что его необходимо установить. Я пользуюсь Windows Update, и у меня установлены все обновления, которые я считаю существенными, включая все исправления безопасности.


Увеличить рисунок

Использование Windows Update позволяет значительно сэкономить трафик и снижает требования к свободному месту на диске.

Если Windows Update не предлагает обновление SP1, проверьте свою систему по пунктам, описанным в статье базы знаний Microsoft KB2498452.

В случае, когда ваша система давно не обновлялась, установка SP1 разом закроет все известные уязвимости и повысит стабильность системы.


Увеличить рисунок

Моя виртуальная машина не обновлялась с августа 2010 года, а после установки SP1 сразу приобрела актуальный статус.

Как правильно подготовиться к установке SP1

Подготовка может отличаться в зависимости от того, устаналивается SP1 на домашнюю систему или развертывается в организации.

Домашние системы

Для установки SP1 не требуется ничего особенного. Обновление KB976902 для установки полного пакета не требуется, поскольку входит в его состав. Если же установка производится посредством Windows Update, обновление нужно установить (оно должно быть доступно в списке).

Я рекомендую вам пробежаться по выделенным словам в списке, чтобы потом не было мучительно больно.

  • Войдите в систему с правами администратора. Если в систему выполнен вход с другими учетными записями, завершите их сеансы.
  • Удалите все бета-версии SP1, если они были установлены ранее.
  • Убедитесь, что на системном разделе достаточно свободного пространства. Для работы SP1 требуется от 4 Гб на 32-разрядной системе до 7 Гб на 64-разрядной системе.
  • Создайте резервную копию системного раздела. Я понимаю, что этому совету мало кто последует, поэтому нужно хотя бы включить защиту системы для системного раздела. Тогда программа установки SP1 создаст точку восстановления автоматически.
  • Убедитесь, что у вас под рукой есть установочный диск/флэшка Windows 7 или диск восстановления. Если после установки SP1 возникнут проблемы, например, с загрузкой системы, вы сможете войти в среду восстановления и откатиться к предварительно созданной точке. Я проверил — откатом получилось исправить даже принудительную перезагрузку компьютера во время установки SP1!
  • Если у вас мобильный компьютер (ноутбук/нетбук), подключите его к электросети.
  • Если ваш компьютер подключен к источнику бесперебойного питания (ИБП), и используется подключение к последовательному порту, отключите ИБП от этого порта. Это поможет избежать конфликтов при обнаружении оборудования программой установки SP1.

Компьютеры в организации

Здесь ответственность, безусловно, выше, поэтому требуется не только соблюдение вышеперечисленных пунктов, но и тщательное тестирование SP1 перед развертыванием на все компьютеры. Для ИТ-специалистов Microsoft подготовила большое количество документации, которая поможет вам спланировать развертывание SP1.

Одним из важных моментов является ограничение на использование RSAT. Его невозможно установить на систему с установленными или интегрированным SP1. Единственный официальный обходной путь на данный момент — это установить RSAT до установки SP1. Выпуск RSAT, полностью совместимого с SP1 ожидается весной. Однако есть и неофициальный способ, позволяющий установить RSAT в системе с SP1 (также обратите внимание на сообщение #3 в теме). Он заключается в интеграции RSAT в SP1, в отличие от не столь удачной идеи интеграции RSAT в систему.

Как установить SP1 вручную и автоматически

Обычная установка пакета запускается двойным щелчком мыши по исполняемому файлу, все как обычно.


Увеличить рисунок 

Вы успеете сварить кофе и выпить чашечку, пока пакет устанавливается.

Автоматическая установка

Для автоматической установки вы можете использовать любой из двух параметров:

  • /quiet – полностью скрытая автоматическая установка
  • /unattend – автоматическая установка с отображением индикатора хода выполнения (рекомендую, чтобы был виден прогресс установки)

Для полной автоматизации вы также можете добавить параметры:

  • /nodialog – подавляет сообщение об успешном завершении установки
  • /forcerestart – выполняет перезагрузку по окончании установки

Полный список параметров доступен при запуске исполняемого файла с ключом /?


Увеличить рисунок

Здесь не указан, например, ключ /extract, но он работает.

Как очистить место на диске после установки SP1

Можно сэкономить от 500 Мб до 1.5 Гб пространства, очистив резервные файлы SP1, которые образуются после его установки. Выполнив очистку, вы не сможете удалить SP1, поэтому я рекомендую не спешить с ней. Проблемы не всегда проявляются сразу, так что поработайте в системе две-три недели, прежде чем сжигать мосты.

Удалить резервные файлы можно двумя способами, но в любом случае рекомендуется включить защиту системы. Это необходимо потому, что перед удалением резервных файлов требуется создание точки восстановления.

Стандартная программа «Очистка диска»

С помощью входящей в состав Windows программы очистки диска можно легко удалить резервные файлы SP1.

Утилита командной строки DISM

В командной строке, запущенной с правами администратора, выполните:

dism /online /cleanup-image /spsuperseded

Операция занимает от 5 до 15 минут, в зависимости от системы.

Как интегрировать SP1 в дистрибутив

Начиная с Windows Vista, интеграция в дистрибутив официально не поддерживается. У вас есть несколько вариантов.

Официальный образ

Microsoft выпустила ISO-образ с интегрированным SP1. Он доступен партнерам и подписчикам TechNet и MSDN, а также доступен в сети. Это — самый лучший вариант, поскольку не надо возиться с интеграцией, а качество сборки гарантирует Microsoft.

Режим аудита

Рекомендуемый способ интеграции – это установка SP1 в режиме аудита. Вкратце процесс таков:

  1. Запуск установки Windows на виртуальной или физической машине и вход в режим аудита
  2. Установка SP1
  3. Запечатывание системы с помощью sysprep
  4. Захват образа в WIM-файл
  5. Подключение образа и очистка от резервных файлов SP1

После этой операции необходимо заново создать файл ответов, поскольку версии компонентов после интеграции обновляются.

Ручная интеграция

Поскольку SP1 — это все-таки обновление, хоть и большое, его можно интегрировать в дистрибутив средствами WAIK. Вникайте в инструкцию на русском, но учтите, что этот способ официально не поддерживается.

Сторонние утилиты

Утилита RT Seven Lite может интегрировать SP1 (гарантий, конечно, никаких).

Как удалить SP1

SP1 удаляется так же, как и все прочие установленные обновления. Командой shell можно быстро перейти к списку обновлений:

shell:AppUpdatesFolder

Затем введите в поиск KB976932 и удалите найденный пакет.


Увеличить рисунок

Из командной строки, запущенной с правами администратора, пакет удаляется командой:

wusa.exe /uninstall /kb:976932

Вы также можете использовать параметры /quiet для тихого удаления, а в сочетании с ним — /promptrestart для принятия решения о перезагрузке (по умолчанию система перезагружается автоматически).

Что вы думаете об SP1?

А вы уже успели поставить SP1 или собираетесь это сделать в ближайшее время? Полет нормальный или возникали проблемы при установке или после нее? Мне было бы очень любопытно услышать ваши отзывы! Делясь впечатлениями, упомяните о своей ОС – архитектуре и дистрибутиве. Вы также можете следить за результатами опроса на форуме, которые отражают процент участников, уже установивших SP1.

Ferrari Monza SP2 | характеристики и цена Ferrari Monza SP2 в России

Настоящим Я, в соответствии с требованиями Федерального закона от 27.07.2006 г. №152-ФЗ «О персональных данных» даю свое согласие лично, своей волей и в своем интересе на обработку (сбор, систематизацию, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), использование, распространение, передачу (включая трансграничную передачу), обезличивание, блокирование и уничтожение) моих персональных данных, в т.ч. с использованием средств автоматизации.

Согласие предоставляется в отношении следующих персональных данных: Фамилия, имя, отчество, Год, месяц, дата рождения; Пол; Контактные телефоны; Контактный адрес; Контактный email; адрес; Сведения о профессиональной деятельности; Модель приобретенного; обслуживаемого автомобиля; Название дилерского центра, где приобретен / обслуживался / ремонтировался а/м; Дата выдачи автомобиля при покупке / из сервиса; Государственный номерной знак автомобиля; VIN –номер автомобиля; Пробег автомобиля; Перечень работ, проведенных с автомобилем; Перечень замененных деталей.

Согласие предоставляется в целях определения потребностей в производственной мощности, мониторинга исполнения сервисными центрами гарантийной политики; ведения истории обращения в сервисные центры; проведения маркетинговых исследований в области продаж, сервиса и послепродажного обслуживания; для рекламных, исследовательских, информационных, а также иных целей.

Предоставляя свои персональные данные, я даю согласие на направление мне рекламной информации и участие в маркетинговых опросах.

Согласие предоставляется:

  • АО «Авилон АГ», адрес: 109316, г. Москва, Волгоградский пр., д.43, корп.3

Я выражаю согласие на передачу моих персональных данных:

  • АО «АкитА», адрес: 109316, г. Москва, просп. Волгоградский, д. 43, корп. 3

Согласие действует 75 лет и может быть отозвано в любой момент на основании письменного заявления.

Отличия версий Windows 7, какую из них лучше установить для игр, сравнение максимальной и профессиональной, как узнать SP (Service Pack) и номер сборки

Существует несколько версий операционной системы Windows 7: Home, Professional, Ultimate. Чтобы понять, какая для кого из пользователей подходит, нужно сначала узнать об их отличиях и особенностях. Каждая из этих версий имеет свои параметры и доступные функции, предназначена для особой цели и, соответственно, отличается по цене. Каждая следующая имеет функционал предыдущей плюс дополняется своим.

Версии Windows 7

Существует несколько версий Windows 7, и каждая из них имеет определённые характеристики.

  • Windows 7 Starter («Начальная») — именно эту версию вы получаете при покупке ноутбука или компьютера. Она является ознакомительной и не несёт в себе практически никакой функциональности. Starter поддерживает только 32-битную архитектуру, а это вводит ограничения на возможности использования оперативной памяти (2 Гб). В этой версии отключена визуализация рабочего стола — основная «фишка» Windows 7. Вы не сможете поиграть в любимую игру на двух мониторах, а также посмотреть фильм или послушать музыку, так как медиаплеер отсутствует среди стандартных программ;Windows 7 Starter содержит минимум функций
  • Windows 7 Home Basic («Домашняя базовая») — эта версия, как следует из названия, подходит для использования дома. Функции в ней по-прежнему урезаны. При её использовании вас возникнут сложности с созданием группы пользователей в локальной сети, а также с поддержкой домена. Вы не сможете подключиться к удалённому рабочему месту. Знаменитая Windows Aero хоть и есть, но в урезанном виде;Windows 7 Home Basic создана для домашнего пользования непрофессоиналами
  • Windows 7 Home Premium («Домашняя расширенная») — эта версия создана для продвинутых пользователей. Сняты практически все ограничения: красивое оформление рабочего стола, возможность создания локальной сети. Хотя поддержка домена и удалённого рабочего стола по-прежнему отключены. Разработчики посчитали, что эти функции не понадобятся обычным пользователям;Windows 7 Home Premium — для продвинутых пользователей на дому
  • Windows 7 Professional («Профессиональная») — идеальная версия. В ней появляется всё то, чего так не хватало в «Домашней расширенной»: домены и удалённый рабочий стол. Кроме того, в систему добавлен эмулятор Windows XP для поддержки устаревших приложений. Можно не бояться шпионов, так как в ней присутствует система шифрования EFC. Эта версия полностью удовлетворит пользователей, которым приходится работать дома, или станет надёжным помощником на работе;Windows 7 Professional — идеальна как для работы, так и для дома
  • Windows 7 Enterprise («Корпоративная») — версия, созданная специально для организаций. Кроме всех профессиональных функций, она поддерживает DirectAcces и содержит подсистему для запуска Unix-приложений. Она обычно закупается большими партиями для целой корпорации, а дома можно использовать что-то попроще;Windows 7 Enterprise просто создана для корпоративных клиентов
  • Windows 7 Ultimate («Максимальная») — версия, в которой собраны все возможности предыдущих. Эта редакция настолько полная и мощная, что зачастую не подходит не только домашним клиентам, но и большинству корпоративных. Стоит слишком много, занимает место и ресурсы. Однако, у 70% пользователей Windows 7 стоит именно она.Windows 7 Ultimate совмещает в себе все возможности предыдущих версий

Таблица: сравнение характеристик версий Windows 7

Windows 7 Starter Windows 7 Home Basic Windows 7 Home Premium Windows 7 Professional Windows 7 Enterprise Windows 7 Ultimate
Архитектура Только 32 бит 32 бит и 64 бит 32 бит и 64 бит 32 бит и 64 бит 32 бит и 64 бит 32 бит и 64 бит
Максимальное количество одновременно запущенных приложений Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено
Кол-во физических процессоров 1 1 1 2 2 2
Кол-во ядер процессора Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено Не ограничено
Max RAM (32-бит) 2 Гб 4 Гб 4 Гб 4 Гб 4 Гб 4 Гб
Max RAM (64-бит) 8 Гб 16 Гб 192 Гб 192 Гб 192 Гб
Процессор 1 ГГц 1 ГГц 1 ГГц 1 ГГц 1 ГГц 1 ГГц
Оперативная память (32-бит) 1 Гб 1 Гб 1 Гб 1 Гб 1 Гб 1 Гб
Оперативная память (64-бит) 2 Гб 2 Гб 2 Гб 2 Гб 2 Гб
Свободное место на жёстком диске (32-бит) 16 Гб 16 Гб 16 Гб 16 Гб 16 Гб 16 Гб
Свободное место на жёстком диске (64-бит) 20 Гб 20 Гб 20 Гб 20 Гб 20 Гб
Цена 50$ 100$ 150$ 260$ продаётся только под лицензиями (ФСТЭК) 330$

Видео: какие бывают версии Windows 7 и чем они отличаются

Как узнать версию Windows 7 по ключу

  1. Чтобы узнать версию Windows 7 по ключу, зайдите на официальный сайт Microsoft и скачайте программу Volume Activation Management Tool, нажав на кнопку Download.Скачайте официальное приложение Volume Activation Management Tool с официального сайта Microsoft
  2. Запустите загруженный файл и пройдите стандартный процесс установки.
  3. Откройте программу. Слева будут отображены все доступные функции. Выберите Product Key.
  4. В верхнее поле скопируйте свой ключ и нажмите Verify.Введите свой ключ в поле Product Key, нажмите Verify
  5. После этого на экране отобразятся новые текстовые поля с номером вашей версии Windows 7.Узнать версию своей операционной системы можно в программе Volume Activation Management Tool после ввода ключа

Как узнать версию дистрибутива Windows 7

  1. Чтобы узнать версию дистрибутива Windows, вставьте диск. Если начнётся установка — закройте окно.
  2. Откройте диск через стандартный проводник, чтобы посмотреть на его файлы.
  3. В папке sources находится файл ei.cfg, который нужно открыть с помощью WordPad или Notepad++.Открываем текстовые файлы в редакторе WordPad или Notepad++
  4. В пункте [EditionID] вы увидите свою версию Windows.Текущая версия Windows 7 находится в пункте (EditionID)
  5. Чтобы определить, к какой архитектуре относится образ, в той же папке откройте файл idwbinfo.txt.
  6. Надпись BuildArch=x86 означает, что у вас 32-битная система, BuildArch=amd64 – 64-битная.Разрядность устанавливаемой системы указана после слов BuildArch

Как узнать номер сборки и Service Pack Windows 7

  1. Чтобы узнать номер сборки, откройте меню «Пуск» и в поле поиска наберите winver.Введите в поле поиска меню «Пуск» winver и откройте найденную программу
  2. Перед вами появится окно, где отобразится вся информация о текущей версии Windows, в том числе о номере сборки и Service Pack. В окне «О программе» отображена вся доступная информация о системе
Видео: как узнать версию Windows 7 с помощью winver

Какая сборка лучше

Что такое сборка Windows? Опытные программисты скачивают операционную систему после её релиза, активируют её, добавляют свои улучшения, и у них получается своя сборка. Эту версию они уже продают или распространяют бесплатно. Например, раньше была очень популярна сборка Windows XP Zwer.

За основу этих сборок берётся оригинальный дистрибутив, плюс есть различные дополнительные программы, которые вы можете добавить в процессе установки. Но в плане стабильности эти сборки значительно проигрывают официальной версии. Практически все вопросы на форумах касаются именно сторонних сборок. Поэтому официальная версия всегда лучше.

Какой service pack лучше для Windows 7

Service Pack — это пакет обновлений и улучшений для операционной системы. Обычно они имеют номера SP1, SP2 и т. д. Microsoft распространяет обновления совершенно бесплатно. Если у вас включён Windows Server Update Service с настройками по умолчанию, то Service Pack загрузится автоматически. Для Windows 7 существует только Service Pack 1, поэтому выбирать лучший для Windows 7 просто не из чего. Для других версий Windows рекомендуется устанавливать последний, так как он содержит самые свежие обновления.

Windows 7 KN и N в чем разница

Выпуски Windows KN и N разработаны для жителей определённых регионов. Функционально они полностью соответствуют всем требованиям современной операционной системы, но у них вместо привычного программного обеспечения содержатся ссылки на альтернативы, характерные для определённых регионов. Элементы, отличающиеся в этих сборках:

  • элемент управления ActiveX;
  • проигрыватель Windows Media и всё, что с ним связано;
  • инфраструктура переносных устройств;
  • DVD-студия Windows.

Особенности региональных версий:

  • N: для Европы — отсутствует Windows Media Player и Internet Explorer;
  • K: для Кореи — отсутствует Windows Live Messenger и Windows Media Player;
  • KN: для Кореи и Европы — отсутствует Windows Media Player и Windows Live Messenger.

Частые вопросы о Windows 7

При использовании Windows 7 у пользователя могут возникнуть вопросы. Наиболее частые вопросы о версиях Windows 7 — как продлить лицензионную версию, вернуться к прежней Windows или обновиться до максимальной.

Как продлить срок официальной лицензии Windows 7

  1. Чтобы продлить срок действия официальной версии Windows 7, для начала откройте меню «Пуск» и выберите «Панель управления», затем перейдите в пункт «Администрирование» > «Службы».
  2. Среди всех служб отыщите защиту ПО (для облегчения поиска можно отсортировать службы по именам) и остановите этот процесс.Остановите службу защиты программного обеспечения в окошке «Службы»
  3. Перейдите из меню «Пуск» в «Панель управления» > «Параметры папок» > «Вид».
  4. Вам потребуется отобразить расширения для всех файлов, а также файлы и папки, которые разработчики Windows предпочли скрыть.
    Разрешите просмотр скрытых файлов и папок в «Параметрах папок»
  5. В папке C:\Windows\System32 нужно удалить 2 файла .C7483456-A289–439d-8115–601632D005A0. Для облегчения задачи воспользуйтесь поиском.Удалите два файлы, отвечающих за безопасность Windows, в папке System 32
  6. Вернитесь к службе защиты ПО через «Пуск» > «Панель управления»> «Администрирование» > «Службы» и возобновите её работу.
  7. Скачайте в сети любую утилиту для генерации ключа Windows 7.
  8. Следуя инструкциям, подберите ключ к своей системе и выполните перезагрузку.

Как откатиться к прежней версии Windows 7

Для того чтобы выполнить восстановление, вы должны найти на диске C папку Windows.old: без неё восстановление Windows невозможно. Также вам следует убедиться, что размер этой папки меньше, чем оставшееся место на диске. Теперь можно начинать восстановление.

  1. Запустите инсталлятор Windows.
  2. В окне «Установка Windows» настройте все необходимые параметры и нажмите кнопку «Далее».
  3. Система у вас уже есть, вам нужно её всего лишь восстановить. Для этого обратите внимание на небольшую ссылку внизу.Выберите «Восстановление системы» в меню установки Windows
  4. Кликните на операционную систему, нажмите «Далее».
    При установке выберите систему для восстановления
  5. В качестве способа восстановления подойдёт «Командная строка».В открывшемся окне выберите способ восстановления «Командная строка»
  6. Чтобы обезопасить себя от потери данных, перенесите их в устанавливаемую систему. Для этого введите последовательно следующие команды (без точки с запятой):
    • cd C:\;
    • Md Win7;
    • Move Windows Win7\Windows;
    • Move «Program Files» «Win7\Program Files»;
    • Move Users Win7\Users;
    • Attrib -h -s -r ProgramData;
    • Move ProgramData Win7\ProgramData;
    • Rd «Documents and Settings»;
    • move /y c:\Windows. old\Windows c:\;
    • move /y «c:\Windows.old\Program files» c:\;
    • move /y c:\Windows.old\ProgramData c:\;
    • move /y c:\Windows.old\Users c:\;
    • move /y «c:\Windows.old\Documents and Settings» c:\.
  7. Затем введите команду, различающуюся для разных версий Windows:
    • для систем Windows Server 2003, Windows XP или Microsoft Windows 2000 введите «D:\boot\bootsect /Nt52 c:»;
    • для Windows Vista нужна команда «D:\boot\bootsect /nt60 c:»;
    • для Windows XP или Windows 2000 введите по порядку следующие команды: «Attrib –h –s –r boot.ini.saved», затем Enter и «Copy boot.ini.saved boot.ini».
  8. Завершите работу с командной строкой, набрав exit, перезагрузитесь.После окончания настройки в командной строке выполните команду exit
  9. Если операционная система работает корректно — удалите папку C:\Win7.

Как обновить Windows 7 до максимальной версии

Обновление до максимальной версии происходит при условии, что вы обладаете лицензионным ключом. Некоторые активные ключи вы можете найти в сети, воспользовавшись Google.

  1. Вам понадобится программа Windows Anytime Upgrade. Во всех версиях, кроме «Максимальной», вы можете найти её в программах.Откройте Windows Anytime Upgrade в меню «Пуск»
  2. Откройте мастер обновлений и выберите «Введите ключ обновления».В «Мастере обновлений» выберите восстановление с помощью ключа
  3. Скопируйте в текстовое поле ваш ключ.Введите в поле свой ключ, нажмите «Далее»
  4. Система проверит его и обновится самостоятельно.После ввода ключа система обновится самостоятельно
Видео: обновление Windows 7 до Ultimate

Как перейти на более низкую версию Windows 7, не теряя файлов

Поменять версию Windows обычно хотят, когда текущая редакция не соответствует требованиям. Проблема заключается в том, что на компьютере уже много файлов и папок, расположенных в удобных местах, и переделывать всё это заново просто-напросто лень. Можно изменить версию без переустановки с сохранением всего содержимого компьютера (кроме старой операционной системы, разумеется), хотя инсталлятор Windows всё же понадобится.

  1. Зайдите в меню «Пуск», откройте «Все программы» > «Стандартные» > «Выполнить».
  2. Наберите в текстовом поле regedit.Запустите редактор реестра через команду regedit
  3. В левом окне перейдите по ветке HKEY_LOCAL_MACHINE\SOFTWARE\Microsoft\Windows NT\CurrentVersion.Перейдите по пути HKEY_LOCAL_MACHINE\SOFTWARE\Microsoft\Windows NT\CurrentVersion
  4. В поле EditionID прописана версия системы — замените эту строчку на желаемую версию.
  5. Запустите инсталлятор Windows и выполните обновление системы, выбрав пункт Upgrade.Запустите обновление системы, выбрав пункт Upgrade

Как разрешить пользователям выбирать редакцию Windows 7 при установке

При установке из стандартного образа Windows 7 вы можете выбрать только одну версию, хотя среди файлов можно увидеть и другие. Заставить инсталлятор спрашивать у пользователя желаемую версию можно следующим образом:

  1. С помощью проводника или UltrISO откройте образ Windows 7.
  2. Зайдите в папку sources и удалите файл ei.cfg.
  3. Сохраните изменения и запишите установочный диск заново.

Что такое trial-версия Windows 7

Trial-версия рассчитана на 90-дней и пригодится IT-специалистам для тестирования. В ознакомительном режиме вы можете скачать только Windows Enterpride. Согласно правилам использования trial-версии после истечения этих 90 дней придётся полностью переустанавливать систему, так как изменить её на полную нельзя.

Перед покупкой Windows задумайтесь, для чего вам нужна эта операционная система, и потом в соответствии со своими требованиями выберите необходимую версию. Так что лучше не тратить время и деньги на функционал, который вам не подходит.

sp3, sp2 и sp. ✎ pangenes.ru

Гибридизация sp3, sp2 и sp в органической химии с практическими примерами.

Введение

Зачем нам теория гибридизации?

Вот один ответ на это. Экспериментально подтверждено, что атом углерода в метане (CH4) и других алканах имеет тетраэдрическую структуру.

  • Напомним, что в тетраэдрической геометрии все углы имеют 109,5°, а связи имеют одинаковую длину.
  • Помните также, что ковалентные связи образуются в результате перекрывания орбиталей и совместного использования двух электронов между атомами.

Итак, чтобы предсказать валентность и геометрию атома углерода, мы рассмотрим его электронную конфигурацию и орбитали.

C – 1s 2 2s 2 2p 2

Валентные электроны — те, которые находятся на 2s и 2p орбиталях, и те, которые участвуют в связывании и химических реакциях.

Из конфигурации электронов видно, что невозможно создать четыре одинаковые по длине, энергии и всем остальным параметрам связи, потому что одна из орбиталей является сферической s, а остальные три — p — орбиталями.

  • И именно здесь мы нуждаемся в теории, которая может помочь нам объяснить известную геометрию и валентность атома углерода во многих органических молекулах.

Гибридизация это теория, которая используется для объяснения определенных молекулярных геометрий, которые в противном случае были бы невозможны.

Гибридизация sp3

Теперь давайте посмотрим, как это происходит, используя метан в качестве примера.

На первом этапе один электрон перепрыгивает с 2s на 2p орбиталь. Это приводит к возбужденному состоянию углерода:

Обратите внимание, что электрон движется вперед, так как p — оболочка выше по энергии, чем s — оболочка, и это не является энергетически выгодным, но мы увидим, как это компенсируется на следующем этапе, когда орбитали смешаны (гибридизованы).

  • Таким образом, на следующем этапе s и p — орбитали углерода в возбужденном состоянии гибридизуются с образованием четырех одинаковых по размеру, форме и энергии орбиталей.

Количество гибридных орбиталей всегда совпадает с количеством смешанных орбиталей.

Итак, четыре орбитали (одна 2s + три 2p) смешаны, и в результате получается четыре sp3 орбитали. Это гибридные орбитали, которые похожи на s и p — орбитали.

  • Таким образом, мы называем их sp3, потому что они образованы из одной s орбитали и трех p орбиталей.

Образование этих вырожденных гибридных орбиталей компенсирует энергию подъема s — p — перехода, поскольку они имеют меньшую энергию, чем p — орбитали.

Четыре sp3 — гибридизованные орбитали располагаются в тетраэдрической геометрии и образуют связи, перекрывая s — орбитали четырех водородов: это объясняет симметричную геометрию метана (CH4), где все связи имеют одинаковую длину и угол связи.

Все четыре связи C — H в метане являются одинарными связями, которые образуются путем лобового (или конечного) перекрытия sp3 — орбиталей углерода и s — орбитали каждого водорода.

Связи, которые образуются путем встречного перекрытия орбиталей, называются σ (сигма) связями, потому что электронная плотность сосредоточена на оси, соединяющей атомы C и H.

Этан — Ch4-Ch4 и другие алканы

Если вместо одного водорода мы подключим другой sp3 — гибридизированный углерод, мы получим этан:

И, следовательно, во всех алканах существует сигма — связь между атомами углерода и атомами углерод — водород, и атомы углерода sp3 гибридизуются с тетраэдрической геометрией:

Чтобы обобщить это, любой атом с четырьмя группами (или атом или одинокая пара) является sp3 гибридизированным.

  • И если посмотреть на это, то, чтобы четыре группы были как можно дальше друг от друга, как мы знаем из теории отталкивания электронных пар, группы должны находиться на одинаковых четырех орбиталях, что возможно только в гибридизации sp3.

Например, какая гибридизация кислорода в следующей молекуле?

Кислород связан с двумя атомами и имеет две неподеленные пары. Всего — четыре группы, и именно поэтому он sp3 гибридизован.

Гибридизация sp2

Когда атом углерода находится в возбужденном состоянии, sp3 — гибридизация не является единственным вариантом смешивания орбиталей.

Гибридизация sp2 происходит, когда s — орбиталь смешивается только с двумя p — орбиталями, в отличие от трех p — орбиталей в гибридизации sp3.

  • Итак, три орбитали смешаны, и в результате получаются три гибридные орбитали, которые называются sp2 — гибридными орбиталями.

Получающиеся 3 sp2 — орбитали затем располагаются в тригональной плоской геометрии (120°).

Важным отличием здесь по сравнению с гибридизацией sp3 является неучтенная (негибридизированная) p — орбиталь, которая не участвовала в гибридизации. Эта орбиталь расположена под углом 90° к плоскости тригонального расположения трех орбиталей sp2:

Гибридизация углерода в этилене — C2H4

Два sp2 — гибридизированных атома углерода могут образовывать сигма — связь, перекрывая одну из трех sp2 — орбиталей и связываясь с двумя атомами водорода каждый, и два атома водорода образуют сигма — связь с каждым углеродом, перекрывая их s — орбитали с двумя другими sp2 — орбиталями.

Это создает три связи для каждого углерода и одну орбиталь слева.

  • Помните, стандартная валентность углерода равна четырем, и ей положено иметь четыре связи.

Эта четвертая связь образована параллельным перекрытием двух 2p — орбиталей на каждом атоме углерода. Этот тип связи путем параллельного перекрытия орбиталей называется π-связью.

Итак, два атома углерода в этилене, который является первым членом семейства алкенов, имеют двойную связь.

  • В каждой двойной связи есть одна сигма и одна π-связь.

Вот некоторые ключевые параметры гибридизации sp2 и двойных связей, которые вам необходимо знать:

* Все атомы на двойной связи находятся в одной плоскости;

* Угол между атомами составляет 120°;

* Угол между плоскостью и p — орбиталями составляет 90°.

Гибридизация sp

При sp — гибридизации s — орбиталь углерода в возбужденном состоянии смешивается только с одной из трех 2p — орбиталей.

Это называется sp — гибридизацией, потому что две орбитали (одна s и одна p) смешаны:

Получающиеся две sp — гибридные орбитали затем располагаются в линейной геометрии (180°), а две негибридизованные 2p — орбитали располагаются под углом 90°:

Давайте посмотрим, как это происходит в ацетилене — C2H2. Два атома углерода образуют сигма — связь, перекрывая sp — орбитали.


Один водород связывается с каждым атомом углерода, перекрывая его орбиталь с другой орбиталью.

Две p — орбитали каждого углерода перекрываются, образуя две π-связи.

Основные параметры sp гибридизации и тройной связи:

* Все атомы имеют линейную структуру;

* Угол между атомами составляет 180°;

* В тройной связи есть одна σ (сигма) и две π (пи) связи.

Гибридизация других элементов

В заключение, все, что мы обсуждали выше, относится не только к углероду.

Теория гибридизации работает с тем же принципом для всех других важных элементов в органической химии, таких как кислород, азот, галогены и многие другие.

Windows Vista — SP2 чего ждать? | Windows IT Pro/RE

Я получил по электронной почте несколько сообщений о следующем крупном пакете обновлений для Windows Vista — SP2. Итак, во-первых, Microsoft почти наверняка предоставит пакет SP2 широкому кругу пользователей в апреле этого года. Этому событию предшествовали три крупных предварительных версии — Beta 1 в конце октября 2008 г., Beta 2 в декабре 2008 г. и самая последняя, RC1, — в феврале 2009 г. Я устанавливал каждую из этих версий по очереди на своем ноутбуке, на котором также тестировал сборку Internet Explorer 8.0 RC.

Прежде чем рассказывать о функциональных изменениях в Vista SP2, нужно отметить, что этот выпуск будет общим обновлением для Windows Server 2008 и Vista. Такое возможно благодаря согласованию выпусков клиентской и серверной операционной систем — программный код SP1 входил в состав Server 2008, выпущенного в 2008 г. В дальнейшем потребителям будет проще тестировать и развертывать пакеты обновления. Не совсем обычно: SP2 — второй пакет обновления для Vista, но первый для Windows Server 2008. Однако не стоит придавать этому особенного значения.

С функциональной точки зрения пакет SP2 сильно отличается от Vista SP1. В нем нет существенных изменений, направленных на улучшение функциональности, надежности или производительности. SP2 — в основном традиционный пакет обновления, в котором собраны все исправления и другие новшества, выпущенные после SP1. Поэтому наличие SP1 — обязательное условие для установки SP2. Таким образом, компьютеры Windows Server 2008 SP2 и Vista SP2 должны быть почти полностью совместимы с программным обеспечением и драйверами, созданными для Server 2008, Vista и Vista SP1.

Тем не менее в SP2 есть небольшие функциональные изменения. Время не стоит на месте, и компании нужно соответствовать современным тенденциям. Среди функциональных новшеств SP2 можно назвать следующие.

  • Windows Search 4.0. В настоящее время компонент доступен как отдельное обновление для Vista. Windows Search 4.0 отличается повышенным быстродействием, лучшей совместимостью с групповыми политиками и возможностью индексировать зашифрованные файлы.

  • Bluetooth 2. 1. В настоящее время распространяется как отдельное обновление под названием Windows Vista Feature Pack for Wireless, совместим с новейшей версией беспроводного стандарта Bluetooth.

  • Запись дисков данных Blu-ray. После установки SP2 появится возможность записывать диски данных Blu-ray из оболочки Vista. Но создавать фильмы Blu-ray будет нельзя.

  • Улучшения, относящиеся к файловой системе exFAT. Компания Microsoft разработала Extended FAT, или exFAT, более современную файловую систему для устройств с флэш-памятью, таких как USB-накопители. В ней устранено ограничение на размер файла в 4 Гбайт, как в FAT/FAT32, а в одной папке можно хранить более 1000 файлов. Поддержка exFAT появилась в Vista SP1, но с выходом пакета SP2 поддерживаются временные метки UTC для синхронизации файлов через границы временных поясов.

  • Улучшения Wi-Fi. Благодаря технологиям Windows Connect Now (WCN) упрощается настройка Wi-Fi (эта функция есть и в пакете расширений Windows Vista Feature Pack for Wireless). Также сократилось время выхода соединений Wi-Fi из режима сна.

  • 64-разрядные микропроцессоры VIA. С выходом SP2 Vista совместима с 64-разрядными микропроцессорами VIA.

  • Более эффективное управление энергопотреблением. По данным Microsoft, назначаемые по умолчанию политики управления энергопотреблением примерно на 10% лучше прежних.

Наряду с отмеченными улучшениями, в SP2 появился ряд изменений, касающихся исключительно Windows Server 2008. Например, в состав первоначально выпущенной версии Server 2008 входила предварительная версия решения виртуализации Hyper-V, а в SP2 появится окончательная версия Hyper-V 1.0. Ранее пользователи могли бесплатно загрузить эту версию. Предоставляется одна бесплатная лицензия для гостевой операционной системы с Windows Server 2008 Standard Edition, четыре бесплатные лицензии с Windows Server 2008 Enterprise Edition и неограниченное число бесплатных лицензий с Windows Server 2008 Datacenter Edition. В SP2 также устранены некоторые проблемы с лицензиями Terminal Server.

И наконец, в SP2 входит инструмент очистки compcln.exe, который окончательно удаляет старые файлы RTM и SP1, замененные файлами SP2. Таким образом, можно сэкономить пространство на диске и уменьшить размер будущих образов установки.

Вероятно, все пользователи, заинтересованные в тестировании SP2, но не внесенные в список испытателей, в скором времени смогут получить версию RC1 через службы MSDN и TechNet. На данный момент опубликована декабрьская бета-версия.

Поделитесь материалом с коллегами и друзьями

Функциональное значение факторов транскрипции Sp1, Sp2 и Sp3 в регуляции промотора мышиного CTP: фосфохолинцитидилилтрансферазы α

Фактор транскрипции Sp1 участвует в регуляции экспрессии гена мышиного CTP: фосфохолинцитидилилтрансферазы α (CTα), Ctpct (М. Бакович, К. Уэйт, В. Танг, И. Табас и Д. Е. Вэнс. 1999. Biochim. Biophys. Acta. 1438: 147–165). Мы использовали временные трансфекции, анализ мутаций, гель-сдвиги с электромобильностью и иммуноблот-анализ, чтобы проверить гипотезу о том, что экспрессия гена CTα частично контролируется связыванием трех ядерных факторов, действующих на trans , Sp1, Sp2 и Sp3. .Sp1 и Sp3 активируют транскрипцию гена CTα посредством последовательного связывания в трех промоторных доменах. При транскрипции, опосредованной Sp1, Sp3 действует как активатор дозозависимым образом и наоборот. Sp2 репрессирует управляемую Sp1 и Sp3 транскрипцию в клетках Drosophila SL2, но стимулирует транскрипцию в клетках млекопитающих C3h20T1 / 2. Наши результаты предполагают, что преобладающее действие белков Sp является прямой функцией локальной организации трех цис--действующих элементов в областях A (-31 / -9), B (-88 / -50) и C (- 148 / −128).Способность дистальных областей C (-148 / -128) и проксимальных A (-31 / -9) активировать или репрессировать транскрипцию зависит от клеточного фона. Множественные связывающие элементы в положении B (-88 / -50) обеспечивают положительную регуляцию независимо от клеточного контекста. Однако эффективность белков Sp в этом сайте в значительной степени определяется соседними сайтами A и C. Результаты показывают, что уровень экспрессии гена CTα будет зависеть от типа клетки, доступности белков Sp, а также структуры и организации. из трех действующих элементов cis .

— Бакович М., К. А. Уэйт и Д. Э. Вэнс. Функциональное значение факторов транскрипции Spl, Sp2 и Sp3 в регуляции промотора мышиного CTP: фосфохолинцитидилилтрансферазы α. J. Lipid Res. 41: 583–594.

Производительность кандидата на выпуск Windows Vista с пакетом обновления 1 (SP1) и Vista с пакетом обновления 2 (SP2)

Введение


Нам удалось получить копию Windows Vista SP2 RC (кандидат на выпуск) от Microsoft и мы решили протестировать его против Vista SP1, чтобы проверить, не потребители могут ожидать каких-либо улучшений производительности в последнем пакете обновления для испытывающей трудности операционной системы Vista. Релиз-кандидат

или RC просто означает, что это возможная окончательная версия, которую Microsoft выпустит для публики вскоре после этого. Многие предварительные версии Vista SP2 BETA были опубликованы к концу прошлого года, но это сборка 6002.16659.0-1728 — более новый выпуск, который, вероятно, принесет некоторые улучшения.

Помимо любых возможных улучшений производительности, пакеты обновления всегда включают новые функции ОС и, как правило, массу исправлений ошибок и обновлений безопасности.

Вот краткое изложение новых функций, которые Microsoft добавит в Vista SP2 из PC Adviser :

Позволяет записывать данные на диски Blu-ray

Добавьте в вашу систему Vista Feature Pack For Wireless, которая предоставляет поддержка новейшей технологии Bluetooth — Bluetooth v2.1 — а также для протокола Wi-Fi Windows Connect Now (WCN)

Повышение производительности Wi-Fi при выходе из спящего режима Vista

Сделайте так, чтобы гаджет боковой панели RSS-каналов работал быстрее и лучше

Дайте вам новейшая поисковая система для настольных компьютеров, Windows Search 4

Сократите ресурсы, необходимые для запуска различных гаджетов боковой панели

Это даст вашей ОС также полную настройку

Обеспечьте поддержку вашего компьютера для новой 64-разрядной версии VIA Technologies. -bit CPU

Позвольте вашей системе поддерживать exFAT, который может обрабатывать большие файлы, а также может использовать временные метки UTC, чтобы вы могли синхронизировать файлы в разных часовых поясах

Повысьте эффективность управления питанием на 10 процентов

Мы установили новые установки как Vista SP1, так и SP2 на нашем испытательном стенде, установили все доступные обновления из Центра обновления Windows для обеих операционных систем и приступили к тестированию производительности за последние пару дней.Наша установка SP2 Ultimate заняла в общей сложности около 14 ГБ места на жестком диске, в то время как SP1 немного тоньше — около 13 ГБ.

Давайте начнем сейчас и посмотрим, стоит ли обновляться до Vista SP2.

Настройка тестовой системы и 3DMark Vantage


Настройка тестовой системы

Процессор (ы): Intel Q9450, четырехъядерный, 3,2 ГГц
Материнские платы: MSI X48 Platinum (поставляется MSI )
Память: 2 x 2 ГБ Patriot DDR3 1600 МГц
Жесткий диск (и): 2 x Western Digital VelociRaptor 300 ГБ в RAID 0 (поставляется Western Digital )
Видеокарта: MSI HD Radeon 3870 X2 OC ( Поставляется MSI )
Операционная система: Windows Vista SP1 64-бит и Windows Vista SP2 RC 64-бит
Драйверы: Последние обновления Windows и ATI Catalyst 9. 1

После установки новой копии Windows Vista SP2 RC на чистый раздел нашей быстрой установки VelociRaptor RAID 0 размером 300 ГБ, мы были готовы начать тестирование.


Вкратце, в установке SP2 не было ничего нового или особенного. На установку ОС также ушло примерно столько же времени, что и на SP1. Когда Microsoft в конечном итоге выпустит Vista SP2 для мира, вы сможете загрузить небольшую автономную программу установки обновлений для обновления SP1 до SP2, но это еще не все.

Мы хотели бы использовать новейшую видеокарту (4870 X2), но у нас не было возможности получить ее от AMD, поэтому нам пришлось остановиться на способной Radeon HD 3870X2 OC от MSI.

3DMark Vantage

Используемая версия и / или исправление: 1.01
Домашняя страница разработчика: http://www.futuremark.com
Домашняя страница продукта: http://www.futuremark.com/products / 3dmarkvantage /
Купи здесь

3DMark Vantage — это новый отраслевой эталон производительности ПК в играх от Futuremark, недавно разработанный для Windows Vista и DirectX10. Он включает два новых графических теста, два новых теста ЦП, несколько тестов новых функций и поддержку новейшего оборудования.

3DMark Vantage основан на совершенно новом механизме рендеринга, разработанном специально для полного использования DirectX10, нового графического API от Microsoft.


Как видно из нашего первого теста, разница между SP1 и SP2 небольшая, однако SP2 здесь с очень небольшим отрывом лидирует. Он немного отстает только по показателям графического процессора, но совсем не намного.

Benchmarks — PCMark Vantage x64


PCMark Vantage x64

Используемая версия и / или исправление: x64 Обновление за ноябрь 2007 г.
Домашняя страница разработчика: http://www.futuremark.com
Домашняя страница продукта: http : //www.futuremark.com/benchmarks/pcmark-vantage//
Купить здесь

PCMark Vantage — это первый объективный тест производительности оборудования для ПК с 32- и 64-разрядными версиями Microsoft Windows Vista. PCMark Vantage идеально подходит для тестирования любого типа ПК с Microsoft Windows Vista, от мультимедийных домашних развлекательных систем и ноутбуков до специализированных рабочих станций и игровых устройств высокого класса. Независимо от того, является ли тестирующий художник или ИТ-специалист, PCMark Vantage показывает пользователю, где его система взлетает или падает, и как добиться максимальной производительности от его оборудования. PCMark Vantage достаточно прост в использовании даже для самых обычных энтузиастов, но при этом поддерживает всестороннее профессиональное тестирование промышленного уровня.


Что касается PCMark Vantage x64, SP1 снова лидирует, но опять же, результаты очень близки.

Тесты — память EVEREST


EVEREST Memory Benchmark

Используемая версия и / или исправление: 4.60
Домашняя страница разработчика: http://www.lavalys.com/
Домашняя страница продукта: http: // www. lavalys.com/products/overview.php?pid=3&ps=UE&lang=en
Купите здесь

EVEREST Ultimate Edition — это ведущее в отрасли решение для системной диагностики и тестирования производительности для энтузиастов-пользователей ПК, основанное на отмеченном наградами ЭВЕРЕСТ Технология.Во время оптимизации и настройки системы он предоставляет важную информацию о системе и разгоне, расширенные возможности мониторинга и диагностики оборудования для проверки воздействия примененных настроек. Тесты производительности ЦП, FPU и памяти позволяют измерить фактическую производительность системы и сравнить ее с предыдущими состояниями или другими системами. Кроме того, полная информация о программном обеспечении, операционной системе и безопасности делает EVEREST Ultimate Edition комплексным инструментом диагностики системы, который предлагает в общей сложности 100 страниц информации о вашем ПК.


Тест памяти и кэша EVEREST снова дает SP1 победу, но, как мы уже видели в наших тестах, результаты очень близки, и их совсем не так много разделять.

Тесты — Super Pi


Super Pi

Используемая версия и / или патч: 1.5 XS Mod
Домашняя страница разработчика: http://pw1.netcom.com/~hjsmith/Pi/Super_Pi.html
Домашняя страница продукта: http://pw1.netcom.com/~hjsmith/Pi/Super_Pi.html

Разработанная некоторыми людьми из Токийского университета (да, Япония), Super PI — это небольшая утилита, которая выполняет те же функции, что и название подразумевает.Он рассчитывает PI с заданным количеством десятичных знаков. Поскольку PI — это бесконечное число справа от десятичной точки, утилита измеряет время, необходимое для обозначения заданного количества разрядов. Он выполняет вычисления заданное количество раз и дает время для завершения задачи. Это простой и эффективный способ измерить вычислительную мощность процессора, используемого для компиляции результатов.


С минимальным отрывом, полсекунды, SP2 здесь побеждает.

Benchmarks — CINEBENCH R10 64-bit


CINEBENCH R10 64-bit bike

Используемая версия и / или исправление: Release 10 64-bit bike
Домашняя страница разработчика: http: // www. maxon.net/
Домашняя страница продукта: http://www.maxon.net

CINEBENCH — это набор реальных тестов, который оценивает производительность вашего компьютера. MAXON CINEBENCH основан на отмеченном наградами программном обеспечении MAXON для анимации CINEMA 4D, которое широко используется студиями и производственными домами по всему миру для создания 3D-контента. Программное обеспечение MAXON использовалось в таких фильмах-блокбастерах, как «Человек-паук», «Звездные войны», «Хроники Нарнии» и многих других.

MAXON CINEBENCH запускает несколько тестов на вашем компьютере, чтобы измерить производительность основного процессора и видеокарты в реальных условиях.Приложение для тестирования производительности использует до 16 ЦП или ядер ЦП и доступно для Windows (32-разрядная и 64-разрядная версии) и Macintosh (PPC и на базе Intel).


Снова мы видим, что SP2 может вырвать преимущество у SP1 всего на одну секунду, но победа есть победа.

Benchmarks — HD Tune Pro — чтение производительности


HD Tune Pro — чтение производительности

Версия и / или исправление: 3. 0
Домашняя страница разработчика: http://www.efdsoftware.com/
Продукт Домашняя страница: http: // www.hdtune.com/>

HD Tune — это утилита для работы с жестким диском, которая имеет следующие функции:

— Benchmark: измеряет производительность
— Info: показывает подробную информацию
— Health: проверяет состояние работоспособности с помощью SMART
— Error Scan : сканирует поверхность на наличие ошибок
— Отображение температуры

HD Tune может также работать с другими устройствами хранения, такими как карты памяти, USB-накопители, iPod и т. д.


Когда дело доходит до скорости чтения с жесткого диска, мы ставим наш ICH9R- включил 300GB RAID 0 VelociRaptor для тестирования.

Как видите, SP2 RC на данный момент имеет некоторые проблемы с производительностью жесткого диска. Результаты серийной и максимальной скорости хороши, но это влияет на минимальную и среднюю скорости. Это может быть исправлено с помощью нового драйвера INF или других драйверов от Intel, но это еще предстоит выяснить.

Тесты — PT Boats: Knights of the Sea


PT Boats: Knights of the Sea

Используемая версия и / или патч: Benchmark Demo
Домашняя страница разработчика: http://en.akella.com /
Домашняя страница продукта: http: // www.pt-boats.net/

PT Boats: Knights of the Sea — военно-морской симулятор, в котором игрокам предстоит управлять москитным флотом союзных войск, России или Германии в разгар Второй мировой войны.

Использование новейшей технологии Direct X 10. Плата PT — Knights of the Sea способна подвергнуть современные компоненты серьезной нагрузке, что, в свою очередь, дает нам довольно интенсивный тест.


Когда мы приступаем к нашему первому игровому тесту, мы видим, что SP2 действительно хорошо себя показал.Мы прогнали результаты несколько раз, и результаты были стабильными.

Benchmarks — Far Cry 2


Far Cry 2

Используемая версия и / или патч: 1. 01
Timedemo or Level Used: Ranch Long
Developer Homepage: http://www.ubi.com /
Домашняя страница продукта: http://www.farcry2.com/
Купите здесь

Dunia Engine был создан специально для Far Cry 2 отмеченной наградами командой разработчиков Ubisoft Montreal.Он обеспечивает наиболее реалистичную разрушаемую среду, потрясающие спецэффекты, такие как динамическое распространение огня и эффекты шторма, дневной и ночной цикл в реальном времени, динамическую музыкальную систему, искусственный интеллект врагов без сценария. и многое другое.


SP1 здесь лидирует в области минимального и максимального FPS, но когда мы смотрим на среднюю частоту FPS, все здесь связано.

Benchmarks — Crysis Warhead


Crysis Warhead

Используемая версия и / или исправление: Без исправлений
Timedemo or level used: Train
Developer Homepage: http: // www. crytek.com
Домашняя страница продукта: http://crysiswarhead.ea.com/
Купите здесь

Crysis Warhead обновляет и уточняет игровой процесс оригинальной игры с помощью побочного сюжета с участием Психо, одного из предыдущих главных героев Номада союзники. Игра представляет собой параллельный сюжет, который следует за сержантом Майклом «Психо» Сайксом, персонажем из оригинального Crysis, который сталкивается со своими испытаниями и проблемами на другой стороне острова во время периода первой игры.

Он также демонстрирует новую, улучшенную и оптимизированную версию CryEngine 2 с использованием полных расширений DX10 и является первой игрой, разработанной будапештской студией Crytek.


Под Crysis Warhead, SP1 может быть впереди в отделе максимального FPS, но когда дело доходит до всех важных минимальных FPS, SP2 намного впереди, и из-за этого он может предлагать лучшее среднее FPS, совсем чуть-чуть.

Тесты — время загрузки


Время загрузки

В нашем последнем тесте, сравнивающем Vista SP1 и Vista SP2 RC, мы решили провести несколько ручных тестов с секундомером Apple iPhone 3G в руке. Какая удобная мелочь.

Наш первый тест — это время загрузки операционной системы, и мы измеряем его с момента включения системы до тех пор, пока оно не достигнет рабочего стола и курсор в виде песочных часов исчезнет.

Второй тест — время загрузки игрового уровня, и мы использовали Far Cry 2 (демоверсия теста Ranch Long). Мы отсчитываем время от момента нажатия кнопки тестирования во встроенном приложении для тестирования производительности FC2 до начала тестирования.

Для каждого набора тестов мы запускали тесты три раза и усредняли результаты, но на удивление результаты были довольно стабильными.Мы также удалили полсекунды (0,5) из окончательного результата, чтобы учесть человеческую задержку с секундомером.


Если вы обращали внимание на наши тесты чтения жестких дисков в HD Tune Pro, вы помните, что SP1 значительно опередил в этой области.

Как мы видим здесь, кажется очевидным, что более низкая производительность жесткого диска в SP2 также влияет на время загрузки с большим запасом.

С этим нужно будет разобраться, прежде чем пользователи даже подумают о переходе на SP2 с SP1 или других.

Заключительные мысли

Итак, из нашего сегодняшнего тестирования, какой вывод мы делаем в конце дня?

Vista Service Pack 2 RC удалось украсть у Vista SP1 несколько удивительных игровых достижений — некоторые с довольно большим отрывом.SP2 RC показал гораздо лучшую производительность в тесте PT Boats — почти до 33% в среднем FPS. А в Crysis Warhead минимальная частота кадров была значительно улучшена: с четырех кадров в секунду в SP1 до десяти кадров в секунду в SP2.

Это, к сожалению, почти так же хорошо, как и в случае с SP2 — в некоторых других тестах оба закончились с очень равными результатами, но в большинстве случаев SP1 выходил на подиум первым.

Что касается производительности жесткого диска на микросхеме контроллера Intel ICH9R, то в SP2 производительность была довольно низкой.На данном этапе мы не уверены, связано ли это с пакетом обновления или плохим драйвером, но очевидно, что что-то нужно делать. Это сильно повлияло на производительность чтения, особенно на минимальной скорости чтения, когда SP2 упал примерно до 48 МБ / с, тогда как SP1 остался на уровне примерно 136 МБ / с.

Это влияние на производительность жесткого диска также отрицательно сказалось на времени загрузки, поскольку для полной загрузки пакета SP2 на рабочий стол Windows требуется на 8,5 секунд больше. Точно так же на загрузку уровня игры также повлияло то, что SP2 загружался на шесть секунд дольше в демоверсию теста Far Cry 2.

Если вам не требуются некоторые новые функции в SP2 или вам нравится идея иметь все последние исправления ошибок и обновления безопасности, мы бы не рекомендовали обновляться до SP2 в данный момент. Новые драйверы от Intel, AMD (ATI) и NVIDIA могут помочь увеличить цифры, но на этом этапе игры, и если для вас важна производительность, придерживайтесь SP1.

Если вы уже установили SP2 или хотите прокомментировать эту статью, направляйте свои мысли и комментарии на наш форум!

Беспроводные вторичные сенсорные экраны 2GIG GC3 — SP1 против SP2

Беспроводные вторичные сенсорные экраны

2GIG GC3
2GIG-SP1-GC3 Дополнительный сенсорный экран

2GIG-SP2-GC3 Вторичный сенсорный экран
НЕСКОЛЬКО ВАРИАНТОВ УПРАВЛЕНИЯ ДЛЯ GC3
Добавьте до четырех беспроводных сенсорных экранов, чтобы обеспечить управление системой в любом удобном месте.
ПОЛНОЦВЕТНЫЙ СЕНСОРНЫЙ ЭКРАН 7 ДЮЙМОВ
НАСТЕННОЕ ИЛИ НАСТОЛЬНОЕ КРЕПЛЕНИЕ (ИСПОЛЬЗОВАНИЕ 2GIG-DESK)
ПОДКЛЮЧАЕТСЯ ЧЕРЕЗ WIFI
КОНТРОЛЬ БЕЗОПАСНОСТИ — ПРОСМОТР СОСТОЯНИЯ, БАЙПАС, постановка на охрану, снятие с охраны
ЗВОНОК
ГОЛОСОВЫЕ СООБЩЕНИЯ
АВТОМАТИЗАЦИЯ УПРАВЛЕНИЯ — СЦЕНЫ, НОМЕРА И ЗАКЛАДКИ
ПРОСМОТР ПОГОДНЫХ ДАННЫХ













2GIG-SP1-GC3
Предлагает те же функции управления, что и основной Панель
GC3.Полный контроль безопасности, а также контроль
над устройствами автоматизации, включая сцены, комнаты
и опции закладки. 2GIG-SP1-GC3 также
отображает полный пятидневный дисплей погоды.
2GIG-SP2-GC3
Может быть установлен на стене или столе с помощью 2GIG-CP-DESK
Аксессуар (продается отдельно). Этот сенсорный экран показывает
Состояние системы, обход зон, постановка на охрану, постановка на охрану или
снять с охраны.
2GIG-SP1-GC3
2GIG-SP2-GC3 Панель
7-дюймовый емкостный сенсорный экран
Разрешение:
800 x 480 пикселей
Постановка на охрану одним нажатием
Емкостные сенсорные кнопки
— Дом, Скорая помощь
Размеры:
8.9 дюймов x 5,7 дюйма x 1,25 дюйма
Отображение времени и даты
5-дневный прогноз погоды
Обновления прошивки:
• В эфире
• USB
Связь
Подключается через Wi-Fi, точку доступа GC3 или Ethernet
Автоматика
Создание и выполнение сцен
Создать комнаты
Экран закладок
Установка
Ремешок для третьей руки
Интегрированный уровень
Центрирующая метка, легко выравниваемая
Крепится к стене или использует настольное крепление (2GIG-CP-DESK)
Мощность
100-240 В переменного тока, 50/60 Гц 1.Адаптер 7A 14VDC
Литий-полимерный резервный аккумулятор
Рабочая температура: от 0 ° C до 40 ° C, от 32 ° F до 104 ° F
Сертификаты
UL1023
Панель
7-дюймовый емкостный сенсорный экран
Разрешение:
1024 x 600 пикселей
Постановка на охрану одним нажатием
Размеры:
8,9 дюйма x 5,7 дюйма x 0,95 дюйма
Обновления прошивки:
• В эфире
• USB
Связь
Подключается через Wi-Fi или точку доступа GC3
Установка
Простой в использовании монтажный шаблон
Крепится к стене или использует настольное крепление (2GIG-CP-DESK)
Мощность
100-240 В переменного тока 50/60 Гц 0.Адаптер 2A 5VDC
Перезаряжаемый резервный аккумулятор
Рабочая температура: от 0 ° C до 40 ° C, от 32 ° F до 104 ° F
н

Пожалуйста, посетите
2GIG.com
, или свяжитесь с вашим местным менеджером по продажам
.
P / N 10016148A
© 2017 Nortek Security & Control LLC. Все права защищены
1950 Camino Vida Roble, Suite 150 • Carlsbad CA 92008 • 760.438.7000 • 760.800.421.1587
nortekcontrol.com
2GIG-SP1-GC3
2GIG-SP2-GC3

Ferrari Monza SP1 и SP2: первые в новой концепции автомобилей ограниченной серии Icona

Ferrari Monza SP1 и SP2: первые в новой концепции автомобилей Icona ограниченной серии

Модели, вдохновленные спортивными автомобилями что вошло в историю

Париж, 2 октября 2018 г. — Ferrari Monza SP1 и SP2 являются предшественниками новой концепции, известной как Icona (Icon), которая использует лейтмотив самых ярких автомобилей в истории компании для создания нового сегмент специальных автомобилей ограниченной серии для клиентов и коллекционеров.Намерение состоит в том, чтобы использовать современную эстетику, чтобы переосмыслить вневременной стиль, с технологически продвинутыми компонентами и максимальной производительностью благодаря постоянным инновациям.

Ferrari Monza SP1 и SP2 вдохновлены барчеттами 1950-х годов, которые привели к победе в международном автоспорте не только официальными гонщиками заводских команд из Скудерии, но и легионом джентльменов-водителей, которые в те годы часто оказались рядом с легендарными профессиональными водителями той эпохи.

Первой Ferrari, называвшейся barchetta, была открытая версия модели 166 MM 1948 года выпуска. Название было придумано Джованни Аньелли, который, впервые увидев автомобиль на Туринском автосалоне в том году, заметил, что он меньше похож на автомобиль, а больше на баркетту, имея в виду итальянскую небольшую скоростную лодку. Barchetta 166 MM с кузовом Touring прочно вошла в историю Ferrari, выиграв сначала Mille Miglia, а затем изнурительные 24 часа Ле-Мана в 1949 году.За этой моделью последовали другие чрезвычайно успешные спортивные автомобили Ferrari, такие как 750 Monza и 860 Monza, которые послужили источником вдохновения для названия новых моделей.

Барчетты были похожи на пауков по форме (двухместные), но не имели крыши или погодного оборудования. Вместо полноразмерного ветрового стекла они были оснащены лишь небольшим экраном (одинарным или круговым) и съемным кожухом на стороне пассажира. Monza SP1 и SP2 похожи по концепции, хотя главное отличие состоит в том, что их можно заказать как одноместные, так и двухместные.

В результате получился автомобиль, который будто лепит ветер. Впечатляет чистота элементов стиля — эстетика футуристическая, но в то же время почтительная, но не ностальгическая дань уважения прошлому.

Энцо Феррари говорил: «Если есть душа, то у двигателей она есть». Душа этой модели, как и всех Ferrari, — в ее двигателе. Ferrari Monza SP1 и SP2 оснащены самым мощным атмосферным двигателем V12, когда-либо производимым Ferrari.Благодаря конкретным направлениям развития мощность 6,5-литрового двигателя 812 Superfast была увеличена на 10 cv до 810 cv при 8500 об / мин с небольшим увеличением крутящего момента до 719 Нм при 7000 об / мин.

Как и в гоночных автомобилях, в конструкции Monza SP1 и SP2 широко использовалось углеродное волокно, чтобы сделать их легкими и отзывчивыми, а также улучшить их спортивный и агрессивный внешний вид.

Поскольку это полностью открытые спортивные автомобили без ветрового стекла, одной из самых больших проблем было создание аэродинамического решения, которое обеспечило бы водителю удовольствие от работы автомобиля, не затрагивая проблемы, вызванные конфигурацией barchetta.Результатом стал запатентованный «Virtual Wind Shield», который встроен в обтекатель перед приборной панелью и рулевым колесом, обеспечивая исключительный комфорт вождения.

Дизайн:

Внешний вид

Гонки всегда сильно влияли на язык дизайна Ferrari, и Monza SP1 и SP2 связаны со славным прошлым марки невидимой связью. Их дизайн, по сути, воплощает в себе элегантность, производительность и инновации, которые являются неотъемлемой частью прошлого и настоящего Ferrari.

С точки зрения чистого творчества, соблазнительные образы баркетт Ferrari 1950-х годов, во многом напоминающие атмосферу сегодняшних гонок, были бесценным источником вдохновения.

Дизайнеры Ferrari Styling Centre придали концепции barchetta абсолютно современный оттенок благодаря новому и очень индивидуальному подходу к теме. Но здесь нет ностальгических отсылок, нет элементов, заимствованных непосредственно из прошлого. Monza SP1 и SP2 были разработаны как современные одноместные автомобили для нового поколения джентльменов-водителей.

Язык дизайна Monza SP1 и SP2 отчетливо виден в его элегантных формах и объеме профиля крыла полностью углеродного каркаса кузова, в его пропорциях, изысканных деталях, запасных линиях. Избегали крайних форм более экстремальных высокопроизводительных Ferrari. В данном случае дизайнеры Ferrari Styling Centre стремились сохранить настолько чистую форму, что ее можно было описать одним штрихом карандаша.

Гладкий, минималистичный силуэт автомобиля кажется почти парящим на изящном, но прочном скульптурном заднем диффузоре, который обнимает хвост, визуально переходя к тонкой, но четкой линии боковых сторон, а затем к основанию переднего бампера. .Этот эффект еще больше усиливается цветовым контрастом между черным углеродным волокном на порогах и остальной частью кузова, чрезвычайная легкость которого подчеркивается двумя элегантными корпусами, составляющими его.

Постмодернистская эстетика Monza SP1 и SP2 также очевидна в задней части, которая имеет мягкий извилистый вид, типичный для Ferrari 1950-х годов, компактный хвост и полные мускулистые формы.

Основная идея заключалась в том, чтобы разделить объем на две оболочки: верхнюю крышку и нижнюю часть корпуса.Эти два элемента создают диалог, но верхняя часть корпуса кажется почти парящей, эффект достигается за счет непрерывной полосы внутри канавки, которая окружает кабину и заканчивается над хвостом. Такое решение создает впечатление, что два тома разделены.

Это тема, которая появлялась на Ferrari в разные десятилетия, в том числе в 1980-х, но в этом случае также стала лейтмотивом, привносящим структуру в форму. Это позволяет задней части автомобиля быть одновременно прочной и легкой.

В данном случае интересно то, что он позволил представить новую концепцию задних фонарей: габаритные огни и стоп-сигналы были переработаны как единая непрерывная световая линия, органично интегрированная в узкий зазор между двумя корпусами. Это превращает задний фонарь в теоретическую линию, которая пересекает крылья и огибает капот, создавая впечатление, что верхняя часть корпуса буквально подвешена над остальной частью объема. Это очень современный подход к обработке задней части 750 Monza и 375 MM, который послужил источником вдохновения.

Эта культовая тема «линии света» проявляется также в фарах и боковых вентиляционных отверстиях, создавая фирменный эффект «голого».

Бока автомобилей абсолютно чистые, тугие и чистые, которые прерываются только визуально ярким боковым воздухозаборником, напоминающим старые барчетты.

Передняя часть автомобиля проста и лаконична: единственная гладкая, урезанная задняя поверхность, плавно объединяющая капот и извилистые крылья. Его формы — дань уважения фирменным элементам стиля Ferrari.Это фюзеляж, отходящий назад от мелкоячеистой решетки радиатора, которая подчеркивается трехмерной структурой под ней с двумя выступающими воздухозаборниками. Вся передняя часть автомобиля выглядит так, как будто она задрапирована, замаскирована и окутана обработкой поверхности.

Особое внимание было уделено дизайну компактных дверей, открывающихся вверх. Это потребовало реорганизации всего дверного узла 812 Superfast, но результаты были впечатляющими. Не менее важен цельный капот-крыло из углеродного волокна, которое откидывается спереди, чтобы продемонстрировать внушительный двигатель V12 в открытом состоянии.
Экстерьер дополняют великолепно скульптурные 21-дюймовые колеса с пятью спицами, которые были разработаны специально, чтобы дополнить минималистичные линии двух автомобилей.

Другой знаковой темой является, конечно же, ливрея, разработанная для Monza SP1, представленного на Парижском автосалоне. Он был вдохновлен геометрией и графикой ливрей исторических гоночных автомобилей Ferrari — 250 GTO, 250 Testa Rossa и многих других. В результате получилась полоса на капоте, подчеркивающая пропорции последнего и крыльев, с той же самой темой, повторенной на заднем упоре водительского обруча.

Интерьер

При разработке дизайна интерьера особое внимание уделялось кабине водителя. Эргономика была создана путем сосредоточения внимания на всем внутреннем содержимом, которое было переработано, чтобы соответствовать уникальному назначению автомобиля. Приборы, комбинация приборов и конструкция сиденья нуждались в функциональном переосмыслении, чтобы соответствовать новым требованиям водителя, с сохранением согласованности стилистического языка с экстерьером и основной философией дизайна.

Начиная с темы капли в виде очевидного кольца на крышке тонно, внутренняя архитектура разделяется на три уровня. Первый определяется визуальным горизонтом водителя. С этой точки зрения грань между интерьером и экстерьером автомобиля действительно очень тонкая. Тело водителя полностью закрыто автомобилем, за исключением его головы, которая выступает над линией горизонта, как в гоночных автомобилях, что снижает отвлекающие факторы любого рода.

Второй уровень включает приборы, рулевое колесо и вентиляционные отверстия.Наконец, запасная кабина на уровне подлокотников объединяет остальные команды, которые сгруппированы на одной очень простой поверхности, полностью лишенной какой-либо стилистической виртуозности.

Цельное сиденье из углеродного волокна обтянуто кожей и придает салону изысканный вид, как и некоторые другие участки кожаной обивки, которые тщательно расположены для обеспечения максимального комфорта при вождении.

Двигатель и коробка передач

Двигатель в Monza SP1 и SP2 является производным от двигателя 812 Superfast, с оптимизированной гидродинамикой во впускных каналах для обеспечения еще более высокой производительности.Двигатель V12, который был признан лучшим двигателем объемом более 4 литров и лучшим новым двигателем на церемонии вручения награды International Engine of the Year 2018, стал воплощением ряда инновационных решений. Среди них — система прямого впрыска под давлением 350 бар, впервые установленная на высокопроизводительном бензиновом двигателе, в сочетании с впускными трактами с изменяемой геометрией, концептуально заимствованными у атмосферных двигателей F1.

Система впрыска под высоким давлением приводит к улучшенному распылению впрыскиваемого топлива, что резко снижает количество твердых частиц, выбрасываемых на стадии разогрева катализатора, обеспечивая соответствие требованиям конкретного законодательства по выбросам.Особое внимание было также уделено калибровке стратегий производительности для повышения потенциала двигателя и ощущения чрезвычайной мощности, передаваемой автомобилем, при обеспечении того, чтобы водитель мог легко дозировать доступный огромный крутящий момент благодаря плавной, прогрессивной передаче мощности на всех оборотах двигателя.

Стратегии переключения передач трансмиссии с двойным сцеплением также повышают спортивность автомобиля. В более спортивных позициях Manettino время переключения на повышенную и понижающую передачу унаследовано от 812 Superfast, который имеет более быстрое и четкое переключение для более яркого впечатления от вождения.

Благодаря бескомпромиссной открытой конфигурации звук V12 становится еще более всеобъемлющим. Более заметный звук на впуске завораживает и абсолютно безошибочен. Водитель чувствует себя полностью погруженным в ни с чем не сравнимое впечатление, которое может доставить только автомобиль, наполненный ДНК Ferrari.

Динамика автомобиля

Что касается продольных и поперечных характеристик, архитектура автомобиля уникальна из-за полного отсутствия лобового стекла и крыши, что приводит к иной аэродинамике.В результате цель его продольных и поперечных характеристик заключалась в том, чтобы соответствовать и, если возможно, улучшить характеристики 812 Superfast.

В результате Monza SP1 и SP2 обладают превосходными характеристиками разгона (0-100 км / ч за 2,9 секунды и 0-200 за 7,9 секунды) и тормозными характеристиками (100-0 км / ч через 32 м). 812 Superfast и немного проигрывает в максимальной скорости (более 300 км / ч).

Для достижения поставленных целей концепция виртуальной короткой колесной базы, дебютировавшая на F12tdf, а затем также принятая на 812 Superfast, была сохранена, как и электрический усилитель рулевого управления (EPS).

Для более крупных 21-дюймовых кованых дисков требовались шины большего размера — 275/30 спереди и 315/30 сзади, а подвеска была немного жестче, чтобы улучшить ощущение маневренности и время отклика на команды.

В результате модель идеально сбалансирована без кренов для почти невообразимо чистой и бескомпромиссной управляемости спортивного автомобиля. Из-за отсутствия стоек лобового стекла водителю ничто не препятствует, и это позволяет ему преодолевать повороты со свободой, присущей автомобилю Формулы-1.Таким образом, водитель может получать удовольствие от ответных действий спортивного автомобиля на извилистых маршрутах: автомобиль всегда приятен, но никогда не бывает трудным в управлении.

Аэродинамика

Как и все Ferrari, дизайн Monza SP1 и SP2 был разработан с учетом аэродинамики, необходимой для полного погружения водителя в впечатляющие характеристики автомобиля.

Virtual Wind Shield был запатентован для этого автомобиля в ответ на необходимость позволить водителю наслаждаться им на высоких скоростях.Несмотря на то, что он остается за пределами поля зрения водителя, он обеспечивает максимальный комфорт вождения для barchetta как с точки зрения исторических образцов автомобилей, так и с точки зрения моделей с аналогичной архитектурой.

Концепция была сначала разработана виртуально с использованием углубленного моделирования CFD, а затем физически в аэродинамической трубе. Специально для аэродинамической трубы был построен полномасштабный макет, в котором наши водители-испытатели чередовались с манекенами, оснащенными датчиками давления (зонды граблей и киля). Из-за экстремального характера автомобиля поддержка тест-водителей и их опыт были жизненно важны как на начальном этапе определения цели, так и на заключительном этапе проверки всего пакета.С другой стороны, инструментальные манекены и вычисления дали нашим инженерам глубокое понимание аэродинамических явлений, которыми необходимо управлять, а также позволили нам увеличить критическую массу тестируемых решений.

При отсутствии ветрового стекла воздух, проходящий через капот, попадал бы в лицо водителя. Цель внедрения Virtual Wind Shield состояла в том, чтобы минимизировать негативное влияние воздушного потока, не ставя под угрозу волнующее ощущение скорости и контакта с дорогой, которые может доставить только такой автомобиль.

Virtual Wind Shield — это, по сути, аэродинамический проход под аэродинамическим экраном со стороны водителя, верхняя часть которого имеет форму крыла. Часть воздуха, проходящего через капот, попадает в воздухозаборник под аэродинамическим экраном, где он ускоряется и отклоняется вертикально перед приборной панелью. Этому способствует наличие держателя на самом аэродинамическом экране, который создает сильное всасывание, ускоряя тем самым воздух, выходящий из воздуховода под ветровым экраном. Это создает так называемый высокоэнергетический восходящий поток, который отклоняет поток над головой водителя, создавая низкоскоростной пузырь вокруг кабины.

Внутри канала Virtual Wind Shield находятся два расходящихся ограждения. Эти два ограждения создают колебания давления между центральным каналом и внешними каналами воздуховода, что сводит к минимуму колебания поля потока на внешнем крае низкоскоростного пузыря вокруг водителя. Это, в свою очередь, снижает аэродинамический шум и повышает общий комфорт, устраняя риск опасных колебаний поперечных аэродинамических сил вокруг головы водителя.

Одежда для водителя и сменного водителя

Чтобы передать ощущение непосредственной связи с историей, Ferrari в сотрудничестве с двумя передовыми компаниями класса люкс, Loro Piana и Berluti, создали выбор одежды и аксессуаров специально для Monza SP1 и Клиенты SP2.

Ferrari работала с Лоро Пиана над созданием предметов одежды, которые повышали уникальное удовольствие от вождения, которое доставляют эти два автомобиля. Одежда была вдохновлена ​​элегантными 1950-ми годами, когда Майк Хоторн всегда настаивал на том, чтобы водить машину в галстуке-бабочке, а Марзотто выигрывал Mille Miglia в двубортном костюме. Вдохновение прошлого привело к созданию удобной, но при этом разнообразной одежды.

Вдохновленный дизайном Ferrari Monza SP1 и SP2, комплект комбинезона для водителя, состоящий из брюк и куртки-бомбера, изготовлен из ткани «техно-шерсть стрейч», которая защищает водителя от непогоды, но обеспечивает полную свободу движений.Костюм надежно закрывается, обеспечивая полную защиту от ветра, но его также можно носить с открытыми лацканами на груди, мгновенно вызывая воображение сложной спортивной куртки. Для изготовления комбинезона водителя используется эксклюзивная сверхтонкая шерсть мериноса, но она была обработана Storm System®, чтобы сделать его водонепроницаемым и ветрозащитным, что идеально подходит для езды на высокой скорости.

Ferrari тесно сотрудничала с Loro Piana, создавая бесшовную, но бескомпромиссную интерпретацию текстиля как элементов стиля, так и цветов.Rosso Corsa представляет собой яркий контраст с темно-серым цветом, вдохновленным углеродным волокном, в то время как извилистые линии автомобилей отражаются также в фасоне одежды, перекрываясь и легко переходя через бомбер, свитер и брюки. Преимущественно диагональные мотивы являются спортивными и в значительной степени заимствованы из углеродного волокна.

Внутри куртки также есть очень характерный образец стиля Ferrari: двигатель и идентификационная табличка каждого автомобиля, персонализированные с номером автомобиля.Нашивка на поясе также может быть персонализирована с именем владельца или монограммой в качестве дополнительной персонализации.

Свитер изготовлен из отборной ультратонкой шерсти мериноса Wish® 15,5 микрон. Мягкий, легкий и теплый, он разработан, чтобы быть чрезвычайно удобным, не создавая лишней громоздкости под костюмом водителя. Высокий воротник застегивается на молнию для тепла, но она тщательно скрыта, чтобы линии оставались как можно более чистыми и аккуратными.

На случай дождя — кепка: традиционная элегантность в современной интерпретации с использованием водо- и ветроустойчивой технической шерсти с подкладкой из шерстяного пике.Кепка на резинке сзади обеспечивает идеальную и очень удобную посадку, которая никогда не кажется тесной.

Ассортимент одежды дополняют шарф из шерсти Wish® с диагональной структурой и контрастной кромкой, а также перчатки из невероятно мягкой кожи без подкладки с плонже для оптимального ощущения на рулевом колесе.

Ferrari также работала с Berluti, ведущим брендом роскошной обуви и изделий из кожи, над производством других уникальных и инновационных продуктов для владельцев Ferrari Monza SP1 и SP2.Шлем был разработан специально, чтобы обеспечить владельцам комфорт и безопасность, необходимые для автомобилей в стиле барчетта. Сделанный из углеродного волокна шлем мгновенно узнаваем благодаря кожаным вставкам, прошедшим безошибочную обработку Berluti, что делает его поистине эксклюзивным.

Для переноски шлема и одежды владельцы также получат две сумки Berluti, обе специально разработаны для этого культового автомобиля с четкими отсылками к цвету Ferrari Rosso Corsa и формам автомобилей.

Наконец, были разработаны специальные кроссовки Oxford на шнуровке. Доступный в цветах Graphite black или Brun, он сделан из кожи Venezia, имеет потайные шнурки и красную окантовку на пятке. Специальная подошва была разработана с использованием той же ткани из углеродного волокна, которую Ferrari использует для своих автомобилей.

7 лет обслуживания

Непревзойденные стандарты качества Ferrari и растущее внимание к обслуживанию клиентов лежат в основе расширенной семилетней программы технического обслуживания, которая также предлагается с Monza SP1 и SP2.Доступный для всего ассортимента, он покрывает все регулярное техническое обслуживание в течение первых семи лет эксплуатации автомобиля.

Программа планового технического обслуживания Ferrari — это эксклюзивная услуга, которая позволяет клиентам быть уверенными в том, что их автомобиль будет поддерживать максимальную производительность и безопасность на протяжении многих лет. Эта особая услуга также доступна владельцам подержанных Ferrari.

Регулярное техническое обслуживание (с интервалом 20 000 км или один раз в год без ограничений по пробегу), оригинальные запчасти и тщательные проверки персоналом, прошедшим обучение непосредственно в учебном центре Ferrari в Маранелло с использованием самых современных диагностических инструментов, — вот лишь некоторые из преимуществ Программа подлинного обслуживания.Услуга доступна на всех рынках мира и во всех дилерских центрах официальной дилерской сети.

Фотографии и видео доступны в Ferrari Media Center (www.media.ferrari.com)

Ferrari Monza SP2 и SP1: полная информация и обзор езды на ультраэксклюзивных V12s

Aston есть модели-продолжения, у Porsche есть Singer (своего рода), а теперь у Ferrari есть Icona, новая концепция автомобилей ограниченной серии, в которых используется богатое наследие компании.Первые плоды этого проекта — Monza SP1 и SP2.

Построенные на новом алюминиевом шасси, унаследованном от 812 Superfast, пара моделей Monza затем облачена в кузов из кевлара и углеродного волокна, в котором используются те же производственные технологии, что и команда Формулы-1 компании. Затем клиентам и покупателям предлагается выбрать желаемую конфигурацию — либо обычный двухместный автомобиль, либо более ориентированный на водителя одноместный вариант.

Goodwood hillclimb ride

Менее чем через год после того, как он был представлен миру, у нас есть возможность прокатиться на дробовике в двухместном варианте Ferrari Monza SP2 по знаменитой трассе для подъема на холм в Гудвуде.Хотя на бумаге они могут выглядеть очень похожими на 812 Superfast (плюс 10 л.с. и минус 50 кг), их действительно отличает то, что нельзя выразить в поле статистики.

Отличия видны с первого взгляда на машину; длинный капот с V12-коконом, подчеркнутый только полным отсутствием крыши или ветрового стекла, а также двойные опоры корпуса с обручем, расположенные позади водителя и пассажира, вдохновленные 750 и 860 Monzas 1950-х годов.

Название «Special Project» не является преувеличением, ведь если потянуть за кожаную петлю внутри и одновременно плавно подняться вверх, то получаются чрезвычайно легкие двери из углеродного волокна.В этом конкретном автомобиле (самый первый серийный SP2) потрясающие красные кожаные сиденья с четырехточечными ремнями безопасности идеально подходят для бега. Хотя сиденья на удивление удобны, плюшевые ковры и обтянутые кожей панели явно не входили в повестку дня Маранелло, поскольку на их месте LaFerrariesque — углеродистая изоляция.

Забираться и выходить не так уж и элегантно, но, несмотря на радикальный дизайн, SP2 — удивительно практичная машина. Поднимите заднюю крышку, и вы найдете достаточно большой багажник для трех шлемов и полностью загруженного рюкзака — вы даже получите USB-порты для зарядки как со стороны водителя, так и со стороны пассажира.Предсказуемо полезная ручка для переноски (которая может использоваться как держатель для бутылки с водой) также установлена ​​на центральном туннеле, а также есть держатель для карты, который, когда вы вспоминаете о Mille Miglia, не совсем режет его.

Выйдя из загона суперкаров и сквозь толпы зевак с камерами, мы отправляемся без крыши и ветрового стекла в специальный проект Ferrari стоимостью 1,5 миллиона фунтов стерлингов. Можно с уверенностью сказать, что эта машина не для интровертов…

Крышки Ferrari закрыты, и несколько раз после того, как дроссельная заслонка согревает шины, мы готовы к старту.Конечно, дым от шин является обязательным в начале любого подъема на холм в Гудвуде, но, несмотря на первоначальную преднамеренную потерю сцепления с дорогой, скорость пугающе быстро набирает обороты перед первым поворотом, и SP2, по-видимому, экспоненциально ускоряется с каждым движением правого весла.

> Обзор Ferrari 812 Superfast — большой, но блестящий, с потрясающим двигателем и коробкой передач

Точно нулевой нагрев передних шин можно собирать перед каждым заездом на Фестивале скорости, но благодаря системе управления всеми колесами на основе модели 812 SP2, кажется, почти разворачивается вокруг салона в первом повороте, прежде чем все 798 л.с. отбрасывают нас мимо Goodwood House на скорости чуть менее 130 миль в час.

Несмотря на то, что шлемы Ferrari, оснащенные специальными переговорными устройствами, издают разочаровывающее количество шума, пролетая мимо кремневой стены, я глупо улыбнулся благодаря великолепному звуку 6,5-литрового двигателя NA V12. С помощью всего лишь скольжения плексигласа, отделяющего пассажиров от капота, вы также получаете прекрасную дозу впускного звука, дополняющую тоны V12 сзади.

Кто-то может сказать, что ваши 1,5 миллиона фунтов стерлингов лучше потратить на 812 Superfast, и для многих людей, особенно в дождливой Англии, они, вероятно, будут правы.Однако они упускают возможность получить опыт, который максимально приблизит вас к одной из лучших электростанций, когда-либо созданных, и которую вы просто не найдете больше нигде.

> Щелкните здесь, чтобы просмотреть все одноразовые модели Ferrari

Подробности

И SP1, и SP2 приводятся в движение 6,5-литровым атмосферным двигателем V12 812, но с помощью регулируемых впускных каналов. и повторная калибровка ЭБУ. Мощность достигает 798 л.с. (увеличение на 10 л.с.), так что теперь это самый мощный двигатель V12, который производил Ferrari.Максимальный крутящий момент составляет 530 фунт-футов, что на 1 фунт-фут больше, чем у 812 Superfast; семиступенчатая коробка передач с двойным сцеплением и виртуальное рулевое управление четырьмя колесами сохранены.

При весе 1500 кг (сухой) для Monza SP1 (1520 кг для SP2) первый автомобиль Icona на 160 кг легче купе Superfast, на котором он основан. Кроме того, он на 25 мм шире. Карбоновый кузов на 15 процентов легче, чем у купе, и использует 20 квадратных метров легкого материала. Также представлен новый уникальный дизайн — более легкие 21-дюймовые кованые диски.

Что касается производительности, Ferrari разгоняется до 100 км / ч за 2,9 секунды и от 0 до 120 миль в час за 7,9 секунды, а максимальная скорость превышает 180 миль в час.

Дизайн Monza был основан на теории «одного росчерка карандаша», черпая вдохновение у своих исторических предшественников, но с особым упором на эти старые модели и превращая их в своего рода стилизацию в стиле ретро.

Для изготовления кузова Monza потребовалась уникальная светодиодная фара, которая вписывалась в новый цельный капот с передними шарнирами.Также появилась новая задняя световая планка во всю ширину. Отсутствие крыши также потребовало проектирования и разработки «виртуального ветрового стекла», расположенного перед кабиной, предназначенного для отклонения воздушного потока от водителя.

Доступ в обшитый карбоном интерьер Monza осуществляется через пару небольших двугранных дверей, и независимо от того, выберете ли вы одноместную или двухместную компоновку, карбоновая распорка разделяет кабину пополам. Намерение состояло в том, чтобы спроектировать интерьер, максимально приближенный к ощущениям от вождения F1, но при этом его можно было бы использовать на дороге.

Ferrari Monza Технические характеристики | Monza SP1 и SP2

Когда Ferrari объявила о выпуске новых автомобилей к 2022 году, энтузиасты из Чикаго знали, что ожидать чего-то особенного. Этим «чем-то особенным» была линия Icona: современная интерпретация культовых моделей Ferrari, начиная с Monza SP1 и Monza SP2. Хотя ключевое различие между SP1 и SP2 заключается в дизайне, оно также влияет на вес автомобиля и на то, как вы будете воспринимать характеристики Ferrari Monza.

Двигатель Ferrari Monza

Безнаддувный двигатель V12 объемом 6,5 л на базе 812 Superfast оснащен Ferrari Monza. Хотя двигатель Monza вдохновлен 812 Superfast, он был обновлен и привнес в него улучшение технических характеристик.

  • Мощность: 809 л.с.
  • Крутящий момент: 530 фунт-фут
  • Максимальная скорость: 186 миль / ч
  • Время разгона: 0 — 62 миль / ч за 2,9 секунды

Больше, чем просто цифры, двигатель Ferrari Monza — это произведение искусства и продолжение наследия Ferrari, которое было до него.Особое внимание было уделено калибровке его стратегий производительности, что привело к плавной, прогрессивной подаче мощности на всех оборотах двигателя.

Вы также заметите более полный звук двигателя, который подкупает и поистине уникален; его нельзя спутать с другим автомобилем, даже с другим Ferrari.

Monza SP1 против Monza SP2

Технические характеристики Ferrari Monza одинаковы, независимо от того, водите ли вы одноместную модель или SP2, но это не означает, что впечатления от вождения одинаковы.Водитель, особенно настроенный на свой автомобиль, может заметить разницу в управляемости, которая связана с уменьшением веса SP1 — , снятие второго сиденья сбрасывает около 50 фунтов .

Конечно, многие гонщики из Чикаго, присматривающиеся к Monza SP1, мечтают подражать гонщикам 50-х годов в одноместном дизайне, контролируя мощность, о которой они могли только мечтать. И преимущество Monza SP2 в том, что вы можете взять кого-нибудь с собой в поездку.

Monza SP1 объединяет водителя и автомобиль, и никто не отвлекает его от процесса вождения, в то время как SP2 воплощает в себе дизайн с двумя кабинами Ferrari, предоставляя пассажирам лучшее, что можно сделать за рулем Monza.

Узнайте больше с Ferrari Lake Forest

Ferrari Monza SP1 и SP2 — это модели с ограниченным тиражом, всего выпущено 499 автомобилей. Если вы заинтересованы, свяжитесь с Ferrari Lake Forest прямо сейчас, чтобы сообщить нам об этом.

Ещё от Ferrari Lake Forest

  • Раздача багажа Ferrari от Ferrari Lake Forest

    Ferrari Lake Forest раздает чемодан Ferrari из высококачественной итальянской кожи (стоимостью 3700 долларов) и предлагает VIP-тур (с мерами предосторожности COVID) по нашему выставочному залу одному счастливчику.Как войти Как этот пост Подпишитесь на @ferrarilakeforest в Instagram. Поделитесь этим постом в своей истории IG, используя #FLFgiveaway Отметьте не менее 5 друзей. Убедитесь, что все 5 друзей…

    Подробнее

  • Ferrari 812 Specs

    Дебют 812 Superfast посрамил многие так называемые высокопроизводительные автомобили и привлек внимание суперкаров, а выпуск кабриолета 812 GTS подарил фанатам Чикаго острые ощущения в 800 л.с. В то время как такие автомобили, как SF90 Stradale с тех пор показали несколько превосходных показателей, спецификации 812 Superfast по-прежнему…

    Подробнее

  • Где делают Феррари?

    Сборка каждого нового Ferrari занимает три месяца, от литья двигателя до последних штрихов, прежде чем он прибудет в Ferrari Lake Forest для пилотов из Чикаго.Известный своим наследием, мощью и элегантностью, неудивительно, что ваш новый Ferrari производится в том же месте, что и все Ferrari…

    Подробнее

  • Спецификации Ferrari 488: GTB, Spider, Pista и Pista Spider

    Спецификации Ferrari 488 доказывают, что это была новая запись в наследии Ferrari, и выбираете ли вы Ferrari 488 GTB (вверху), Spider, Pista или Pista Spider, у вас будут ключи от одного из лучших автомобилей в мире. Ознакомьтесь со спецификациями каждой модели Ferrari 488 ниже, а затем свяжитесь с нами, если есть…

    Подробнее

  • Характеристики Ferrari Roma: характеристики соответствуют стилю

    Технические характеристики Ferrari Roma помогают возвысить его над другими автомобилями, в то же время объединяя классический стиль Ferrari Roma, который был до него, чтобы создать поистине уникальный автомобиль для современного мира.Названный в честь столицы Италии, цыгане достойно царствуют, но при этом остаются доступными. Разработанный с учетом элегантности и простоты,…

    Подробнее

  • Производительность Ferrari Monza SP1 и SP2

    Когда Ferrari объявила о выпуске новых автомобилей к 2022 году, энтузиасты из Чикаго знали, что ожидать чего-то особенного. Этим «чем-то особенным» была линия Icona: современная интерпретация культовых моделей Ferrari, начиная с Monza SP1 и Monza SP2. Хотя ключевое различие между SP1 и SP2 заключается в дизайне, оно также влияет на…

    Подробнее

  • Дизайн и особенности интерьера Ferrari F8 Tributo

    С момента своего дебюта на Женевском автосалоне в 2019 году производительность Ferrari F8 Tributo привлекла к себе наибольшее внимание — и это вполне понятно.В то время как максимальная скорость 211 миль в час, его 720-сильный твин-турбо V8 действительно впечатляет. Интерьер Ferrari F8 Tributo спроектирован так, чтобы вы, водитель, могли испытать эти острые ощущения так же чисто, как…

    Подробнее

  • Дизайн и особенности интерьера Ferrari Roma

    Новое купе Ferrari 2+ с центральным расположением двигателя и передним расположением двигателя отличается изысканными пропорциями и вневременным дизайном, который обязательно привлечет внимание в Чикаго. Хотя это очевидно, если взглянуть на автомобиль, но если вы окажетесь внутри кабины и воочию познакомитесь с интерьером Ferrari Roma, это доказывает, что он вне времени от кончика до хвоста, внутри и снаружи.Связаться с нами Узнать больше Roma…

    Подробнее

  • Насколько быстро Феррари? Время разгона до 60 миль в час и максимальная скорость

    От самого первого Ferrari до современной линейки автомобилей будущего, водители очарованы мощностью и возможностями — и их первый вопрос обычно — «насколько быстро Ferrari?» Мы знаем, что автомобиль — это нечто большее, чем его скорость, но мы также знаем, что немногие автомобили могут сравниться с собранными вручную Ferrari…

    Подробнее

  • Ferrari F8 Tributo Performance

    Спецификации Ferrari F8 Tributo, разработанные для того, чтобы стать головокружительным спортивным автомобилем и зверем на трассе, дают понять, что гонщики из Чикаго действительно могут получить все это, если они выберут Ferrari.Даже обычное вождение по шоссе вызывает дополнительные ощущения, когда вы за рулем Ferrari F8 Tributo, управляя…

    Подробнее

Sp1 и Sp3 являются индуцируемыми окислительным стрессом факторами транскрипции против смерти в корковых нейронах

Abstract

Гибель нейрональных клеток в ответ на окислительный стресс может отражать отказ эндогенных адаптивных механизмов. Однако активаторы транскрипции, индуцируемые окислительным стрессом в нейронах, которые запускают адаптивные генетические ответы, еще предстоит полностью выяснить.Мы сообщаем, что базальное связывание ДНК факторов транскрипции цинкового пальца Sp1 и Sp3 неожиданно низко в кортикальных нейронах in vitro и в значительной степени индуцируется окислительным стрессом, вызванным истощением глутатиона или индуцированным перекисью водорода в этих клетках. Увеличение связывания Sp1 / Sp3 ДНК частично отражает повышенные уровни белка Sp1 и Sp3 в ядрах кортикальных нейронов. Подобная индукция белка Sp1 и Sp3 также наблюдается в нейронах in vivo в химической или генетической модели болезни Хантингтона, двух моделях грызунов, в которых потеря нейронов объясняется окислительным стрессом.Устойчивая высокоуровневая экспрессия полноразмерного Sp1 или полноразмерного Sp3, но не только ДНК-связывающего домена цинкового пальца Sp1, предотвращает смерть в ответ на окислительный стресс, повреждение ДНК или и то, и другое. Взятые вместе, эти результаты устанавливают Sp1 и Sp3 как индуцированные окислительным стрессом факторы транскрипции в корковых нейронах, которые положительно регулируют выживание нейронов.

Введение

Окислительное повреждение белков, липидов или ДНК увеличивается в моделях аутопсийной ткани человека и грызунах множества нейродегенеративных состояний, включая болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, атаксию Фридрейха, болезнь Хантингтона (HD), рассеянный склероз и инсульт (обзор см. в Sagara et al., 1998; Этвуд и др., 1999; Браун и др., 1999; Castagne et al., 1999; Эстевез и др., 1999; Флойд, 1999; Mattson et al., 1999; Ratan, 1999, Albers and Beal, 2000). Повреждение свободными радикалами компонентов клетки при болезненных состояниях может отражать отказ эндогенных компенсаторных механизмов окислительного стресса. Эти компенсаторные механизмы включают ферменты, участвующие в детоксикации активных форм кислорода (АФК) и восстановлении окислительных повреждений ДНК и белков. Следовательно, дальнейшее понимание природы и регуляции компенсаторных реакций на окислительный стресс может дать новое понимание патогенеза, а также терапии неврологических заболеваний.

Адаптивные ответы на окислительный стресс наиболее четко определены в прокариотических системах (Mongkolsuk and Helmann, 2002). Бактерии реагируют на токсические уровни АФК увеличением экспрессии антиоксидантных и репаративных генов. Изменения экспрессии генов, опосредованные АФК, координируются факторами транскрипции. У прокариот эти факторы транскрипции прямо и временно модифицируются окислителями. Например, изменения в окислительно-восстановительном состоянии одного фактора транскрипции (OxyR) приводят к усилению взаимодействия этого фактора с базальным аппаратом транскрипции и повышенной экспрессии генов, участвующих в детоксикации (Zheng and Storz, 2000).Напротив, окисление резистентности к органическому гидропероксиду фактора транскрипции (OhR) приводит к окислению одного остатка цистеина (Cys-15) и потере связывания с ДНК. Потеря связывания с ДНК OhR приводит к дерепрессии генов, участвующих в детоксикации (Fuangthong and Helmann, 2002).

Хотя было установлено, что эукариотические клетки, включая нейроны, также используют факторы транскрипции для ответа на АФК и активации защитных реакций (Lezoualc’h and Behl, 1998; Post et al., 1998; Биджур и др., 1999; Scortegagna et al., 1999), наше понимание природы этих белков и способов их активации в нейронах ограничено. Первичные культуры кортикальных нейронов представляют собой удобный препарат in vitro для исследования факторов транскрипции, которые индуцируются окислительным стрессом (Murphy et al., 1989, 1990). В начале своего развития в культуре нейроны коры головного мозга, постоянно подвергающиеся воздействию глутамата, погибают по механизму, независимому от ионотропных рецепторов глутамата.Дегенерация происходит вслед за истощением глутатиона, важного антиоксиданта. Гибель клеток, связанная с истощением глутатиона, может быть полностью предотвращена с помощью множества классических антиоксидантов (Murphy et al., 1990) и имеет много признаков апоптоза (Ratan et al., 1994b; Tan et al., 1998; Zaman et al., 1999).

Здесь мы используем эту модель in vitro для изучения роли семейства факторов транскрипции Sp1 в вызванной окислительным стрессом гибели клеток в нейронах. Sp1 является членом расширенного семейства ДНК-связывающих белков, которые имеют три мотива «цинковые пальцы» и связываются с ДНК, богатой гуанозином и цитозином (Briggs et al., 1986; Lania et al., 1997; Suske, 1999; Ян и др., 2000). В это семейство входят члены, гомологичные Sp1, такие как Sp2 – Sp4. Было показано, что активность Sp1 изменяется в ответ на стимулы, вызывающие апоптоз. Например, индукция апоптоза в B-клетках после обработки анти-IgM связана с каспазозависимым расщеплением Sp1 (Rickers et al., 1999). Сходным образом апоптотические ретиноиды индуцируют каспазозависимое расщепление Sp1 в Т-клетках (Piedrafita and Pfahl, 1997). Действительно, экспансия полиглутамина в белке хантингтина может индуцировать нейрональную токсичность, частично, за счет секвестрации Sp1 и одного из его коактиваторов, TATA-связывающего белка-ассоциированного фактора (TAF) II130, что указывает на роль Sp1 в выживании нейронов (Dunah et al., 2002; Ли и др., 2002). Примечательно, что Sp1, как было показано, регулирует белки выживания [например, ингибитор апоптоза (IAP), сурвивин (Li and Altieri, 1999) и супероксиддисмутазу марганца (Tanaka et al., 2000)], а также белки продит. [например, лиганд Fas (Xiao et al., 1999; Chou et al., 2000) и 12-липоксигеназа (Liu et al., 1997)]. Как и другие факторы транскрипции, роль Sp1 в регуляции гибели клеток может зависеть от ряда факторов, таких как тип клетки и стимул смерти (Lin et al., 1998).

Здесь мы демонстрируем, что окислительный стресс значительно индуцирует уровни белков Sp1 и Sp3 и связывание ДНК в нейронах in vitro и in vivo . Более того, мы демонстрируем, что принудительная экспрессия Sp1 или Sp3 является нейропротекторной. Эти данные подтверждают, что Sp1 и Sp3 являются окислительно-восстановительными активаторами транскрипции, которые увеличивают выживаемость корковых нейронов.

Материалы и методы

Первичная культура нейронов. Клеточные культуры получали из коры головного мозга крыс Sprague Dawley (17 день беременности), как описано ранее (Murphy et al., 1990). Все эксперименты начинали через 24–72 часа после посева. В этих условиях клетки не подвержены эксайтотоксичности, опосредованной глутаматом. Для исследований цитотоксичности клетки промывали теплым PBS, а затем помещали в минимальную необходимую среду (MEM; Invitrogen, Gaithersburg, MD) с 5,5 г / л глюкозы, 10% FCS, 2 ммл-глутамина и 100 мкмцистина, содержащего аналог глутамата. гомоцистеат (HCA; 1 мм). HCA разбавляли 100-кратно концентрированными растворами, pH которых был доведен до 7,5.

Экспрессия Sp1 и Sp3 в мышиной модели HD. Самцы трансгенных мышей HD линии R6 / 2 были первоначально получены из лаборатории Джексона (Бар-Харбор, штат Мэн). В данном исследовании использовались самцы мышей R6 / 2 и контрольные мыши из однопометных однопометников дикого типа из центра по делам ветеранов Бедфорда и были скрещены с самками их фоновой линии (B6CBAFI / J). 3-Нитропропионовую кислоту (3-NP; Sigma, Сент-Луис, Миссури) растворяли в PBS, pH доводили до 7,4 и вводили внутрибрюшинно девять раз с 12-часовыми интервалами, используя 50 мг / кг на инъекцию контрольным мышам дикого типа. .Мышей умерщвляли через 3-5 часов после последней инъекции 3-NP. Мышей, обработанных R6 / 2 и 3-NP, подвергали глубокой анестезии и транскардиально перфузировали 4% -ным буферным параформальдегидом (PFA) и обрабатывали для гистопатологической оценки. Криозащищенный глицерином мозг делали замороженными срезами на 50 мкм и иммуноокрашивали антителами Sp1 и Sp3 (разведение 1: 500; Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния) с использованием ранее описанного метода конъюгированных вторых антител (Ferrante et al., 2002).

Создание векторов рекомбинантного вируса простого герпеса. Sp1, Sp3 и ДНК-связывающий домен цинкового пальца человека Sp1 по отдельности были помечены N-концевым эпитопом FLAG и были индивидуально субклонированы в векторы вируса простого герпеса (HSV) с дефектом репликации (pHSVPrpUC), как описано ранее (Neve and Geller , 1999). Кортикальные нейроны (1 день in vitro ) инфицировали рекомбинантным HSV через 1 день после посева. Множественность инфекции (MOI), равная 2, использовалась, потому что эта MOI привела к трансдукции 20-25% нейронов в чашке без цитотоксичности, измеренной с помощью восстановления MTT, фазово-контрастной микроскопии или 4 ‘, 6’-диамидино- Окрашивание 2-фенилиндолом (DAPI).Нейроны инфицировали в бессывороточной среде в течение 3–6 часов; среда была удалена; и добавляли стандартную культуральную среду, содержащую сыворотку. В параллельных культурах клетки обрабатывали в присутствии и в отсутствие аналога глутамата, и через 14–18 часов их фиксировали 4% PFA для подготовки к иммуноцитохимии, окрашиванию DAPI и опосредованному дезоксинуклеотидилтрансферазой биотинилированному ник-концу UTP. (ТУНЕЛЬ).

Обнаружение повреждений и смерти клеток. Ядерную фрагментацию оценивали путем окрашивания ядерной ДНК с использованием DAPI.Нейрональные клетки промывали PBS. Клетки фиксировали в 4% PFA в PBS в течение 10 мин при комнатной температуре. Клетки промывали PBS и окрашивали DAPI в течение 15 мин при комнатной температуре. Более 300 клеток на предметное стекло оценивали на частоту фрагментации ядер с помощью флуоресцентного микроскопа. Клетки с двумя или более фрагментами хроматина или сморщенными конденсированными ядрами считались апоптозными.

In situ Обнаружение фрагментации ядерной ДНК с помощью TUNEL. Образцы регидратировали в соответствии со стандартным протоколом и инкубировали с протеиназой К (Roche Diagnostics, Mannheim, Германия; 20 г / мл) в течение 15 минут при комнатной температуре с промежуточными промываниями в PBS.Реакционную смесь TUNEL готовили добавлением 5 мкл концевой дезоксинуклеотидилтрансферазы к 45 мкл смеси нуклеотидов, меченных флуоресцеином на секцию. После промывания PBS реакционную смесь TUNEL наносили на каждый срез, накрывали покровным стеклом и инкубировали во влажной камере в течение 60 мин при 37 ° C. В контрольных срезах терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза была исключена.

Популяционные измерения жизнеспособности нейрональных клеток измеряли с использованием нерадиоактивного набора для анализа CellTiter 96 (Promega, Madison, WI).Раствор тетразолиевого красителя добавляли к кортикальным нейронам через 16–24 ч после обработки различными реагентами. Клетки инкубировали при 37 ° C в течение 4 часов и добавляли раствор для солюбилизации / остановки. Планшеты с клетками оставляли на ночь во влажной атмосфере и оптическую плотность измеряли при 570 нм, используя настраиваемый 96-луночный ридер для планшетов Molecular Devices (Menlo Park, Калифорния).

Иммуноблот-анализ. Клеточные лизаты получали промыванием кортикальных нейронов холодным PBS и добавлением 100 мМ Трис-буфера, pH 7.4, содержащий 1% Triton X-100, 150 мМ NaCl, 1 мМ ортованадата натрия, 5 мМ фторида натрия, 3 мМ PMSF, 3 мМ DTT, 0,5 мкг / мл лейпептина и 10 мкг / мл апротинина. Тридцать микрограммов белка из клеточных лизатов кипятили в буфере Лэммли и 5 мг белка подвергали электрофорезу в восстанавливающих условиях на 8% полиакриламидных гелях. Затем белки переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Bio-Rad, Hercules, CA). Неспецифическое связывание ингибировалось инкубацией в трис-буферном физиологическом растворе (TBST; 50 мМ Трис HCl, pH 8.0, 0,9% NaCl и 0,1% Твина 20), содержащего 5% обезжиренного сухого молока, в течение 0,5 часа. Первичные антитела против Sp1 (PEP2), Sp2 (K-20), Sp3 (D-20) или Sp4 (V-20) (все от Santa Cruz Biotechnology) разводили 1: 1000 в TBST с 1% молоком и подвергали воздействию к мембранам в течение ночи при 4 ° C. Иммунореактивные белки определяли в соответствии с протоколом усиленной хемилюминесценции (Amersham Biosciences, Arlington Heights, IL).

Иммунофлуоресцентное окрашивание. Методы непрямого мечения были использованы для определения уровней эндогенных или гетерологичных Sp1 – Sp3 и β-галактозидазы в культурах корковых нейронов.Диссоциированные клетки коры головного мозга (3-5 × 10 5 ) высевали на покрытые поли-d-лизином восьмилуночные культуральные слайды (Becton Dickinson Labware, Бедфорд, Массачусетс) и обрабатывали HCA, как описано выше для 4– 5 ч. Клетки промывали теплым PBS и фиксировали при комнатной температуре в течение 15 мин с 4% PFA. После промывания PBS фиксированные клетки инкубировали с блокирующим раствором, содержащим 0,3% Triton X-100, 5% BSA и 3% козьей сыворотки, в течение 1 часа с последующей инкубацией с кроличьими антителами Sp1 (разведение 1: 500), кроличьими анти- Поликлональные антитела Sp2 (1: 500) или кроличьи поликлональные антитела против Sp3 (разведение 1: 500).После трех промывок PBS клетки инкубировали в течение 1 часа с FITC-конъюгированными козьими антителами против кроличьего IgG (разведение 1: 200) и DAPI. Все антитела разводили в PBS. Предметные стекла трижды промывали PBS и закрепляли раствором флуорохромов (Vector Laboratories, Burlingame, CA). Изображения анализировали под флуоресцентным микроскопом (модель AX70TRF; Olympus Optical, Токио, Япония). Контрольные эксперименты проводили в отсутствие первичного антитела.

Анализ сдвига электрофоретической подвижности и анализ сверхсмещения. Мы провели анализ сдвига электрофоретической подвижности (EMSA) на ядерных экстрактах из кортикальных нейронов с использованием 32 Р-меченного олигонуклеотида, содержащего сайт связывания дикого типа (wt) или мутантный Sp1 (Santa Cruz Biotechnology). Последовательности смысловой цепи двухцепочечных олигонуклеотидов дикого типа и мутантных олигонуклеотидов представляют собой 5′-ATTCGATCGGGGCGGGGCGAGC-3 ‘и 5′-ATTCGATCGGTTCGGGGCGAGC-3′ соответственно. Параллельные EMSA проводили с использованием радиоактивно меченного Oct-1 (5’-TGTCGAATGCAAATGACTAGAA-3 ‘; Santa Cruz Biotechnology) сайта связывания.Эмбриональные нейроны коры слегка обрабатывали трипсином, гранулировали и ресуспендировали в холодном PBS. Все последующие этапы выполнялись при 4 ° C, как описано ранее (Lin et al., 1995, Chatterjee et al., 2001). Чтобы оценить влияние различных агентов на связывание Sp1 и Sp3 ДНК, мы добавляли мезилат дефероксамина (10 мкМ), оксидазу d-аминокислоты (1–5 мЕ из красных дрожжей) и d-аланин (20 мкМ).

Анализ активности промотора. Кортикальных нейронов высевали на 24-луночные планшеты для культивирования (Nunc, Naperville, IL).На следующий день смесь для трансфекции готовили путем добавления 1,5 мкг репортерного вектора экспрессии (pSp1-Luc и pmtSp1-Luc, плазмида люциферазы светлячка) в 150 мкл DMEM с комбинацией цитомегаловируса pRL или вектора тимидинкиназы (1 мкг, содержащий ген люциферазы Renilla) (Hsiao et al., 1997). Через двадцать минут после добавления реагента DMRIE-C (6 мкл; Invitrogen) смесь для трансфекции объединяли с 1,0 мл свежей среды и помещали на клетки в 24-луночные планшеты. Клетки инкубировали в течение 24 часов, а затем клетки инфицировали HSV-Flag-Sp1, HSV-Sp3 или HSV-Sp1-ZnF (цинковый палец) с или без HCA.На следующий день клетки промывали PBS, а затем лизировали буфером для анализа люциферазы (Promega). Клеточные частицы удаляли микроцентрифугированием, и концентрацию белка измеряли с использованием набора для анализа белка (Bio-Rad). Двадцать микролитров лизата использовали для измерения люциферазы светлячка и Renilla. Активность люциферазы Firefly и Renilla измеряли с использованием системы анализа двойной люциферазы-репортера (Promega) и люминометра TD-20/20. Значения люциферазы светлячков стандартизировали до значений Renilla или общей концентрации белка.

Результаты

Окислительный стресс индуцирует активность связывания элементов ответа Sp1 в культурах нейронов коры

Чтобы определить влияние окислительного стресса, вызванного истощением глутатиона, на связывание ДНК Sp1 в кортикальных нейронах, мы выполнили EMSA на ядерных экстрактах из контрольных клеток или клеток обработанные аналогом глутамата HCA с использованием радиоактивно меченного олигонуклеотида, содержащего консенсусный сайт связывания ДНК Sp1. Пять часов лечения HCA, что приводит к снижению уровня глутатиона на 70% по сравнению с контролем (Zaman et al., 1999), значительно увеличили три ДНК-связывающих активности в корковых нейронах (Fig.1 A ; три ДНК-связывающих активности обозначены a – c ). Индукция этих ДНК-связывающих активностей, по-видимому, связана с истощением глутатиона, поскольку они также наблюдались в присутствии бутионинсуфлоксимина (100 мкм), агента, который истощает глутатион [до <10% от контрольных уровней (Ratan et al., 1994a)] путем ингибирования одного из ферментов, участвующих в его синтезе, а не путем ингибирования поглощения его ограничивающего скорость предшественника аминокислоты (данные не показаны).Все три ДНК-связывающие активности ингибировались зависимым от концентрации холодным олигонуклеотидом Sp1, и ни одна из них не ингибировалась олигонуклеотидом, содержащим мутации в сайте связывания Sp1 (данные не показаны). Повышенное связывание ДНК можно было наблюдать уже через 2 часа после обработки HCA (рис. 1 C ), в то время, когда уровни глутатиона составляют 50% от уровней в искусственно обработанных культурах, что дает достаточно времени для экспрессии генов до гибели клетки обязательство (~ 12 часов после лечения ГКА).

Рис. 1.

Окислительный стресс, вызванный истощением глутатиона, индуцирует ДНК-связывающую активность Sp1 и Sp3 в корковых нейронах. A, EMSA, выполняемая с увеличивающимся количеством белка из ядерных экстрактов (NE) из контрольных (дорожки 1, 3, 5) и нейронов, обработанных HCA (аналог глутамата) (дорожки 2, 4, 6), через 4 часа после начало лечения ГКА. Три ДНК-связывающие активности, индуцированные окислительным стрессом, обозначены a – c . B, Идентификация Sp1 в комплексе a и Sp3 в комплексах b и c методом суперсдвигающего анализа с использованием субъединичных антител к Sp1 – Sp4. C, Динамика индукции ДНК-связывающей активности Sp1 и Sp3 после обработки HCA (1 мм). D, Влияние индуцированного HCA истощения глутатиона на ДНК-связывающую активность Oct-1 показано через 4 часа после начала лечения HCA. Показаны эффекты увеличения концентраций HCA на уровни ядерных белков Sp1 ( E ) и Sp3 ( F ) через 4–5 часов после начала лечения HCA. G, Динамика изменений ядерных уровней Sp1 и Sp3 после начала лечения ГКА.Примеры представляют от трех до пяти независимых экспериментов.

Идентификация Sp1 и Sp3 в ядерных экстрактах кортикальных нейронов после обработки аналогом глутамата HCA

Чтобы определить, присутствует ли Sp1 в каком-либо из ДНК-белковых комплексов, индуцированных HCA, обнаруженных с помощью EMSA, мы использовали антитела, специфичные для Sp1 –Sp4 субъединицы. Sp2-Sp4 имеют обширную гомологию последовательностей с Sp1, и каждый из этих членов семейства Sp специфически связывается с ДНК. Добавление индивидуальных субъединичных антител во время связывания ДНК in vitro с показало, что Sp1 содержится в самом медленном мигрирующем комплексе (рис.1 В ). Этот комплекс не содержал других членов семейства Sp, включая Sp2 – Sp4.

В дополнение к Sp1-содержащему комплексу, два быстро мигрирующих комплекса были также индуцированы HCA-индуцированным истощением глутатиона. Эти комплексы были суперсмещены субъединично-специфическим антителом к ​​Sp3, и на них не влияли антитела Sp1, Sp2 и Sp4. Взятые вместе, эти результаты предполагают, что один Sp1-содержащий комплекс и два Sp3-содержащих комплекса индуцируются истощением глутатиона в корковых нейронах.Различия между ядерной активностью ДНК Sp1 и Sp3 в контрольных и обработанных HCA корковых нейронах нельзя объяснить глобальными различиями в ядерных белках, поскольку уровни связывания ДНК Oct-1 были одинаковыми при использовании 0,5 мкг этих двух экстрактов (рис. 1 ). D ).

Повышенная ДНК-связывающая активность Sp1 и Sp3 в ответ на окислительный стресс частично является результатом повышенных уровней белка Sp1 и Sp3

Предыдущие исследования установили, что связывание ДНК членов семейства Sp с их родственной последовательностью может быть усилено повышение уровня белка Sp1 (Mortensen et al., 1997) или посттранскрипционные модификации белка, такие как фосфорилирование (Rohlff et al., 1997) или дефосфорилирование (Leggett et al., 1995). Чтобы определить, вызывает ли индуцированный ГКА окислительный стресс изменения уровней Sp1 и Sp3, мы провели иммуноблот-анализ. Мы обнаружили, что HCA приводит к увеличению уровней белка Sp1 и Sp3 (рис. 1 E ). Пяти миллимолярная ГКА приводит к более быстрой депривации цистина и истощению глутатиона через 5 часов, чем 1 мм ГКА (Ratan et al., 1994a).Как и ожидалось из этих наблюдений, обработка кортикальных нейронов 5 мм ГКА в течение 5 часов индуцировала более высокие уровни белков Sp1 (Фиг.1 E ) и Sp3 (Фиг.1 F ), чем 1 мм ГКА. Кроличьи поликлональные антитела Sp1 выявляли доминантную полосу при 95 кДа и минорную полосу при 105 кДа. Эта более медленно мигрирующая полоса при 105 кДа, вероятно, отражает фосфорилирование полипептида Sp1 95 кДа, поскольку полоса 95 кДа полностью исчезла в присутствии ингибитора фосфатазы, каликулина А (Ryu et al.) (наши неопубликованные наблюдения). Кроличьи поликлональные антитела Sp3 выявляли доминантную полосу 115 кДа, соответствующую Sp3, ранее идентифицированную как иммунохимическими, так и молекулярно-генетическими методами (Kennett et al., 1997). Небольшая, быстрее мигрирующая полоса наблюдалась при 78-80 кДа, разновидности Sp3, которая, как было показано, является результатом внутренней инициации трансляции внутри мРНК Sp3 (Kennett et al., 1997). Повышение содержания белков Sp1 и Sp3 наблюдалось уже через 1 час после обработки HCA и было максимальным через 5 часов (рис.1 G ), и можно было наблюдать его возвращение к исходным уровням через 8 часов после лечения ГКА (результаты не показаны).

Окислительный стресс, вызванный истощением глутатиона, индуцирует уровни Sp1 и Sp3 в ядрах кортикальных нейронов

Чтобы проверить, что белки Sp1 и Sp3 могут индуцироваться в ядрах нейронов за счет HCA-индуцированного истощения глутатиона, мы провели иммуноцитохимическое окрашивание антителами к Sp1 (рис.2 a, d ), Sp2 (рис.2 g, j ) и Sp3 (рис.2 m, p ), используя во всех случаях вторичные антитела, меченные FITC, которые флуоресцируют зеленым цветом. Параллельно те же культуры обрабатывали ядерным красителем DAPI, который флуоресцирует синим цветом (Molecular Probes, Eugene, OR) (фиг.2 b, e, h, i, n, o ). Когда изображения флуоресценции антител Sp1, Sp2 и Sp3 были наложены на изображения флуоресценции DAPI, было обнаружено, что большинство клеток, подвергшихся окислительному стрессу обработкой HCA и окрашенных антителами Sp1 или Sp3, имели сине-зеленые ядра, что указывает на повышенного уровня белка в ядре (рис.2 ф, р ). Более того, окрашивание антителом Sp2 показало, что уровни этого белка не были изменены в цитоплазме или ядре из-за вызванного HCA истощения глутатиона и окислительного стресса (рис. 2 г – 1 ). Клетки, которые окрашивались положительно на Sp1 и Sp3, определяли как нейрональные путем параллельного иммуноокрашивания антителом к ​​нейрофиламентам (данные не показаны), как описано ранее (Zaman et al., 1999).

Рис. 2.

HCA-индуцированное истощение глутатиона и окислительный стресс индуцируют Sp1 ( A ) и Sp3 ( C ), но не Sp2 ( B ) в ядре корковых нейронов эмбриона.Иммуноцитохимический анализ Sp1 ( a, d ), Sp2 ( i ), Sp3 ( m, p ) и ядерного окрашивания DAPI ( b, e, h, k, n, q ) в макете. -обработанные ( a, g, m, b, h, n ) или обработанные HCA ( d, j, e, k, q ) смешанные культуры корковых нейронов. Клетки помещали на предметные стекла с восемью лунками на 24 часа и обрабатывали HCA (3 мм) в течение 3 часов. Затем клетки фиксировали 4% PFA в течение 15 мин и проводили иммунофлуоресцентное окрашивание, как описано в разделе «Материалы и методы».Масштабная линейка 20 мкм.

Антиоксиданты, которые предотвращают апоптотическую смерть, вызванную истощением глутатиона, также предотвращают связывание ДНК Sp1 и Sp3, вызванное истощением глутатиона

Окислительный стресс определяется как дисбаланс между оксидантами и антиоксидантами в пользу оксидантов (Sies, 1997; для обзора см. Ratan, 1999). Таким образом, если за связывание ДНК Sp1 и Sp3, вызванное HCA, отвечает окислительный стресс, то антиоксиданты, корректирующие дисбаланс, должны уменьшать или подавлять индукцию. Чтобы ответить на этот вопрос, мы выбрали хелатор железа дефероксамин (DFO; 100 мкм) и нехелатирующий железо ингибитор перекисного окисления липидов бутилированный гидроксианизол (BHA; 10 мкм).Ранее мы продемонстрировали, что эти антиоксиданты полностью устраняют индуцированный HCA апоптоз в корковых нейронах (Ratan et al., 1994b, Zaman et al., 1999). В анализах гель-сдвига мы обнаружили, что DFO (фиг.3 A ) и BHA (фиг.3 B ) подавляют индуцированное HCA связывание ДНК Sp1 и Sp3. Эти результаты предполагают, что индуцированный HCA окислительный стресс опосредует усиленное связывание ДНК Sp1 и Sp3 в корковых нейронах. Ранее мы продемонстрировали, что DFO усиливает связывание ДНК фактора, индуцируемого гипоксией, и активирует белок, связывающий фактор-1 / цАМФ, связывающий элемент ответа на гипоксию (Zaman et al., 1999), предполагая, что его ингибирование активации Sp1 и Sp3 не отражает неспецифическое ингибирование связывания ДНК всех факторов транскрипции.

Рис. 3.

Увеличение связывания ДНК Sp1 и Sp3, индуцированное аналогом глутамата HCA, ингибируется антиоксидантами; Связывание ДНК Sp1 и Sp3 в нейронах коры активируется перекисью водорода. Индукция связывания ДНК Sp1 и Sp3 за счет индуцированного HCA истощения глутатиона (4 часа) снижается антиоксидантным хелатирующим агентом железа DFO (100 мкм; A ) и ингибитором перекисного окисления липидов BHA (10 мкм; B ). C, Добавление экзогенного пероксида, генерируемого ферментом DAAO и его субстратом d-ala (20 мМ) в течение 4 часов, увеличивает связывание ДНК Sp1 и Sp3 в зависимости от концентрации в нейронах коры головного мозга. Индукция наблюдается, несмотря на отсутствие морфологических или биохимических свидетельств гибели клеток корковых нейронов. D, Добавление каталазы отменяет связывание ДНК Sp1 и Sp3, индуцированное d-ala (20 мМ) и DAAO (5 мЕд). Примеры представляют от трех до пяти независимых экспериментов.

Чтобы определить, способно ли добавление перекиси водорода АФК к кортикальным нейронам также индуцировать связывание ДНК Sp1 и Sp3, мы добавляли возрастающие концентрации фермента оксидазы d-аминокислоты (DAAO; 1–5 мЕд) и его субстрата d -аланин (d-ala; 20 мм) к среде купания корковых нейронов эмбриона крысы. DAAO катализирует стереоселективное окислительное дезаминирование d-аминокислот с образованием пероксида водорода посредством следующей реакции: d-аминокислота + H 2 O + O 2 → α-кетокислота + NH 3 + H 2 О 2 (Stegman et al., 1998). Как и ожидалось, мы обнаружили, что перекись водорода, генерируемая из DAAO, индуцирует три комплекса в кортикальных нейронах в зависимости от концентрации (рис. 3 C ). Анализ сверхсдвига подтвердил, что, подобно истощению глутатиона, самый медленный мигрирующий комплекс содержит Sp1, а два более быстро мигрирующих комплекса содержат Sp3 (данные не показаны). Кроме того, связывание ДНК Sp1 и Sp3, индуцированное d-ala / DAAO, может быть полностью подавлено совместным применением фермента каталазы, поглощающего пероксид (100 Ед / мл; рис.3 D ) или неферментный пируват, поглотитель перекиси (2 мм; данные не показаны).

Эти результаты показывают, что Sp1 и Sp3 являются индуцируемыми окислительным стрессом факторами транскрипции in vitro . Чтобы определить, могут ли уровни белка Sp1 и Sp3 индуцироваться аналогичным образом in vivo в моделях грызунов, в которых потеря нейронов частично объясняется окислительным стрессом, мы исследовали иммунореактивность Sp1 и Sp3 на модели трансгенных мышей или химической модели мыши. HD (рис.4). Линия R6 / 2 представляет собой линию трансгенных мышей, экспрессирующих экзон 1 гена HD человека с увеличенным повтором CAG (Mangiarini et al., 1996). У мышей наблюдается потеря массы тела и мозга, начиная с 6-недельного возраста, а в 9-11 недель у них развивается нарушение походки и движений, а также эпилепсия. Эти клинические признаки, наряду с атрофией полосатого тела и внутриядерными включениями нейронов, сходны с HD у людей. Было обнаружено, что в 12-недельном возрасте уровни Sp1 и Sp3 в мозге мышей R6 / 2 были значительно увеличены по сравнению с контрольными животными из их однопометного помета, по данным иммуногистохимического мониторинга (рис.4 A – F ) или Вестерн-блоттинг (рис. 4 G ). Sp1 и Sp3 аналогичным образом индуцировались в клетках в области, прилегающей к потере нейронов, в ответ на 3-NP. 3-NP представляет собой митохондриальный токсин, который вызывает поражения полосатого тела, имитирующие HD и опосредованные механизмами окислительного стресса, вызванными эксайтотоксичностью (Beal et al., 1993; Kim and Chan, 2002). Взятые вместе, эти результаты согласуются с представлением о том, что Sp1 и Sp3 индуцируются стимулами, которые приводят к окислительному стрессу in vivo .

Рис. 4. Иммунореактивность тканей

Sp1 и Sp3 у трансгенных мышей R6 / 2 и мышей с поражением 3-NP. Иммунореактивность Sp1 ( A – C ) и Sp3 ( D – F ) в неостриатуме 12-недельных контрольных мышей дикого типа ( A, D ) и трансгенных мышей HD R6 / 2 ( B , E ) и мышей дикого типа с поражением 3-NP ( C, F ). Показано Sp1 и Sp3 иммуноокрашивание нейронов контрольных мышей дикого типа ( A, D ). Заметно повышенная иммунореактивность Sp1 и Sp3 наблюдалась у мышей R6 / 2 по сравнению с контролем дикого типа с наибольшим увеличением иммунореактивности Sp3.У мышей с 3-NP-поражением иммунореактивность Sp1 ( C ) и Sp3 ( F ) была увеличена в нейронах, окружающих ядро ​​поражения (звездочка) в пределах полутени или переходной зоны нейронального повреждения. Масштабные линейки: (в E ) A, B, D, E, 100 мкм; (в F ), C, F, 200 мкм. Уровни белка G, Sp1 и Sp3 у 12-недельных контрольных однопометников и модели HD у трансгенных мышей R6 / 2. α-Тубулин использовали в качестве контроля нагрузки. H, График разброса денситометрических значений (нормированных на α-тубулин) для уровней белка Sp1 и Sp3 у семи контрольных однопометных мышей и девяти мышей R6 / 2 HD.

Вынужденная высокоуровневая экспрессия полноразмерного Sp1 или полноразмерного Sp3, но не только его ДНК-связывающего домена цинкового пальца, предотвращает смерть кортикальных нейронов, вызванную окислительным стрессом или повреждением ДНК

Чтобы определить, является ли избыточная экспрессия Sp1 достаточного для отмены гибели кортикальных нейронов, вызванной истощением глутатиона, мы создали векторы на основе HSV-1 с дефицитом репликации, которые несут ген Sp1 дикого типа (HSV-Sp1-wt) или усеченную форму Sp1, содержащую ДНК-связывающий домен отдельно (HSV-Sp1-ZnF).Sp1-ZnF может связывать ДНК, но не обладает участками молекулы Sp1, необходимыми для активации транскрипции (Chapman and Perkins, 2000). В качестве дополнительного контроля мы вставили ген β-галактозидазы (LacZ) в вектор HSV (HSV-LacZ). Инфекция кортикальных нейронов HSV-Sp1-wt (рис.5 A ), но не HSV-Sp1-ZnF (рис.5 A ) или HSV-LacZ (рис. 5 D ), приводила к устойчивому , MOI-зависимая экспрессия гетерологичного Sp1 в корковых нейронах, контролируемая антителом против Sp1 (рис.5 A, D ) или антителом против Flag (рис. 5 D ) через 6–12 часов после заражения. Для экспериментов по жизнеспособности HSV использовали MOI, равный 2, потому что этот MOI привел к инфицированию ~ 15-25% нейронов в чашке (рис. 5 C ) без токсичности в течение 48 часов после заражения. Сверхэкспрессия Sp1 HSV приводила к трехкратной индукции Sp1-зависимой активности люциферазы по сравнению с HSV-LacZ.

Рис. 5.

HSV можно использовать для достижения экспрессии гетерологичного Sp1 в корковых нейронах. A, Иммуноблоттинг, демонстрирующий экспрессию гетерологичного Sp1 в корковых нейронах через 24 часа после заражения векторами HSV. HSV имеет MOI 2. B, HSV-LacZ приводит к MOI-зависимой экспрессии β-галактозидазы в корковых нейронах. C, Инфекция HSV-Sp1 нейронов коры приводит к индукции активности люциферазы, управляемой элементами ответа Sp1, по сравнению с HSV-LacZ. Результаты представляют собой средние значения ± стандартная ошибка для трех отдельных экспериментов. D, Иммуноблот-анализ подтверждает MOI-зависимую, управляемую вектором HSV экспрессию Sp1 (HSV-Sp1) или β-галактозидазы.Параллельно иммуноблоттинг с антителом Flag подтверждает, что HSV-Sp1 приводит к гетерологичной, а не эндогенной экспрессии Sp1.

Чтобы определить влияние увеличения активности Sp1 с использованием вектора HSV на вызванную окислительным стрессом смерть нейронов коры, мы отслеживали жизнеспособность клеток, инфицированных HSV-LacZ, HSV-Sp1-wt и HSV-Sp1-ZnF 17– 24 часа после заражения. LacZ диффузно экспрессируется в цитоплазме (рис.6 A ) и нейритах нейронов, тогда как Sp1-wt и Sp1-ZnF находятся в основном в ядерном компартменте (рис.6 А ). В контролируемых условиях неокислительного стресса ядра клеток, инфицированных HSV-LacZ, HSV-Sp1-wt или HSV-Sp1-ZnF и окрашенных ядерным зондом DAPI, имели овальную форму и гомогенно окрашивались с умеренной интенсивностью. Эти явно нормальные ядра присутствовали в нейронах с гладкоклеточными телами и разветвленными нейритами, как определено с помощью дифференциальной интерференционной контрастной микроскопии Номарского. Параллельные культуры инфицировали HSV-LacZ, HSV-Sp1-wt или HSV-Sp1-доминантно отрицательным (dn), подвергали воздействию аналога глутамата HCA в течение 16–18 часов и окрашивали DAPI или визуализировали оптикой Номарского.Клетки, инфицированные HSV-Sp1-ZnF или HSV-LacZ и подвергнутые воздействию HCA, показали массивные изменения в структуре хроматина (конденсацию), на что указывает значительно усиленная флуоресценция DAPI. Эти изменения в структуре хроматина согласуются с апоптотической гибелью клеток, наблюдаемой ранее в корковых нейронах, подвергшихся истощению глутатиона (Ratan et al., 1994b). Напротив, клетки, инфицированные HSV-Sp1-wt, которые подвергались окислительному стрессу, обычно сохраняли овальное умеренно интенсивное окрашивание нормальных ядер.Два независимых наблюдателя, которые не были осведомлены о группе лечения, подсчитали количество экспрессирующих LacZ-, Sp1-wt и Sp1-ZnF клеток, которые обладают нормальной морфологией ядра в условиях окислительного стресса, и подтвердили, что клетки, экспрессирующие гетерологичный Sp1-wt, были значительно более устойчивы к гибели, вызванной истощением глутатиона, чем клетки, экспрессирующие гетерологичный LacZ или Sp1-ZnF (фиг. 6 B ). Кроме того, TUNEL (маркер повреждения ДНК в результате окислительного стресса, вызванного HCA) был выполнен вместе с иммунофлуоресценцией для Sp1, LacZ или Sp1-ZnF (рис.6 С ). Эти эксперименты показали, что после 18 часов обработки HCA (1 мм) только нейроны, экспрессирующие LacZ или Sp1-ZnF, были TUNEL-положительными, тогда как клетки, экспрессирующие Sp1, не были (фиг. 6 C ).

Рис. 6. Сверхэкспрессия

Sp1 (HSV-Flag-Sp1), но не только ДНК-связывающего домена Zn пальца Sp1 (HSV-Flag-Sp1-ZnF) или HSV-LacZ, в нейронах коры головного мозга подавляет клетки, индуцированные окислительным стрессом смерть в корковых нейронах. A, DAPI-окрашивание LacZ-позитивных, Flag-Sp1-позитивных или Flag-Sp1-ZnF-позитивных нейронов коры.Столбец FITC отражает вторичное антитело FITC, которое распознает кортикальные нейроны, экспрессирующие LacZ-, Flag-Sp1-wt или Flag-Sp1-ZnF. Обратите внимание на присутствие LacZ в телах клеток, а также в нейритах, что типично для корковых нейронов в культуре. Также обратите внимание на присутствие Sp1-wt и Sp1-ZnF в ядре, ожидаемую локализацию для этих факторов транскрипции. Столбец DAPI показывает окрашивание DAPI FITC-положительных клеток в том же ряду вместе с несколькими окружающими FITC-отрицательными клетками. Обратите внимание, что HCA вызывает увеличение процента клеток с пикнотическими ядрами, которые демонстрируют более сильную флуоресценцию, что характерно для апоптотических клеток.Однако нейроны, экспрессирующие Flag-Sp1-wt, обнаруживают тусклое диффузное окрашивание DAPI, которое характерно для нормальных клеток. Кортикальные нейроны инфицировали 2–5 MOI векторов HSV. B, Количественный анализ. Сверхэкспрессия Flag-Sp1-wt, но не Flag-Sp1-ZnF или LacZ, блокирует увеличение апоптотических клеток, вызванное HCA (LacZ или Sp1-ZnF по сравнению с Sp1-wt, p <0,01). В каждой группе было подсчитано не менее 300 клеток, и результаты представляют собой средние значения ± стандартная ошибка для трех разных слайдов. C, TUNEL выполняли для измерения HCA-индуцированного повреждения ДНК LacZ-позитивных, Flag-Sp1-позитивных и Flag-Sp1-ZnF-позитивных кортикальных нейронов.Столбец Cy3 (красный) отражает вторичное антитело Cy3, которое распознает LacZ, Flag-Sp1, Flag-Sp3 или Sp1-ZnF. Наложенный столбец отражает зеленую флуоресценцию TUNEL – FITC, наложенную на красную флуоресценцию вторичных антител Cy3 для β-галактозидазы, Sp1 и Sp1-ZnF и синюю флуоресценцию ядра.

Чтобы определить, может ли сверхэкспрессия Sp1 с использованием герпетических векторов ингибировать смерть, вызванную апоптотическими стимулами, отличными от истощения глутатиона, мы исследовали влияние HSV-Sp1-wt инфекции кортикальных нейронов на апоптоз, вызванный повреждающим ДНК агентом камптотецином.Камптотецин — цитотоксический растительный алкалоид, который вызывает повреждение клеток, ингибируя активность ДНК-топоизомеразы I, что приводит к повреждению двухцепочечной ДНК (Ng et al., 2001). Предыдущие исследования установили, что, как и истощение глутатиона, смерть корковых нейронов, вызванная камптотецином, имеет характерные морфологические признаки апоптоза. В отличие от апоптоза, вызванного истощением глутатиона, апоптоз, вызванный камптотецином, не связан с повышенным образованием перекиси водорода и не блокируется антиоксидантом N -ацетилцистеином.Жизнеспособность клеток, измеренная по снижению МТТ, показала, что кортикальные нейроны, инфицированные HSV-Sp1-wt, но не HSV-LacZ или HSV-Sp1-dn, были более устойчивы к смерти, вызванной камптотецином, в диапазоне концентраций камптотецина (рис. 7 А ). В параллельных культурах TUNEL [маркер двухцепочечных разрывов ДНК, возникающих в результате ингибирования топоизомеразы, вызванного камптотецином (Morris and Geller, 1996)] выполнялся вместе с иммунофлуоресценцией для Sp1, LacZ или Sp1-ZnF (фиг. 7 B ). ).Эти исследования показали, что после 18 часов лечения камптотецином только нейроны, экспрессирующие LacZ или Sp1-ZnF, были TUNEL-положительными, тогда как клетки, экспрессирующие Sp1 или Sp3, не были. Взятые вместе, эти исследования показывают, что сверхэкспрессия Sp1 или Sp3 может аннулировать повреждение и смерть нейронов, связанные с окислительным стрессом или другими установленными индукторами апоптоза, включая ингибитор топоизомеразы камптотецин (рис. 7).

Рис. 7.

Сверхэкспрессия Sp1-wt или Sp3-wt, но не Sp1-ZnF или LacZ, ингибирует гибель нейронов, обусловленную повреждающим ДНК агентом и ингибитором топоизомеразы камптотецином. А, Количественный анализ. Сверхэкспрессия Flag-Sp1 или Flag-Sp3, но не LacZ или Flag-Sp1-ZnF снижает гибель клеток, вызванную камптотецином (2–10 мкм). Кортикальные нейроны инфицировали 2–5 MOI векторов HSV. Жизнеспособность клеток измеряли путем инкубации кортикальных нейронов с МТТ в течение 2 часов и измерения степени восстановления до синего формазана. Результаты представляют собой средние значения ± стандартная ошибка для трех отдельных экспериментов. B, TUNEL, маркер двухцепочечных разрывов ДНК в результате ингибирования топоизомеразы камптотецином (Morris and Geller, 1996) LacZ-позитивных, Flag-Sp1-позитивных, Flag-Sp3-позитивных или Flag-Sp1- ZnF-положительные нейроны коры.Столбец Cy3 (красный) отражает вторичное антитело Cy3, которое распознает LacZ, Flag-Sp1, Flag-Sp3 или Sp1-ZnF. Наложенный столбец отражает зеленую флуоресценцию TUNEL – FITC, наложенную на красную флуоресценцию вторичных антител Cy3. Обратите внимание, что только клетки, экспрессирующие LacZ или Flag Sp1-ZnF, имеют желтый цвет, тогда как Cy3-позитивные клетки, экспрессирующие Flag-Sp1 и Flag-Sp3, не помечены TUNEL и, следовательно, имеют красный цвет.

Discussion

Sp1 и Sp3 являются окислительно-восстановительными факторами транскрипции в нейронах

Существует множество доказательств, связывающих окислительный стресс с инициацией или распространением потери нейронов при неврологических заболеваниях (Beal, 2000).Эти данные стимулировали поиск регуляторов транскрипции, которые индуцируются окислительным стрессом в нейронах, общий эффект которых заключается в предотвращении гибели нейронов (Ratan, 1999). Здесь мы демонстрируем, что базальная активность связывания ДНК Sp1 неожиданно низка в эмбриональных кортикальных нейронах и резко индуцируется агентами, которые индуцируют окислительный стресс в этих клетках (рис. 1, 2,4 A ). Во-вторых, мы использовали анализ сдвига геля, чтобы показать, что один из ДНК-связывающих комплексов Sp1, индуцированных окислительным стрессом в корковых нейронах, содержит Sp1, а два комплекса, которые медленно мигрируют, содержат Sp3 (рис.1 В ). Кроме того, мы использовали иммуноблот-анализ (рис. 1 E – G ) и иммуноцитохимию (рис. 1 H ), чтобы продемонстрировать, что уровни белков этих факторов транскрипции увеличиваются в ядрах кортикальных нейронов с окислительным стрессом и что антиоксиданты, показанные ранее для подавления индуцированной окислительным стрессом гибели корковых нейронов также отменяет индуцированное истощением глутатиона связывание ДНК Sp1 и Sp3 (фиг. 2 A, B ). Наконец, мы демонстрируем, что окислительный стресс может усиливать активность Sp1-зависимого репортерного гена (данные не показаны).Эти результаты устанавливают Sp1 и Sp3 как окислительно-восстановительные факторы транскрипции в нейронах эмбриональной коры и добавляют эти факторы к небольшому списку известных активаторов и репрессоров транскрипции (например, ядерный фактор κB, активаторный белок-1 и фактор транскрипции теплового шока-1). индуцироваться окислительным стрессом в нейронах (Lezoualc’h and Behl, 1998; Post et al., 1998; Bijur et al., 1999; Scortegagna et al., 1999).

Активация Sp1 и Sp3, по-видимому, временно связана с началом окислительного стресса в корковых нейронах, а не с поздним событием, которое является следствием гибели клеток, вызванной окислительным стрессом.Активация связывания ДНК Sp1 и Sp3 происходит в течение первых 2 часов воздействия глутамата или HCA и максимальна к 5 часам. Кинетика активации Sp1 и Sp3 демонстрирует, что индукция этих факторов является «ранним» ответом на клеточный стресс, и их активация начинается за 8–10 часов до точки, в которой нейроны становятся необратимо «привязанными» к пути гибели клеток (Ratan et al., 1994b; Zaman et al., 1999; Chatterjee et al., 2001). Тесная временная взаимосвязь между окислительным стрессом и активацией Sp1 и Sp3 также подтверждается наблюдением, что структурно различные антиоксиданты, известные как уменьшающие окислительный стресс и ингибирующие окислительную токсичность глутамата, могут блокировать активацию Sp1 и Sp3 за счет истощения глутатиона, несмотря на то, что они не влияют на глутатион истощение как таковое (Ratan et al., 1994a; Заман и др., 1999).

Хотя классически считается, что он регулирует конститутивную экспрессию многочисленных генов домашнего хозяйства, было обнаружено, что транскрипционная активность Sp1 изменяется в связи с дифференцировкой (Leggett et al., 1995; Yan and Ziff, 1997; Krainc et al., 1998) и пролиферацией. (Black et al., 1999) и регулировать экспрессию генов в связи с этими, а также другими клеточными функциями. В соответствии с данными, представленными в данном документе, одно из этих исследований продемонстрировало практически полное отсутствие базального связывания ДНК Sp1 и Sp3 в таких органах, как мозг и мышцы, в которых большинство клеток являются постмитотическими (Leggett et al., 1995). Двумерный электрофорез показал, что снижение связывания ДНК Sp1 и Sp3 в постмитотических тканях связано с фосфорилированием Sp1 и Sp3. Соответственно, обработка in vitro экстрактов ядер из взрослого мозга фосфатазой устраняет фосфорилирование Sp1 и Sp3 и увеличивает сродство этих факторов к каноническому сайту связывания ДНК Sp1 в 10 раз. Эти результаты согласуются с моделью, в которой посттрансляционная модификация Sp1 путем активации фосфатазы (дефосфорилирование) или ингибирования гистондеацетилазы (ацетилирование) (Ryu et al., 2003) может объяснить резкое увеличение связывания ДНК, которое мы наблюдаем в ответ на окислительный стресс. Наша способность наблюдать вызванные окислительным стрессом изменения в связывании ДНК Sp1 и Sp3, вероятно, также улучшается, потому что мы тщательно проверяли, что концентрация ядерного экстракта, который мы используем, находится в динамическом диапазоне связывания ДНК для Sp1 и Sp3 (рис. . 1 А ).

Sp1 и Sp3 могут действовать как факторы транскрипции против смерти

Приведенные здесь данные подтверждают вывод о том, что Sp1 и Sp3 являются достаточными компонентами защитного гомеостатического ответа на окислительный стресс (рис.6) и одно возможное последствие окислительного стресса — повреждение ДНК (рис. 7) в нейронах. В самом деле, недавние исследования подтверждают, что мотивы Sp1 ответственны за регуляцию белка сурвивина IAP (Li and Altieri, 1999). Было показано, что члены семейства белков IAP подавляют апоптоз, индуцированный окислительным стрессом, путем прямого подавления активности концевой каспазы-3 и каспазы-7 (Tamm et al., 1998; Suzuki et al., 2000). Интересно, что сурвивин экспрессируется не только при обычных раковых заболеваниях человека, но и в некоторых типах эмбриональных нейронов (Adida et al., 1998), предполагая, что этот белок готов действовать как ингибитор апоптоза в корковых нейронах, используемых в настоящем исследовании. Bcl-2 и Bcl-x, два других общих ингибитора апоптоза, также имеют важные сайты Sp1 в своих промоторах (Grillot et al., 1997; Dong et al., 1999), и было показано, что p53 подавляет экспрессию антиапоптотический фактор теломераза за счет связывания с родственными мотивами Sp1 в промоторе теломеразы (Kanaya et al., 2000). Наконец, Sp1 расщепляется каспазами при индуцированном IgM апоптозе в В-клетках (Rickers et al., 1999) и индуцированного ретиноидами апоптоза Т-клеток (Piedrafita and Pfahl, 1997). Взятые вместе, эти наблюдения подтверждают антиапоптотическую роль Sp1.

Ингибирование активации Sp1 при полиглутаминовых расстройствах, таких как HD, может объяснять повышенную уязвимость к окислительному стрессу

Данные, приведенные здесь, согласуются с моделью, в которой Sp1 является частью компенсаторной генетической программы окислительного стресса в нейронах. Предсказание этой модели состоит в том, что нейроны с приобретенными или унаследованными дефектами передачи сигналов Sp1 будут более уязвимы для оксидантов.Действительно, ткань аутопсии от пациентов с HD обнаруживает заметные дефекты связывания ДНК Sp1 (несмотря на повышенные уровни Sp1; Dunah et al., 2002) (Fig. 3) и повышенные маркеры окислительного повреждения (Browne et al., 1999). Кроме того, токсичность культивируемых нейронов, индуцированная принудительной экспрессией мутантного хантингтина с патологическим количеством полиглутаминовых повторов, может быть устранена совместной экспрессией Sp1 и его коактиватора TAFII130 (Dunah et al., 2002; Li et al., 2002) или посредством экзогенное добавление низкомолекулярных антиоксидантов (Wyttenbach et al., 2002). Будущие исследования определят точный порядок окислительного стресса и нарушения передачи сигналов Sp1 при HD. Тем не менее, эти результаты предполагают, что низкомолекулярные активаторы экспрессии Sp1-зависимого гена могут быть благоприятными терапевтическими мишенями для множества нейродегенеративных состояний, включая HD, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз и инсульт, которые в некоторых случаях были связаны с расширением полиглутаминовые повторы и во всех случаях были связаны с окислительным стрессом.

Сноски

  • Эта работа была поддержана грантами Национального института здравоохранения R29 NS34943 и R01 NS39170 для R.R.R. КДНК для домена цинкового пальца Sp1 была подарком доктора Нила Перкинса (Департамент биохимии, Университет Данди, Данди, Великобритания), а полноразмерные Sp1 и Sp3 были подарком доктора Гунтрама Суске (Институт молекулярной биологии).

    Leave a comment